RESVERATROL AUMENTA A TERMOGNESE NO TECIDO ADIPOSO MARROM,

AUMENTANDO SIRT1, GASTO DE ENERGIA E DIMINUINDO O ACMULO DE

GORDURA NO TECIDO ADIPOSO DE CAMUNDONGOS ALIMENTADOS COM
DIETA PADRO.
Palavras-chave: Resveratrol, sirtunas, protenas desacopladoras (UCPs), termorregulao.
Introduo
O tecido adiposo um rgo fundamental na regulao do equilbrio energtico. Dois tipos diferentes de
tecido adiposo esto presentes nos mamferos: o tecido adiposo branco (WAT), responsvel pelo
armazenamento energtico de triglicerdeos, e o tecido adiposo marrom (BAT), especializado em gasto
energtico e termognese, conforme .
A termognese adaptativa, para a manuteno de equilbrio energtico de temperatura corporal bsica e
calor, uma funo importante do BAT. Essa funo mediada por protenas de desacoplamento
(UCPs), localizadas na membrana interna das mitocndrias. Essas protenas atuam como
desacopladores de fosforilao oxidativa, dissipando o gradiente de prtons atravs da membrana e
produzindo calor, em vez de produzir ATP, evitando, dessa maneira, balano energtico positivo e
obesidade, o que foi demonstrado por .
caracterizam o Resveratrol (3,5,4'-trihidroxiestilbeno) como um composto polifenlico, natural,
encontrado na uva e no vinho tinto que tem demonstrado efeito prolongador da expectativa de vida em
muitos organismos. um ativador da famlia das sirtunas (SIRT), famlia altamente conservada de
protenas, presentes em praticamente todas as espcies de bactrias a mamferos, segundo estudo de .
Em relatrios recentes de e , foi demonstrado que a remodelao marrom de WAT e a termognese so
dependentes de SIRT1. A ativao da desacetilase dependente de NAD +, SIRT1, seja por meio de um
composto natural, restrio calrica ou exerccio, promove a atividade e biognese mitocondrial,
aumentando a possibilidade de que a SIRT1 regule o funcionamento de BAT.
demonstraram que o resveratrol aumenta os nveis de UCPs em dois tecidos importantes para a
termognese, o BAT e o msculo esqueltico, sugerindo que o resveratrol pode contribuir para a
dissipao energtica e, consequentemente, gasto energtico.
Com base nesses dados, temos a hiptese de que a administrao de resveratrol via oral em
camundongos alimentados com uma dieta padro pode modular a termognese, aumentando expresso
gentica relacionada. Esse mecanismo poderia contribuir para alterao na eficincia energtica, lipdica
e perfil glicmico, bem como perda de massa adiposa.
Materiais e Mtodos
Animais, dietas e coleta de tecidos.
O experimento foi realizado com dezesseis camundongos machos (quatro semanas de idade), divididos
aleatoriamente em dois grupos (n = oito em cada) e alimentados com as respectivas dietas
experimentais durante oito semanas: dieta padro (ST) e dieta padro com resveratrol (ST+RSV,
concentrao de 4 g/kg de dieta). O peso corporal e ingesto alimentar foi mensurado duas vezes por
semana. Aps uma noite de jejum os camundongos foram decapitados. Amostras de tecido adiposo
branco epididimal, mesentrico e retroperitoneal; tecido adiposo marrom interescapular e msculo
gastrocnmico foram coletadas, pesadas, congeladas imediatamente em nitrognio e armazenadas a
-80 C, para anlise subsequente de adiposidade e marcadores de termognese. Todos os
procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comit de tica da Universidade Federal de Minas
Gerais nmero 023/2012 e em conformidade com os regulamentos descritos no Manual do Comit de
Princpios Orientadores.
Medio do consumo de oxignio.

Aps quatro semanas de tratamento, os animais foram submetidos medio de consumo de oxignio
(VO) para avaliar os efeitos termognicos. O VO foi medido por um calormetro indireto de fluxo aberto
(PANLAB, Apparatus LE405, Gas Analyzer). Os animais descansaram por pelo menos uma hora, aps o
estresse da movimentao, registrando-se continuamente o VO2. Apenas os ltimos vinte minutos de
leitura, quando os animais j haviam retornado ao descanso, foram utilizados para anlise.
Determinao de parmetros bioqumicos na circulao.
O soro foi obtido aps centrifugao (3200 Rpm, durante 10 min, a 4 C). O colesterol total, triglicrides,
HDL e glicose foram analisados utilizando-se kits enzimticos especficos. As medies foram realizadas
em Wiener BT-3000 plus Chemistry Analyzer (Wiener, Argentina).
Reao em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa. (qRT-PCR)
O RNA total do BAT foi preparado usando reagente Trizol, tratado com Dnase e transcrito reversamente
com M-MLV (Invitrogen Corp.) utilizando primers especificos. Os nveis de expressao dos genes UCP1,
UCP3, Cidea, adiponectina, PTEN, BMP -7, PRDM16 e mRNA de SIRT1 foram determinadas por qRTPCR.
Anlise estatstica.
Todos os dados foram transferidos para o software GraphPad Prism e analisados com 95% de confiana
( P<0,05). A significncia estatstica de diferenas foi avaliada por teste t.
Resultados e Discusso
Observou-se reduo significativa no tecido adiposo epididimal (ST 0.0075 0.0051 vs. ST+RSV 0.0022
0.0019 g/peso corporal) e adiposo retroperitoneal (ST 0.0012 0.0006 vs. ST+RSV 0.0006 0.0003
g/peso corporal) no grupo tratado com resveratrol. Camundongos alimentados com ST+RSV mostraram
diminuio no colesterol total (ST 139.6 9.39 vs. ST+RSV 110.8 11.52 mg/dL) e glicose (ST 133.4
22.19 vs. ST+RSV 96.4 15.13 mg/dL) (Figura 1).
O consumo de O foi aumentado em camundongos com alimentao ST+RSV (ST 36.59 2.77
mLO/Kg/min vs. ST+RSV 42.33 1.35 mLO/Kg/min). A anlise da expresso de mRNA de genes
relacionados a termognese mostrou aumento significativo para UCP1 (ST 0.448 0.15 vs. ST+RSV
0.85 0.22). Ainda observou-se um aumento significativo na expresso de SIRT1 (ST 0.65 0.19 vs.
ST+RSV 1.07 0.19), PTEN (ST 0.30 0.12 vs. ST+RSV 0.51 0.08) e BMP-7 (ST 0.32 0.08 vs.
ST+RSV 0.51 0.074). (Figura 2)

Sugerimos que a alta expresso dos marcadores SIRT1, PTEN e BMP7 pode estar associada com a alta
expresso de UCP1. Recentemente, um novo processo foi descrito e nomeado como escurecimento de
WAT. Esses adipcitos marrons podem aparecer aps estmulos termognicos em pontos anatmicos
correspondentes a WAT. inferem que as UCPs esto diretamente relacionadas a esse processo de
escurecimento do WAT. Estudos anteriores de descobriram que os nveis de UCP1 esto associados
com mudanas no ndice de adiposidade e contribuem de forma significativa para a termognese e gasto
energtico.
Alm disso, a UCP1 induz um aumento no consumo de oxignio e gasto de energia, levando perda de
peso. Na verdade, o nosso estudo demonstrou que o resveratrol produziu uma diminuio da
adiposidade corporal, possivelmente, aumentando os nveis UCP1 em BAT. Um relatrio recente de
indica que a superexpresso de PTEN em camundongos est associada com altos nveis de UCP1,
acompanhados pela reduo do tamanho corporal, reduo dos nveis de IGF1 e melhora da
sensibilidade insulina, bem como aumento do gasto energtico.
Um novo estudo segundo mostraram que o BMP7 promove a diferenciao de pr-adipcitos marrons e
responsvel pela ativao de um programa completo de adipognese de BAT. mostraram que os
camundongos tratados com resveratrol associado a dieta com alto teor de gordura aumentaram o gasto
energtico e consumo de oxignio, mediado pela atividade de PGC-1 a SIRT1. Juntos, estes resultados
confirmam nossos dados mostrando que o resveratrol, atravs da ativao da SIRT1, pode induzir a
termorregulao e melhora na homeostase metablica.
Concluses
As principais concluses deste estudo so que o tratamento de camundongos alimentados com dieta
padro acrescidas de resveratrol aumenta a termognese e melhora o perfil lipdico e glicmico. Essas

alteraes foram associadas com o aumento da expresso de UCP1 no BAT. Sugerimos que a alta
expresso dos marcadores SIRT1, PTEN e BMP-7 pode ser associada com a alta expresso de UCP1.
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