OBJETIVOS:

Poder evidenciar la accin de la enzima que poseemos en la boca

para degradar almidn, la - amilasa.
Ver calidad de degradacin del almidn en diferentes condiciones.
Observar la diferencia de degradacin del almidn en un medio
neutro y en un medio cido.

Entender la importancia de un activador como lo es el NaCl en la

- amilasa.

Observar de manera macro la reaccin fsica del Lugol por accin

del calor
Poder ver el grado de digestin de la muestra con la ayuda del
reactivo de Benedict.
Darnos cuenta de la importancia de mantener un pH para la accin
de una enzima sobre un sustrato, en este caso sobre el almidn.
MATERIALES

Tubos de ensayo
Agua destilada
Piptas calibradas
Propipetas
Papel toalla
Incubadora
Almidon
NaCl

Buffer fosfato
HCl

MTODO O PROCEDIMIENTO
COLECCIN DE LA SALIVA
El donante de saliva no debe haber ingerido alimento durante un mnimo
de 2 horas, antes de la coleccin. Para la obtencin primero proceder a
un enjuague simple de la cavidad oral con agua; luego, manteniendo la
boca cerrada por 5 a 7 min. Evitando hablar y pasar saliva. La coleccin
se realizar en recipiente de boca ancha dejando caer por gravedad la
saliva, evitando as la formacin de espuma.

DILUCIN DE LA MUESTRA DE SALIVA

Medir 2 mL de saliva y diluirla con 8 mL de Agua destilada, homogenizar
(agitarla suavemente) durante 2 minutos.

I.- DIGESTIN:
Preparar una batera de tubos como sigue:

Pre-incubar en bao Mara de 37C por 5 min. y luego agregar en cada tubo lo siguiente:

Incubar en bao maria de 37C por 10 min. y cada 3 min. agitar el tubo removimiento el
almidn para evitar la sedimentacin del sustrato.

 Luego retirar del bao maria y agitando previamente los tubos de la digestin (1, 2, y
3), preparar las siguientes bateras de reaccin.
En la discusin de los resultados analice el papel del NaCl y el HCl en el proceso de
digestin.
II.- REACCIN DEL LUGOL:

Mezclar y observar los resultados

Analizar si la reaccin es positiva (+) o negativa (-) al reactivo de Lugol. Puede usted
calificar los resultados mediante cruces o describir la coloracin obtenida.
Explique los resultados

III.- REACCIN DE BENEDICT:

Colocar en bao de agua hirviente (100C) por 5 min. observe los resultados.
Analizar si la reaccin es positiva (+) o negativa (-) al reactivo de Benedict
Puede usted calificar los resultados mediante cruces o describir la coloracin obtenida
y analice los resultados.

Integre los resultados de los procedimientos I, II y III para obtener conclusiones.