HEMOGRAMA COMPLETO (Recuento celular, Hematocrito, Frotis sanguneo)

EVIDENCIA DE HACER : Recuento celular, Hematocrito, Frotis sanguneo

EVIDENCIA DE PRODUCTO: Reporte de interpretacin diagnstica.
INTRODUCCIN
El hemograma consiste en un conteo de los elementos celulares de la sangre como son las clulas rojas,
blancas y plaquetas. Este anlisis incluye los ndices o sea el contenido de hemoglobina de la clula roja,
dimetro de las clulas. El diferencial o el porcentaje de cada tipo (5) de clulas blancas se refiere a las
diferentes clulas blancas que se encuentran normalmente en la sangre expresado en porcentaje del total de
clulas blancas. El valor principal, valor de este anlisis, nos permite dar una informacin general del organismo,
prognosis, respuesta a tratamiento y recuperacin. El nmero total de clulas blancas es una gua til para
conocer la severidad del proceso de la enfermedad. Un nmero elevado de clulas blancas puede ser la
respuesta del organismo para defenderse de una infeccin, o en otros casos patolgicos, el aumento de clulas
anormales o inmaduras de clulas blancas puede ser el caso de leucemia o cncer en la sangre. El nmero total
de clulas rojas es una medida importante para la evaluacin de anemias. Los valores de hemoglobina
complementan el tamizaje para la evaluacin de las enfermedades que causan anemias. Por ejemplo, una
disminucin del contenido de hemoglobina en la clula roja con una disminucin en el dimetro de la misma, nos
indica que la anemia es microctica, posiblemente por una deficiencia de hierro.Segn Minsa (Hospital
Cayetano Heredia) Per los valores de Hemoglobina son:

I.- PROBLEMAS
1.1 Existir alguna alteracin el Hematocrito en los alumnos del Grupo de Laboratorio de 4:30pm a 7:10 pm en
la UCV? (Escuela de Medicina)?
II.- HIPTESIS
2.1 Segn los datos del Libro de Balcells (21 Edicin), mediremos el rango normal de Hematocrito de dos
compaeros, deberan ser normales, ya que ellos no han presentado ninguna sintomatologa
2.2 Calculamos que existe al menos un caso en la alteracin en el Hematocrito.

III.- OBJETIVOS
A. Objetivo General:

Aprender a realizar los Exmenes Hematolgicos: Hemograma-Hematocrito-Frotis sanguneo.

B. Objetivos Especficos:
Conocer, determinar, los elementos formes de la sangre
Conocer, determinar, comprender la realizacin del Hematocrito.
Interpretar los Valores Normales de las Pruebas Hematimtricas mencionadas, segn su especificidad
y sensibilidad.
Toma de muestra
1. TOMA DE MUESTRA SANGUNEA
2. DEFINICIN: Procedimiento que permite acceder al torrente sanguneo para extraer una pequea muestra de
sangre, que ser utilizada en diversas pruebas.
3. TOMA DE MUESTRA SANGUINEA Podemos obtener muestras de sangre venosa y/o de sangre arterial.
SANGRE ARTERIAL til en medir pO2, pCO2 y pH del plasma. SANGRE VENOSA Las sustancias ha analizar
estn adecuadamente solubles y dispersas.
4. TOMA DE MUESTRA SANGUINEA Para extraer una muestra sangunea se pueden usar diversos mtodos,
as como seguir varias etapas.
5. PREPARACIN DE LOS MATERIALES GUANTES MASCARILLA GAFAS PROTECTORAS GRADILLAS
CAMPO ESTERIL ALCOHOL AL 70% ALGODN O TORUNDAS DE GASA ESPARADRAPO JERINGAS DE
5mL AGUJAS (TIPOS) BANDA ELASTICA, TORNIQUETE O LIGADURA TUBOS AL VACIO CON
ANTICOAGULANTE EDTA (K3), EDTA (Na2) U OTRO ANTICOAGULANTE
6. PREPARACIN DE LOS MATERIALES VIALES CON ANTICOAGULANTE EDTA 1,5% VIALES CON
CITRATO DE SODIO AL 3.8% TUBOS DE VIDRIO DE 13x100 CONTENEDOR PARA AGUJAS PUNZANTES
FRASCO CON SOLUCIN DE LEJA 3-5% CUADERNO DE REGISTRO IMPRESO DE PETICIN DE
ANLISIS
7. PREPARACIN DE LOS MATERIALES AGUJAS:
8. PREPARACIN DE LOS MATERIALES EDTA (K2) EDTA (Na2) CITRATO DE SODIO AL 3.8% HEPARINA
DE LITIO TUBOS AL VACIO CON ANTICOAGULANTE EDTA (K2), EDTA (Na2) U OTRO ANTICOAGULANTE
9. PREPARACIN DEL PACIENTE Ayuno del paciente Sobre el ejercicio muscular Preparacin psicolgica
Posicin del paciente
10. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA Pasos a realizar: 1.- Identificar al paciente (preguntar su
nombre) .- Verificar si corresponde el nombre .- Extremar precauciones .- Un error aqu podra conllevar la
anulacin de toda la serie analtica. 2.- Revisar peticin de anlisis y comprobar, nmero de determinaciones,
datos del paciente y servicio solicitante.
11. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA Constatar que el paciente est preparado para la toma de
muestra (anmica y biolgicamente). 4.- Anotar al reverso de la solicitud del examen, si el paciente est tomando
medicamento. 5.- Explicar al paciente en que consistir la toma de muestra sangunea. 6.- Verificar que los
materiales a usar estn listos y que el paciente est cmodo.
12. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA Seleccionar el sitio de la vena donde se realizar la puncin.
Considerar: Cicatrices extensas. Hematomas. Terapia intravenosa. Adultos: venas de fosa cubital del brazo.
Nios: venas de la fosa cubital. venas del dorso de la mano. venas del tobillo del pie. Otro lugar: vena yugular
externa.

13. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA Ligar el brazo aprox. 4 dedos por encima de la flexin del
codo o a 10 cm. de l. .- Ajustar bien alrededor del brazo del paciente. .- No dejar ligado el brazo ms de 1 2
14. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA Palpar la vena con el dedo, escoger aquella que se pueda
palpar, el paciente deber cerrar la mano ayudando a visualizar las venas superficiales. 10.- Limpiar la zona con
alcohol al 70% en un rea de 2 pulgadas con movimientos circulares, desde el centro de la zona hacia afuera y
dejar secar la piel.
15. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA No tocar el rea una vez desinfectada. 16. Introducir la aguja,
formando ngulo aprox. 15 brazo-aguja y con bisel hacia arriba. La aguja de calibre adecuado. Este paso es
variable pues hay varias maneras de colectar una muestra sangunea, las cuales se mencionan a continuacin.
16. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA VENA COLAPSADA EL BISEL DE LA AGUJA NO HA
ENTRADO EN LA VENA LA AGUJA TRASPASA LA PARED POSTERIOR CAUSAS DE CESE DE FLUJO DE
SANGRE DURANTE LA VENIPUNCIN PTIMO
17. OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA USANDO LA JERINGA Eliminar el protector de la aguja y
pinchar la vena localizada. Tirar suavemente del mbolo hasta conseguir el volumen de sangre deseado. Tan
pronto como la sangre comience a fluir en la jeringa no hay que volver a mover la aguja.
OBTENCIN DE LA MUESTRA SANGUINEA USANDO AGUJA LIBRE Eliminar el protector de la aguja, forme
un solo sistema con el tubo, poniendo dicho sistema entre su dedo pulgar e ndice. Pinchar la vena localizada.
Sujetar el tubo y cambiarlo, si lo desea, por un vial u otro tubo, pero hacerlo muy rpido. Esperar hasta obtener el
volumen deseado.
MUESTRA REQUERIDA:
Sangre venosa tomada directamente en tubos con antigoagulante EDHTA.

MATERIAL:

Pipeta de glbulos rojos (De Thoma) o pipeta

Pipeta de glbulos blancos (De Thoma) o automtica (de 0-100 ml). pipeta automtica (de 0 a 100 ml).
Diluyente de glbulos rojos: Cloruro de Sodio
Turk al 1%.

EQUIPOS:
Microscopio.

Hemocitmetro

(Cmara

de

Neubauer).

RECUENTO LEUCOCITARIO (glbulos blancos)

Procedimiento
Una vez obtenida la sangre con anticoagulante o sangre capilar del dedo, proceda a aspirar la sangre
con la pipeta de glbulos blancos hasta la marca de 0,5 y a limpiar la punta con papel absorbente.
Introduzca la pipeta en el tubo que contenga solucin de Turk y absorba hasta la marca de 11 (no
debe haber burbujas).
Tape ambos extremos y proceda a mezclar manualmente o en un rotador automtico por 2 3
minutos.
Monte la laminilla de vidrio en la cmara para recuento que debe estar limpia y seca.

Agite la pipeta y descartar las cuatro primeras gotas para luego colocar una gota pequea de esta
solucin en la cmara.
Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las clulas se sedimenten.
Enfoque con objetivo de 10X y cuente en 4 cuadrados grandes angulares.

Cuando se usa la pipeta automtica, se toma 20 ml (0,02 ml) de sangre total con anticoagulante o sangre
capilar con anticoagulante y se diluye en un tubo que contenga 380 ml de solucin de Turk (aqu tenemos una
dilucin 1:20).

La lectura se realiza en los campos 1, 3, 7 y 9 como est indicado en la figura.

Adems de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se deben contar todos los
leucocitos que se encuentren adheridos en la lnea horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario,
todos los leucocitos, adheridos a la lnea horizontal inferior y vertical interior.

Resultados
N de leucocitos x mm3 = Leucocitos contados en 4 campos
Altura x dilucin x rea
Reemplazando = Leucocitos contados en 4 campos
1/10 x 1/20 x 4
= Leucocitos contados en 4 campos
4/200
= X/1 = N leucocitos contados x 50
200

Los normoblastos no se destruyen (lisis) en el lquido de dilucin, por lo tanto pueden observarse al realizar el
recuento leucocitario y confundirse con los leucocitos, de tal manera que se debe emplear la siguiente
frmula:
Clculo:
La concentracin del nmero de normoblastos (por litro) es:

Nmero de normoblatos contados x concentracin o nmero de leucocitos

100 + N de normoblastos contados
Ejemplo:
Si se cuentan 50 normoblastos y la concentracin del nmero de leucocitos es 16 x 109/l, la concentracin del
nmero de normoblastos ser:
50

x 16 = 5,3 x 109/l

100 + 50
y la concentracin de leucocitos corregida ser: 16 - 5,3 = 10,7 x 109/l
En unidades tradicionales las concentraciones de normoblastos y leucocitos se expresan por milmetro
cbico. En tales unidades el clculo correspondiente al ejemplo que se ha dado sera:
50

x 16 000 = 5300 / mm3

100 + 50
Recuento corregido de glbulos blancos o leucocitos = 16 000 - 5300 = 10 700 / mm3

DETERMINACIN DEL VOLUMEN GLOBULAR (Microhematocrito) - Mtodo de Centrifugacin

PROCEDIMIENTO:
Tome la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del pulpejo del dedo, o utilice
capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante de Wintrobe o EDTA. Debe
llenarse aproximadamente 70% - 80% del capilar.
Ocluya (tape) un extremo del capilar con plastilina.
Coloque el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrfuga de microhematocrito, con el
extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma.
Centrifugue por 5 minutos entre 10 000 rpm.
Uso de la escala

Sostenga el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna de eritrocitos (no el extremo
inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de la lnea horizontal correspondiente al cero.
Desplace el tubo a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el nmero 1,0 quede al nivel del
tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la columna de eritrocitos contine sobre la lnea
cero. El tubo debe encontrarse completamente en posicin vertical.
La lnea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicar la fraccin de volumen de stos.

Leer siempre en la direccin de la numeracin ascendente cuantos ml. de empacados de eritrocitos tiene la
muestra.

FORMA DE REPORTE:
Se reporta el volumen de eritrocitos empacados en porcentaje del volumen total.
RELACION HEMATOCRITO HEMOGLOBINA:

Hb:

Hto

3.0 - 3.3
HEMATOCRITO
a) Desinfectar con alcohol la zona donde se extraer la muestra de sangre capilar.
b) Colocar la muestra de sangre en un tubo capilar.
c) Colocar los tubos ordenadamente en una base de plastilina para identificar a que alumno le
pertenece la muestra.
d) Centrifugar el tubo capilar colocado en un tubo de ensayo.
e) Utilizar la carta de lectura del microhematocrito donde se encuentran los parmetros normales del
hematocrito con cada tubo capilar de los alumnos.
f)

Registrar los resultados obtenidos de cada alumno.

RESULTADOS
En el tubo realizado por mi persona se encontr un Hematocrito de 39%

Frotis sanguneo: es la extensin de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se

observarn, al microscopio, las caractersticas de las clulas sanguneas.
Usos: Es un anlisis rutinario que acompaa a todo hemograma, ya sea en forma manual o
automatizado. En este ltimo caso, cuando hay normalidad en todos los elementos sanguneos, se
obtienen los datos grficamente y es opcional verificarlo, esto depender de cada laboratorio.
Este preparado entrega valiosa informacin en casos como las leucemias, deficiencias de hierro,
trastornos genticos de la forma de los eritrocitos, posibles deficiencias de vitamina B12.
CONCLUSIONES.
Los resultados del presente trabajo muestran que el hematocrito fue de 39%
encontrndose entre los valores normales, y hemoglobina fue de 13,1, tambin encontrndose
en el rango normal; es decir en la muestra de sangre, no presenta ninguna alteracin.
El recuento celular fue normal, tanto de Glbulos Rojos, como para la frmula diferencial
de Glbulos Blancos
BIBLIOGRAFA
1.

BECKER K., Ana. Interpretacin del hemograma (en espaol). Rev. chil. pediatr. [online]. 2001, vol.72, n.5 [citado 2010-01-18],
pp. 460-465. ISSN 0370-4106.

2.

Miale, J (1985) (en espaol). Hematologa: medicina de laboratorio. Reverte.

Informe de Reaccin en cadena de la polimerasa

Gel de agarosa teido con bromuro de etidio que muestra varios productos de PCR obtenidos mediante distintoscebadores, con
un bajo nivel de especificidad.

La reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls (polymerase chain reaction),
es una tcnica de biologa molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis,1 cuyo objetivo es obtener un gran nmero
de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo; en teora basta partir de una nica copia de
ese fragmento original, o molde.
Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que tras la amplificacin resulta mucho ms
fcil identificar con una muy alta probabilidad, virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas
(cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados de la amplificacin han
hecho que se convierta en una tcnica muy extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para
llevarla a cabo.

Fundamento:
Inicialmente la tcnica era lenta, ya que las polimerasas se desnaturalizaban al realizar los cambios de temperatura y era
necesario agregar nuevas polimerasas en cada ciclo. Puesto que las temperaturas del ciclo (95 C en las fases
de desnaturalizacin del ADN) suponen la inmediata desnaturalizacin de toda protena, se emplean ADN polimerasas
termoestables, extradas de microorganismos adaptados a vivir a esas temperaturas, restrictivas para la mayora de los
seres vivos. Dichos microorganismos, generalmente arqueas, son: Thermus aquaticus(polimerasa Taq), Pyrococcus
furiosus (Pfu), Thermococcus litoralis (Vent) y Thermus thermophilus (Tth). Generalmente se emplean mezclas de
polimerasas muy procesivas (Taq) con otras capaces de hacer correccin de errores (Pfu, Vent).
Termociclador: aparato en el que se efecta la PCR convencional.

Hoy, todo el proceso de la PCR est automatizado mediante un aparato llamado termociclador, que permite calentar y
enfriar los tubos de reaccin para controlar la temperatura necesaria para cada etapa de la reaccin. Muchos
termocicladores modernos hacen uso del efecto Peltier, que permite tanto calentar como enfriar los tubos simplemente
invirtiendo la corriente elctrica. Los tubos usados para PCR tienen una pared muy fina, lo que favorece una
buena conductividad trmica, permitiendo que se alcance rpidamente el equilibrio trmico. Casi todos los termocicladores
tienen un sistema que calienta la tapa de cierre con el fin de evitar lacondensacin sobre los tubos de reaccin. Los
termocicladores ms antiguos carecan de este sistema y solucionaban el problema de la condensacin con una capa
de aceite en la parte superior de la mezcla de reaccin o con un poco de cera dentro de los tubos.
Por lo general, la PCR es una tcnica comn y normalmente indispensable en laboratorios de investigacin mdica y
biolgica para una gran variedad de aplicaciones. Entre ellas se incluyen la clonacin de ADN para lasecuenciacin,
la filogenia basada en ADN, el anlisis funcional de genes, el diagnstico de trastornos hereditarios, la identificacin
de huellas genticas (usada en tcnicas forenses y test de paternidad) y la deteccin y diagnstico de enfermedades
infecciosas.

Conceptos de la PCR[editar]

Sensibilidad: se refiere a la cantidad mnima de ADN necesaria para que se produzca la amplificacin, es decir, para
obtener una banda. Se relaciona con los falsos negativos, ya que puede que una muestra sea positivas pero sea dada
como negativa porque no se ha amplificado por no tener suficiente cantidad de ADN.

Especificidad: se refiere a la obtencin de un solo producto amplificado. Viene determinada por los oligos y la
especificidad con la que se unen al ADN molde. De esta forma, si los oligos tienen ms de un sitio al que se pueden
unir aparecer ms de un producto amplificado.

Eficiencia: se refiere a la amplificacin mxima que se puede obtener en un nmero determinado de ciclos.

Fidelidad: se refiere a los errores que comete la ADN polimerasa durante la amplificacin. Este concepto es de
especial importancia en la secuenciacin, pero en otros casos no es tan importante. Una buena fidelidad permite evitar
falsos positivos y/o negativos.

Aplicaciones[editar]
La tcnica de la PCR tiene multitud de aplicaciones: ya en ciencia bsica, como herramienta de deteccin y/o generacin de
acervos de fragmentos de ADN de inters; ya en ciencia aplicada, como elemento resolutivo en s mismo, por ejemplo en
diagnstico clnico.
En medicina, la PCR se emplea fundamentalmente como herramienta dediagnosis (Coleman y Tsongalis, 2006):

Permite el genotipar la especie o especies que provocan un determinado cuadro infeccioso: para ello, se amplifica una
zona del genoma bacteriano cuyo producto de PCR posea unas caractersticas de tamao o temperatura de fusin que
permitan identificarlo de forma inequvoca. En el caso de infecciones virales que implican la integracin del genoma del
patgeno en el ADN del hospedador, como es el de la infeccin por VIH, la PCR cuantitativa posibilita la determinacin
de la carga viralexistente y por tanto, del estadio de la enfermedad.

La PCR tambin se puede usar en revisiones mdicas rutinarias, como en los servicios de donantes de sangre, para
test de rutina. A travs de esta tcnica se pueden detectar infecciones en el donante (como VIH o HepatitisB) mientras
an estn en el periodo de incubacin. Dada la sensibilidad de los test de PCR se pueden tomar muestras colectivas o
"pools" (por ejemplo, 96 pruebas individuales). Si una de estas muestras colectivas da positivo, se toman a partir de ella
muestras progresivamente menores hasta que se encuentra el causante.

El diagnstico de enfermedades hereditarias presentes en el genoma es un proceso largo y complicado que puede
acortarse significativamente gracias a la PCR. Cada uno de los genes prueba se pueden amplificar mediante sus
correspondientes cebadores y posteriormente secuenciar para detectar la existencia demutaciones.