Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri - UFVJM

Instituto de Cincia e Tecnologia - ICT

Curso de Bacharelado em Cincia e Tecnologia - BCT
www.ict.ufvjm.edu.br

Prtica I Esterilizao e
Preparo e Meio de Cultura

Docente: Lilian Arajo Pantoja

Disciplina: Microbiologia

Discente(s):

Turma/Grupo: Turma A/Grupo 05

Hyago B. Teixeira (20121020135)

Ramon Cardoso (20121020131)
Matheus Leon (20112020047)
Maurcio Franco (20101020107)

Sumrio
RESUMO ...................................................................................................................................................3
INTRODUO ...........................................................................................................................................3
OBJETIVO ..................................................................................................................................................4
MATERIAIS E MTODOS ...........................................................................................................................4
RESULTADOS E DISCUSSES.....................................................................................................................6
CONCLUSO .............................................................................................................................................6
REFERNCIAS ............................................................................................................................................6

RESUMO
O processo de autoclavagem o principal enfoque dessa aula prtica, este consiste em um
mtodo de esterilizao via calor mido, que utilizado para dar segurana (quanto
eliminao de microrganismos indesejados) ao experimento que ser realizado: a preparao
de meio de cultura. Esse experimento de extrema importncia no laboratrio de
Microbiologia, bem como na compreenso da atividade microbiana, pois nele onde os
microrganismos necessrios (e suas condies de sobrevivncia) sero formados, nutridos e,
em seguida, estudados.

INTRODUO
Define-se como esterilizao o processo que promove a completa eliminao de todas
as formas de vida microbianas presentes, tais como bactrias (e seus esporos), fungos, vrus,
protozorios e helmintos. A esterilizao realizada para garantir o nvel de segurana do
experimento a se realizar, pode ser de natureza fsica, fsico-qumica ou qumica.
A aula prtica que gerou esse relatrio utilizou um processo de natureza fsica, que
feito em uma autoclave, equipamento que esteriliza, sob presso, os materiais necessrios,
atravs do calor mido. A autoclave pode ser vertical ou horizontal, e, geralmente, nessa parte
fica a resistncia que se encarrega de aquecer a gua, dentro dela, existe uma espcie de
cesto metlico onde os materiais a serem esterilizados so colocados, aps serem
devidamente embalados. Possui uma tampa de bronze ou cobre, munida de um manmetro,
manpulos e vlvula de segurana e de escape de ar, alm de um pedal em sua parte inferior,
utilizado para abrir a resistente tampa.
Chama-se

autoclavagem

procedimento

de

esterilizao

realizado

nesse

equipamento, consiste em um tratamento trmico que mantm o material contaminado a

temperaturas elevadas, em contato com o vapor de gua, durante um determinado tempo at
que todos os microrganismos desejados estejam mortos.
A autoclavagem, nesta prtica, foi feita especificamente para esterilizar os materiais a
serem utilizados para preparar um meio de cultura. Meios de cultura so associaes estreis
que contm substncias ricas em nutrientes que so necessrios para o desenvolvimento e o
cultivo de determinado microrganismos em ambientes que no lhes so de natureza prpria.
Existe uma grande diversidade de meios, que so elaborados de acordo com as exigncias dos
3

microrganismos em questo, alm disso, preciso fornecer condies ambientais apropriadas

ao desenvolvimento dos mesmos, como, por exemplo, temperatura e umidade. Os meios de
cultura podem ser slidos, semisslidos ou lquidos.

OBJETIVO
Preparar e esterilizar meio de cultura, para anlise microbiana futura.

MATERIAIS E MTODOS
Materiais
Copinho descartvel
Placas de Petri
Papel craft
Pipeta
Balo de fundo chato
Basto de vidro
gua
Proveta de 250 ml
Bquer de 1000 ml
Tela de amianto
Bucha
Cordo
Fita de autoclave
Meio de cultura: gar batata dextrose
Autoclave
Mtodos
Preparo do meio de cultura
Incialmente adicionou-se 200 ml de gua destilada na proveta. Em seguida, transferiuse aproximadamente 200 ml de gua destilada para o bquer de 1000 ml e adicionou-se o
Caldo Nutritivo previamente pesado, lentamente para no deixa-lo entrar em contato com as
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laterais do bquer e/ou com o basto, evitando assim perda de material. A medida que foi se
adicionando o Caldo Nutritivo, homogeneizou-se delicadamente a mistura com o auxlio do
basto de vidro. Com a pipita automtica foi coletado 10 ml da soluo distribuda em seis
tubos de ensaios distintos. O restante da soluo, 140 ml, foi despejado em um balo
volumtrico, e foi feita uma bucha de algodo hidrfobo e gaze para lacrar o balo, cortou-se
o excesso da bucha e embrulhou-a com papel craft.
Esterilizao por autoclavagem
Placas de Petri e uma pipeta foram embrulhadas com papel craft e em seguida lacradas
com o auxlio da fita de autoclave. Posteriormente levaram-se estes materiais juntamente com
o balo de fundo chato, que continha a soluo proveniente do preparo do meio de cultura, at
o equipamento de autoclave. Aps serem devidamente colocados no equipamento, o mesmo
foi fechado, com a vlvula de ar aberta e sempre fechando os manpulos em pares enquanto
manteve-se a temperatura no mximo. Aguardou-se a completa sada de ar do recipiente e em
seguida fechou-se a vlvula de ar. Observou-se a presso atingir 1atm e modificou-se a
temperatura da autoclave para o mnimo, a fim de manter esta presso constante. Aps 15
minutos a autoclave foi desligada. Aps, os tubos de ensaios foram colocados em um pote,
vedado com o papel craft, para posteriormente passar pelo mesmo processo descrito acima.

Figura 1. Autoclave sendo preparada para a esterilizao.

RESULTADOS E DISCUSSES
Foi pego um copinho descartvel e este foi colocado na balana, observou-se um peso
de 0,913g e ento se tarou a balana. O Caldo Nutritivo foi cautelosamente despejado no
copinho at que 1,6g fossem obtidas. A quantidade de Caldo Nutritivo pesada se deveu ao
fato de o mesmo ter uma concentrao de 8g para 1000 ml de gua, assim:
8 g --------------- 1000 ml de gua
x g --------------- 200 ml de gua

x = 1,6 g

CONCLUSO
Em virtude do que foi apresentado anteriormente, conclui-se que os materiais foram
esterilizados corretamente atravs do processo de autoclavagem, o que foi essencial para a
preparao do meio de cultura, j que inibiu as chances de erros que viessem a prejudicar o
crescimento saudvel dos microrganismos e a propagao de microrganismos contaminantes,
no comprometendo, assim, os resultados desejados.

REFERNCIAS

Fiocruz.

Autoclavagem.

Acesso

em:

05/10/2014.

Disponvel

em:

<www.fiocruz.br/biossegurancahospitalar/dados/material13.htm>.
MOURA, Roberto A. de Almeida. Tcnicas de laboratrio. 3. ed. Rio de Janeiro:
Atheneu, 1999. 511 p. ISBN 8573791136.
UFBA.

Meios

de

Cultura.

Acesso

em:

05/10/2014.

Disponvel

em:

<www.microbiologia.ufba.br/aulas/MEIOS%20DE%20CULTURA.doc>.
Fragmaq. Para que serve uma autoclave. Acesso em: 05/10/2014. Disponvel em:
<www.fragmaq.com.br/blog/serve-autoclave/>
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