Espectrofotometria na regio

UV-VIS

RADIAO ELETROMAGNTICA
Comprimento de onda ()
Perodo (p) = tempo
necessrio para completar
um ciclo

f= c/
c = velocidade da luz no vcuo 3.1010
cm/s

Freqncia (f) = ciclos/s ou

Hertz

unidades
nm = 10-9 m
A= 10 -10 m

Energia (E)
E = h.f => E = h.c/
h= constante de Planck

Espectro visvel da luz de uma lmpada difratada por um prisma:

(a) esquema e (b) fotografia.

Exemplo de difrao de luz produzida

na natureza.

Interao da radiao com a matria

O que faz com que alguns raios interajam e outros passem atravs das
coisas?
Dois requerimentos devem ser observados para que uma determinada
radiao possa ser absorvida por uma molcula:
1A radiao incidente deve ser de frequncia equivalente aquela
rotacional ou vibracional, eletrnica ou nuclear da molcula,
2A molcula deve ter um dipolo permanente ou um dipolo induzido,
ou seja, deve haver algum trabalho que a energia absorvida possa fazer.

Aplicaes da espectroscopia
energia
frequncia de
infravisvel
ultraraios-X
raios-
radiante
rdio
vermelho
violeta
_______________________________________________________________________________________
Tcnica
NMR
Absoro
Absoro
Absroo
Absoro
Tcnicas radioAnaltica
Microondas
Fluorescncia
Difrao
mtricas
Fosforescncia
Fotometria de
chama
Espectroscopia de
emisso
_______________________________________________________________________________________
Interao
com a
matria

desintegrao
Rotao
do
ncleo

vibrao e
rotao das
molculas

excitao eletrnica dos

tomos de uma molculs

eltrons
internos so
deslocados

desintegrao
do ncleo

_______________________________________________________________________________________

Leis de absoro
Io

I1

I1 = 50

Io = 100

Io = 100

I1 = 50

Transmitnica = It/ Io

I2 = 25

T% = It/Io x 100

Pierre Bouguer (1729) e de Johann Heindrich Lambert (1760)

duas leis fundamentais:
- A intensidade de luz (monocromtica) transmitida por um corpo
homogneo proporcional intensidade de luz incidente. Isto :

- A intensidade de luz (monocromtica) transmitida decresce

exponencialmente com o aumento da espessura da camada do
corpo homogneo
It/Io = 10 cba

onde

c= concentrao;
ba= constante

T = 10-cba
log T = log 10 -cba
log T = -cba log 10
log T = -cba

-log T = cba

log 1/T = cba

log Io/It = cba

log Io/It = Absorbncia

Lei de Lambert- Beer

A = absorbncia ou absorvncia

A = b c qdo a concentrao expressa em moles/L

ou

A = a b c qdo a concentrao expressa em outra

unidade
a/ = absortividade/absortividade molar
b= caminho pticoc
c= concentrao

Representao grfica da Lei de Beer, para

solues de KMnO4 em l = 545 nm e um
caminho ptico de 1 cm.
a) Em %Transmitncia %T versus c
a) b) Em Absorbncia A versus c

Absortiviade (a) ou absortividade molar

Caracterstica de uma substncia para um determinado comprimento de onda

e um determinado solvente

max

Cu +2
800
20

Cu (NH3)4 +2
600
80

Cu-DEDC
436
10.000

A = abc

Absortividade capacidade da molcula em absorver energia

Fenmenos envolvidos quando um feixe (monocromtico) de radiao incide

sobre uma cubeta contendo uma soluo que absorve no comprimento de
onda incidente.

Io = Ir + Ie + Ia + It

Io = Ia + It

Io = Intensidade do feixe incidente,

Ir = Intensidade do feixe refletido, resultado das diferenas do ndice de refrao
entre o absorvedor e o ambiente,
Ie = Intensidade do feixe espalhado, resultado de um meio no homogneo
(suspenso) e/ou de flutuaes trmicas,
Ia = Intensidade do feixe absorvido pelo meio
It = Intensidade do feixe transmitido.

Espectro de absoro do permanganato de potssio

A amostra (1) tem 66mg/L de concentrao. As demais (2),(3),(4) e (5) foram

diludas para (0.8), (0.6), (0.4) e (0.2) da concentrao da primeira amostra,
respectivamente.

Se vrias substncias absorverem a a radiao,h um efeito aditivo:

Abs = a1b1C1 + a2b2C2 + . . .
Corante vermelho

Corante azul

Mx. de absoro a 525 nm

A= 0,233
a=

A 510 nm= 0,183

a = 0,061/ppm.cm

Mx. de absoro a 625 nm

A = 0.318 -> a = 0,106/ppm.cm

Mistura corante azul + vermelho

Mistura:
A 510 nm= 0,317
A625nm = 0,477

Figura 1 - a. conjunto dos comprimentos de onda correspondentes ao

espectro de emisso de uma lmpada de tungstnio-halognio (luz branca);
b. regio espectral transmitida por uma soluo de azul de bromotimol e o
respectivo espectro de absoro; c. regio espectral transmitida por uma
soluo de soluo amarela de fluorescena e o respectivo espectro de
absoro.

a- Espectro de uma
lmpada de luz
branca

b- Espectro de uma
soluo aquosa de
azul de bromotimol 105 mol L-1 (laranja)

c - Espectro de uma
soluo etanlica de
fluorescena 10-5 mol L-1
(amarela)

Erro fotomtrico

INSTRUMENTAO

Esquema Bsico de um Instrumento para Medir a Absoro

Sistema de Feixe Simples

Sistema de Feixe Duplo

Fontes de radiao UV-VIS

Lmpada de Tungstnio e Tungstnio-Halognio: O filamento da lmpada de
tungstnio vaporiza-se e esses vapores fixam-se na face interna do bulbo da
lmpada.
Lmpada de Deutrio: Normalmente usa-se a lmpada de deutrio para
comprimentos de onda entre 180 a 370nm.

Monocromadores
Filtros, Filtros de interferncia, Prismas , Grades de difrao

Grade de difrao

Espectro visvel da luz de uma lmpada difratada por uma grade

de difrao : (a) esquema e (b) fotografia.

Detectores

Fotografias de arranjos de
diodo com 1024
elementos (detectores de
diodo): a. vista de topo; b.
vista de perfil.

Esquema (a) e fotografia (b) do tubo

fotomultiplicador HAMAMATSU - R928

Esquema ptico de um espectrofotmetro com detector de arranjo de diodos

V-se neste esquema duas fontes de radiao, as lmpadas de deutrio e de tungstnio, cujas emisses so
focalizadas atravs de uma lente sobre a amostra. Portanto, todo o espectro de emisso da lmpada incide
sobre a mesma, sendo que a radiao incidente ser, em parte, absorvida. Esta radiao que atravessou a
amostra (transmitida ou emergente) ir incidir sobre uma lente que focaliza o feixe sobre uma fenda, e desta
sobre uma grade de difrao. Esta grade ir difratar a radiao, separando os seus diferentes comprimentos de
onda, sendo que cada um deles ir incidir sobre um diodo do arranjo. Este diodo, ao ser irradiado, produz uma
corrente eltrica cuja magnitude depende da intensidade da emisso (novamente aqui se aplica o efeito
fotoeltrico). Atravs de um circuito de calibrao adequado, esta corrente ser transformada em absorbncia
nos diferentes comprimentos de onda, resultando no que se convenciona chamar de espectro de absoro.

Exemplo de espectro obtido com detector de arranjo de diodos

Crditos:

Chemkeys : http://www.chemkeys.com/bra/index.htm
Micronal Termos e Significados em anlises espectrofotomtricas UVVisvel http://www.micronal.com.br/artigostecnicos/glossario.pdf
Gary L. Bertrand http://web.umr.edu/~gbert/color/AAcolor.html