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DNA Microarray

Tcnica realizada com o objetivo de analisar a


expresso simultnea de grandes nmeros de
genes na clula;
mRNA isolado da clula convertido em cDNA
e hibridizado a um grande arranjo de sondas
curtas de DNA (imobilizadas sobre uma lmina
de vidro)

Pr-Requisitos
Sequncia genmica conhecida;
mRNA extrado transformado em cDNA;
Por que se utiliza cDNA e no diretamente o mRNA?
R) Alm da maior estabilidade do cDNA possvel marc-lo
utilizado diferentes fluorocromos por exemplo

Etapas
1.
2.
3.
4.

Cultivo em diferentes condies


Isolar mRNA (Extrao)
Produo de cDNA
Mix de cDNA marcados com fluorocromo de
diferentes cores
5. Adiciona o mix no chip e incubar
6. Lavar para remover cDNA no ligado ou ligado
fracamente
7. A fluorescncia varrida e analisada

Sondas

DNA microarray

Objetivo
Monitorar simultaneamente a quantidade de
mRNA transcrito produzido por cada gene de
um determinado organismo;
Revela o sistema inteiro de controle da
expresso gnica;