Introduo: A conservao de germoplasma vegetal in vitro est baseada na limitao do crescimento (crescimento lento) ou inativao do metabolismo celular com armazenamento em temperatura criognica (criopreservao). A erva-baleeira uma espcie medicinal, nativa, com atividades, antiinflamatria e antilcera comprovadas, sendo utilizada na fabricao de um fitoterpico. Apesar da sua importncia econmica, no foram encontrados artigos dedicados conservao in vitro desta espcie. O presente trabalho teve por objetivo analisar a influncia de agentes osmticos e tempo de cultivo na conservao in vitro desta espcie. Parte experimental: Foram avaliados trs agentes osmticos, sacarose (20 g.L-1, SAC), sorbitol (10 g.L-1) + sacarose (10 g.L-1, SORB) e manitol (10 g.L-1) + sacarose (10 g.L-1, MAN) e trs tempos de cultivo (dois, trs e quatro meses) em DIC com 30 repeties, cada repetio representada por um segmento nodal. Os agentes osmticos foram adicionados ao meio MS com metade da concentrao salina, as culturas mantidas em sala de crescimento com temperatura de 25C. As variveis analisadas foram: viabilidade, altura e nmero de folhas. Os resultados foram submetidos anlise de varincia, as mdias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Resultados/Discusso: A viabilidade das plantas diminuiu com o tempo de cultivo em todos os tratamentos, sendo as plantas mais viveis observadas nos tratamentos SAC E SORB aps dois meses de cultivo. Entretanto, aps quatro meses foram obtidas plantas com no mnimo 50% de brotos vivos nos tratamentos SAC e SORB. Para altura e nmero de folhas foram observados resultados similares, com os menores valores aps quatro meses de cultivo no tratamento MAN. Concluso: De modo geral, a conservao de erva-baleeira pode ser conduzida por quatro meses em meio MS/2 acrescido de 20 g.L-1 de sacarose ou sorbitol (10 g.L-1) + sacarose (10 g.L1 ). Financiamento: CAPES, FAPERJ. Agradecimentos: Programa de Ps-Graduao em Biotecnologia Vegetal UFRJ, Dr. Pedro Melillo de Magalhes.