LAPORAN RADIOFARMASI

Radioimmunoassay
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Tugas
Mata Kuliah RADIOFARMASI
Dosen : Nurfatmawati. Apt

Di SusunOleh :

Muhammad Iqbal
Yovi Jayanti
Caswono
Yopi Nurdiansyah
Zaky Mubarok
Semester : V (Lima)

Sekolah Tinggi Farmasi (STF) YPIB Cirebon

Jl. Perjuangan No.7 Majasem Cirebon

RADIOIMMUNOASSAY
I.

Pengertian Radioimmunoassay
Radioimmunoassay adalah metode yang mengukur adanya antigen dengan

sensitivitas yang sangat tinggi. RIA (Radioimmunoassay) adalah salah satu teknik
immunoassay yang lebih baik dan lebih sensitif. Pada dasarnya, semua prinsip-prinsip
desain assay EIA didasarkan pada kesimpulan yang diambil dari penggunaan RIA.
Meskipun RIA masih merupakan teknik yang layak, namun sebagian besar telah
digantikan oleh CL dan EIA di sebagian besar laboratorium klinis. Berbagai radioisotop
dimanfaatkan dalam pemeriksaan RIA, I125, H3, C14. Baik CL dan EIA memiliki
keunggulan pada reagen yang lebih stabil dan dapat memiliki batas deteksi yang lebih
sensitif, serta tidak ada masalah dengan pembuangan limbah berbahaya. adalah metode
menggunakan isotop radioaktif untuk label baik antigen atau antibodi. Isotop ini
memancarkan gamma raysare, yang biasanya diukur penghapusan berikut terikat (gratis)
radiolabel. Keuntungan utama dari RIA, dibandingkan dengan immunoassays lainnya,
adalah sensitivitas yang lebih tinggi, deteksi sinyal mudah, dan mapan, tes cepat.
Kelemahan utama adalah risiko kesehatan dan keselamatan yang ditimbulkan oleh
penggunaan radiasi dan waktu dan biaya yang terkait dengan mempertahankan
keselamatan radiasi berlisensi dan program pembuangan. Untuk alasan ini, RIA telah
digantikan dalam praktek laboratorium klinis rutin dengan immunoassay enzim.
Pada dasarnya setiap substansi biologis yang ada antibodi spesifik dapat diukur,
bahkan dalam konsentrasi menit. RIA telah menjadi teknik immunoassay pertama kali
dikembangkan untuk menganalisis nano molar dan konsentrasi molar pico hormon dalam
cairan biologis. Untuk melakukannya, antigen target berlabel radioaktif dan terikat pada
antibodi spesifik (jumlah terbatas dan diketahui dari antibodi spesifik harus
ditambahkan). Sampel A, misalnya darah serum, kemudian ditambahkan dalam rangka
untuk memulai reaksi kompetitif antigen berlabel dari persiapan, dan antigen berlabel
dari sampel serum, dengan antibodi spesifik. Persaingan untuk antibodi akan merilis
sejumlah antigen berlabel. Jumlah ini sebanding dengan rasio label untuk antigen
unlabeled.

Itu berarti, sebagai konsentrasi antigen berlabel meningkat, lebih dari itu mengikat
antibodi, menggusur varian berlabel. Antigen terikat kemudian dipisahkan dari yang
terikat, dan radioaktivitas antigen kosong yang tersisa dalam supernatan diukur.
Menggunakan standar yang dikenal, kurva mengikat kemudian dapat dihasilkan yang
memungkinkan jumlah antigen dalam serum pasien untuk diturunkan.
Meskipun, radioimmunoassay adalah teknik lama, itu masih merupakan teknik
immunoassay banyak digunakan, dan terus menawarkan keuntungan yang berbeda dalam
hal kesederhanaan, dan terutama sensitivitas.
Prinsip dasar metode Radioimmunoassay (RIA):
Didasarkan pada reaksi antara antibody (dalam konsentrasi terbatas)
dengan

berbagai

konsentrasi

antigen.

Digunakan

untuk

menemukan

antigentunggal/antibodi dalam cairan biologistunggal dan Tehnik pemeriksaan

untuk menentukan antibodi/antigen dengan reagen yang bertanda zat radioaktif.

II.

Contoh Alat Radioimmunoassay

Badan Tenaga Nuklir Nasional (BATAN) sejak 2004 mengembangkan

teknologi pencacah Radioimmunoassay (RIA) yang bisa digunakan sebagai alat
pendeteksi dini kanker. Melalui sampel darah atau urine, pencacah RIA juga
dapat mendeteksi secara dini jenis penyakit lain seperti hepatitis, ginjal dan
diabetes melitus. Untuk mendeteksi penyakit tersebut dibutuhkan kit RIA, alat
ini sudah direkaysa oleh Riswal Nafi Siregar dari Pusat Rekayasa Perangkat
Nuklir BATAN.
Kit RIA itu semacam data acuan jenis penyakit yang ingin dideteksi secara
dini oleh alat pencacah RIA. Pusat Radioisotop dan Radiofarmaka (PRR)
BATAN saat ini berhasil mengembangkan kit RIA penyakit kanker dan
hepatitis, dua kategori jenis penyakit paling berbahaya. Dengan satu sampel
berupa urine atau darah dalam waktu hanya satu menit sudah dapat dicacah
dengan pencacah RIA, kemudian hasilnya berupa kurva yang masuk menjadi
data komputer dan dapat segera dianalisis dengan acuan kit RIA.
Produksi alat pencacah RIA cukup murah, hanya sekitar 60 juta rupiah. Di
berbagai rumah sakit ternama, alat semacam ini sudah dimiliki dengan harga
cukup mahal yang diimpor dengan harga sampai 300 juta rupiah. Selain
harganya alatnya mahal, biaya operasionalnya juga mahal sehingga pasien
enggan untuk mendeteksi secara dini kemungkinan penyakit kanker. Itulah
sebabnya banyak pengidap kanker yang mengetahui dirinya berpenyakit dan

berobat setelah mencapai stadium tiga atau empat sehingga sulit disembuhkan.
Biaya pemeriksaan dini dengan alat yang diciptakan oleh BATAN ini cukup
murah yaitu berkisar antara 100 ribu sampai 300 ribu rupiah. Sebuah
perusahaan Badan Usaha Milik Negara (BUMN) saat ini telah menjajaki
kerjasama produksi massal teknologi pencacah RIA BATAN ini. (sumber:
Kompas)

III.

Contoh Penggunaan metode Radioimmunoassay

Radioimmunoassay dianggap sebagai pelopor dalam

kedokteran

nuklir

pengukuran radioaktif karena zat radioaktif muncul dengan kejelasan dan akurasi.
Menggunakan radioimmunoassay bervariasi dan termasuk bank darah skrining untuk
hepatitis, deteksi narkoba, virus pelacakan, deteksi dini leukemia dan kanker lainnya,
pengukuran hormon pertumbuhan manusia, dan bantuan dalam mendeteksi berbagai jenis
tukak seperti tukak lambung.
Selain uji hormone dan darah, RIA dapat diterapkan pada berbagai zat lain yang
memiliki impor medis: digitalis, morfin, LSD, carcino-embrio antigen (CEA), hepatitisterkait antigen (HAA), siklik adenosin monofosfat-(AMP), barbiturat, asam folat, vitamin
B-12, dan faktor rheumatoid. Intoksikasi digitalis dengan, yang terjadi pada 20 persen
pasien jantung diobati dengan itu, yang terdeteksi dengan RIA, dan tidak ada teknik yang
dapat diterima lainnya untuk mendeteksi overdosis fatal ini pengobatan utama untuk

gagal jantung. Sejumlah obat-obatan lain yang memiliki efek samping yang berpotensi
membahayakan juga setuju untuk pengukuran RIA. Tes untuk antibiotik tertentu juga
telah dikembangkan, dokter tahu berapa banyak antibiotik ia telah memberikan pasien,
tetapi hanya pengukuran darah langsung akan memberitahu berapa banyak mencapai
tempat infeksi. Aplikasi dari tes radioimmunoassay dan hormon yang luas memang, dan
beberapa contoh akan menarik:
1. Penelitian tentang sifat dan penyebab diabetes secara substansial dibantu dengan
pengukuran RIA insulin, hormon kekurangan pada penderita diabetes.
2. Deteksi metabolisme kurang aktif bisa sangat sulit dari pemeriksaan pasien serta
dengan melakukan tes darah umum fungsi tiroid. RIA pengukuran hormon thyroidstimulating (TSH) sering berharga dalam diagnosis keadaan hipotiroid. Diagnosis
hipotiroidisme penting karena itu adalah suatu kondisi yang benar-benar dapat
disembuhkan, namun, tidak diobati, maka bisa berakibat fatal.
3. Pengukuran hormon testosteron laki-laki sering berguna dalam menentukan
penyebab infertilitas pada wanita. Pengukuran hormon laktogen plasenta adalah
penentu terbaik saat ini apakah kehamilan akan melanjutkan normal atau berakhir
dengan keguguran. Manfaat psikologis dan medis untuk mengetahui nasib kehamilan
mengancam yang jelas.
4. Banyak kasus tekanan darah tinggi pembedahan diperbaiki. Radioimmunoassay
dapat mendiagnosa beberapa penyebab hipertensi dengan alat tes kadar hormon
darah. Pengujian ini saat ini dapat ditawarkan secara klinis untuk jumlah besar
pasien hipertensi terlihat pada klinik Angkatan Udara.
5. Dua contoh immunoassay sangat menarik saat ini. Yang pertama menyangkut bahaya
hepatitis timbul dari transfusi darah. Penyelidikan telah menunjukkan bahwa
kebanyakan kasus transfusi darah hepatitis berikut ini berhubungan dengan adanya
bahan hepatitis-terkait antigen (HAA) dalam darah donor. Zat ini dapat dideteksi
oleh radioimmunoassay. Peraturan saat ini menentukan bahwa setiap unit darah
untuk transfusi harus diperiksa oleh seorang atau teknik lain untuk kehadiran HAA.
Meskipun teknik biokimia yang tersedia, RIA saat ini cara yang paling akurat, dan
ada tekanan yang meningkat, baik medis dan medicolegal, untuk menyediakan tes ini
untuk fasilitas Angkatan Udara yang beroperasi di masyarakat dimana tes RIA untuk
HAA digunakan.

6. Contoh lainnya adalah antigen carcino-embrio (CEA). Ini merupakan zat diuraikan
oleh tubuh dalam jumlah menit ketika kanker usus berkembang. Sensitivitas indah
dari RIA memungkinkan deteksi CEA sering sebelum keganasan dapat dikonfirmasi
oleh teknik lain. Dapat dibayangkan pengukuran CEA sebagai tes skrining untuk
kanker usus akan mengambil tempat sejajar dengan Pap smear terkenal karena
kanker leher rahim.
Biomonitor telah mengembangkan radioimmunoassay (RIA) untuk menentukan
tingkat anti-TNF-alpha obat-obatan seperti infliximab, etanercept, dan adalimumab (yaitu
ketiga saat ini disetujui anti-TNF biopharmaceuticals). Ada beberapa keuntungan dari tes
ini dibandingkan dengan immunoassays enzim:

Ini adalah fungsional dalam bahwa hal itu menunjukkan kemampuan obat untuk
mengikat TNF-alpha daripada mengungkapkan suatu protein yang mungkin atau
mungkin tidak fungsional.

Ini adalah tes cairan-fase menyerupai dalam situasi vivo lebih baik daripada padatfase tes.

Ini dapat dengan mudah dimodifikasi untuk memonitor konstruksi antibodi lain yang
menargetkan TNF-alpha, termasuk masa depan yang dikembangkan manusia antiTNF-alpha antibodi.

Anti-TNF-alpha biopharmaceuticals
Tumor necrosis factor (TNF) merupakan sitokin proinflamasi. Misalnya, efek
utama dari terapi kortikosteroid adalah untuk menghambat produksi dan fungsi TNF dan
IL-1 keluarga sitokin. Sayangnya, glukokortikoid memiliki efek lain beberapa terapi
terus, terutama jika diberikan pada dosis tinggi, selalu dikaitkan dengan efek samping
memaksa pengurangan dosis dan, pada akhirnya, penekanan mencukupi TNFalpha
produksi / fungsi. Oleh karena itu langkah maju yang besar, bahwa terapi telah
dikembangkan bahwa target sitokin ini secara khusus. Saat ini (2006) tiga anti-TNFalpha
biopharmaceuticals digunakan secara klinis di Denmark, semua dengan efek yang

menguntungkan dalam banyak, tapi sayangnya tidak semua pasien dengan penyakit
kronis seperti immunoinflammatory rheumatoid arthritis (RA), juvenile idiopathic
arthritis (JIA), spondilitis spondylitis (penyakit Bechterew s), psoriasis (dengan atau
tanpa artritis), dan penyakit radang usus (penyakit Crohn dan kolitis ulserativa):
Infliximab / Remicade adalah antibodi chimeric (mouse-manusia IgG). Obat
khusus menetralisir TNF-alpha (sekarang juga dikenal sebagai TNFSF2) dan karenanya
menekan TNF-alpha-dimediasi proses inflamasi. Selain itu, infliximab dikenal memiliki
potensi sitotoksik melalui mengikat TNF-alpha pada permukaan sel yang mengakibatkan
aktivasi komplemen dan lisis sel. Infliximab adalah imunogenik, dan itu mudah
dimengerti bahwa komponen murine dapat menyebabkan radang antibodi pada manusia
dengan hilangnya keberhasilan terapi.
Etanercept / Enbrel juga merupakan antibodi chimeric. Dalam kasus ini,
bagaimanapun, fragmen imunoglobulin Fab telah digantikan oleh satu set dari dua
peptida yang terdiri dari reseptor TNF manusia rekombinan P75. Fungsi obat sebagai
antibodi yang mengikat TNF-alpha dan lymphotoxin-alpha (LT-alpha atau TNFSF1)
mencegah pengikatan sitokin TNF reseptor ke seluler, TNFR1 dan TNFR2 (juga disebut
TNFRSF1A/CD120a dan TNFRSF1B/CD120b). TNFR1 dan TNFR2 ditemukan pada
sejumlah tipe sel, termasuk limfosit. Etanercept sehingga menetralkan fungsi biologis
dari kedua TNF-alpha dan terkait erat LT-alpha (TNF-= beta). Obat ini terdiri dari 100
komponen%

"manusia",

yang

banyak

orang

percaya

harus

menghilangkan

imunogenisitas potensial.
Adalimumab / Humira juga merupakan antibodi chimeric - menyerupai
infliximab. Berbeda dengan infliximab, bagaimanapun, adalimumab hanya terdiri dari
komponen manusia, dan ini diyakini membuat obat kurang imunogenik. Sebagai
infliximab, adalimumab menekan fungsi TNF-alpha.

IV.

Keuntungan dan kelemahan metode Radioimmunoassay

Keuntungan utama dari RIA, dibandingkan dengan immunoassays lainnya,
adalah sensitivitas yang lebih tinggi, deteksi sinyal mudah, dan mapan, tes cepat.
Kelemahan utama adalah risiko kesehatan dan keselamatan yang ditimbulkan oleh
penggunaan radiasi dan waktu dan biaya yang terkait dengan mempertahankan
keselamatan radiasi berlisensi dan program pembuangan. Untuk alasan ini, RIA telah
digantikan dalam praktek laboratorium klinis rutin dengan immunoassay enzim.
Kelemahan Radioimmunoassay (RIA) pada tahun 1 9 5 9 d e n g a n
menggunakan

label

radioaktif

ya n g

dapat

mengidentifikasi

k o m p o n e n immun pada konsentrasi yang sangat rendah. Pada tahun 1960-an,

para peneliti mulaimencari pengganti metode RIA karena kelemahannya
menggunakan radioaktif isotopsebagai label. Kekurangan penggunaan radioaktif
tersebut berkaitan dengan keselamatan petugas laboratorium, masalah pembuangan
radioaktif, fasilitas laboratorium khusus dengan persyaratan gedungnya dan
mahalnya

peralatan

yang

dibutuhkan.

Kelemahan

dari Radioimmunoassay

mendorong para peneliti untuk mencari suatu label pengganti yang lebih sederhana,
lebih murah, dengan reagen yang dapat tahan lebihlama dan dapat dipakai oleh
hampir semua laboratorium serta mudah dibuat otomatis.Muncullah kemudian
gagasan untuk memakai enzim sebagai label dan lahirlah suatu imunoasai yang
baru yaitu Enzyme Immunoassays (EIA).

Tindakan pengamanan khusus harus diperhatikan ketika melakukan metode

RIA. Isotop radioaktif yang digunakan oleh RIA tes terhadap antigen atau antibodi label.
Perempuan hamil tidak harus bekerja di daerah di mana RIA tes sedang dilakukan.
Personil penanganan reagen isotop harus memakai lencana yang memantau eksposur
mereka terhadap radiasi. Tenggelam khusus dan wadah pembuangan limbah yang
diperlukan untuk pembuangan limbah radioaktif. Jumlah radioisotop dibuang harus
didokumentasikan untuk limbah baik cair dan padat. Kebocoran atau tumpahan reagen
radioaktif harus diukur untuk radioaktivitas, jumlah radiasi dan penahanan dan proses
pembuangan harus didokumentasikan.

KESIMPULAN:
Radioimmunoassay, meskipun uji layak dalam beberapa situasi, telah ditinggalkan sebagai alat
analisis di laboratorium klinis yang paling di Texas. Pengguna saat ini tidak puas dengan jumlah
dokumen yang menyertai penggunaan teknologi, sementara non-pengguna mempertimbangkan
non-isotop tes setara dalam kepekaan terhadap RIA. Dalam hal informasi yang disajikan kepada
mahasiswa ilmu laboratorium klinis, munculnya teknik diagnostik molekuler memerlukan
instruksi lanjutan dalam prinsip radioaktivitas, meskipun tidak radioimmunoassay.

http://www.surgeryencyclopedia.com/Fi-La/Immunoassay-Tests.html
http://blogkesehatan.net/radioimmunoassay-ria/
https://docs.google.com/viewer?
a=v&q=cache:c0fjkvTbbRYJ:repository.ipb.ac.id/bitstream/handle/123456789/40120/
B87lsa.pdf%3Fsequence
%3D1+&hl=id&gl=id&pid=bl&srcid=ADGEESg18EZSERD4kwbaoX0lFoFbAtzNE7
O1ItvNsW-

jouMLRYr3epCQYsEcDVc0hDr1l57AukOTWKffFIH9a276MpC43AQsYEHl13f3ZI
ZwhGB_yTm_sWRDIo_1vuMT3xT5vswH_RQV&sig=AHIEtbSsPRLNHKAeYbego
TKI-MS6LiBDgw