FLORESTA 30(1/2): 129-137

Uso de extratos vegetais no controle de fungos

fitopatognicos
KTIA REGINA FREITAS SCHWAN-ESTRADA
JOS RENATO STANGARLIN
MARIA EUGNIA DA SILVA CRUZ

1
2
1

INTRODUO
Atualmente, em todos os lugares do mundo onde se pratica uma
agricultura econmica, a interveno para o controle de doenas de plantas
largamente realizada atravs de pesticidas (KIMATI et al., 1997). Sem dvida,
o uso racional desses produtos pode ter, em curto prazo, um efeito positivo para
o produtor. No entanto, em longo prazo, alm do surgimento de isolados dos
fitopatgenos resistentes s substncias qumicas utilizadas, os resultados para
a sociedade como um todo e para o meio ambiente podem se tornar negativos
devido poluio causada pelos resduos. Nesse contexto, termos como
agricultura alternativa ou agricultura sustentvel obtm expresso poltica
(ZADOKS, 1992) e estimulam a busca por novas medidas de proteo das
plantas contra as doenas.
Um dos enfoques da agricultura alternativa o controle alternativo de
doenas de plantas, o qual inclui o controle biolgico e a induo de resistncia
em plantas (no so includos nesse conceito o controle qumico clssico e o
melhoramento gentico (BETTIOL, 1991)).
O controle biolgico pode ser definido como o controle de um
microrganismo atravs da ao direta de um outro microrganismo antagnico, o
qual pode atuar por meio de antibiose, parasitismo, competio, predao ou
hipovirulncia (COOK & BAKER, 1983).
A induo de resistncia (ou induo de proteo, imunidade
adquirida, ou resistncia sistmica adquirida) envolve a ativao de
mecanismos de defesa latentes, existentes nas plantas, em resposta ao
tratamento com agentes biticos ou abiticos (HAMMERSCHMIDT & DANN,
1997). Esses mecanismos de resistncia induzidos podem ser estruturais, como
papila, lignificao e tilose, ou bioqumicos, como o acmulo de fitoalexinas e
de protenas relacionadas patognese (como -1,3 glucanase e quitinase
degradadoras da parede celular de fungos) (PASCHOLATI & LEITE, 1995).
Essa ativao pode ser obtida pelo tratamento com agentes biticos (como
microrganismos viveis ou inativados) (STANGARLIN & PASCHOLATI,
1

(Fundao Universidade Estadual de Maring - Centro de Cincias Agrrias - Departamento de

Agronomia - Av. Colombo, 5790 - 87020-900 - Maring PR schwan@wnet.com.br);
2
(UNIOESTE Mal. Cndido Rondon PR jrstangarlin@unioete.br); (mcruz@wnet.com.br)

130

Schwan-Estrada, K. R. F., et al.

1994) ou abiticos, como cido 2,6-dicloroisonicotnico (HIJWEGWN et al.,

1996) e benzo (1, 2, 3)tiadiazol-7 carbotiico (Ciba, 1995). A proteo
conferida pelo tratamento capaz de proteger a planta contra infeces
subseqentes por diferentes patgenos (KUC, 1995) e mostra-se como uma
estratgia potencial para o controle fitossanitrio (LYON et al., 1995). A
indstria de defensivos j tem desenvolvido molculas, no pesticidas, capazes
de protegerem uma cultura contra os patgenos causadores de doenas apenas
pela induo dos mecanismos de defesa da planta (ZADOKS, 1997). Molculas
ou agentes de origem bitica ou abitica, capazes de ativar ou induzir qualquer
resposta de defesa nas plantas, so chamadas de elicitores (SMITH, 1996). A
variada natureza qumica dos elicitores, tais como oligossacardeos,
glicoprotenas, oligopeptdeos e cidos graxos demonstra que no h uma
caracterstica estrutural nica que determine a atividade elicitora.
As fitoalexinas so metablitos secundrios, antimicrobianos, de baixo
peso molecular e produzido pelas plantas em resposta a estresses fsicos,
qumicos ou biolgicos, sendo capazes de impedir ou reduzir a atividade de
agentes patognicos (PURKAYASTHA, 1995). De forma geral, o modo de
ao das fitoalexinas sobre fungos inclui granulao citoplasmtica,
desorganizao dos contedos celulares, ruptura da membrana plasmtica e
inibio de enzimas fngicas. Esses efeitos refletem-se na inibio da
germinao e elongao do tubo germinativo e reduo ou inibio do
crescimento micelial (LO et al., 1996). Mais de 300 fitoalexinas j foram
caracterizadas entre diferentes classes de compostos qumicos como cumarina,
diterpeno e flavonide, entre outras, tendo sido identificadas em mais de 20
famlias de vegetais superiores (SMITH, 1996). Em sorgo so conhecidas
quatro fitoalexinas (flavonides 3-deoxiantocianidinas): luteolinidina, 5metoxiluteolinidina, apigeninidina e ster do cido cafeico de arabinisol 5-Oapigeninidina (NICHOLSON et al., 1987). No caso da soja, a fitoalexina
gliceolina (pterocarpanide) mostra-se importante na interao dessa
leguminosa com fitopatgenos (BURDEN & BAILEY, 1975). Mesoctilos
estiolados de sorgo e cotildones de soja mostram-se como excelentes
ferramentas para estudos envolvendo a ao elicitora de molculas de origem
bitica e abitica.
A explorao da atividade biolgica de compostos secundrios
presentes no extrato bruto ou leo essencial de plantas medicinais pode se
constituir, ao lado da induo de resistncia, em mais uma forma potencial de
controle alternativo de doenas em plantas cultivadas. Algumas espcies
estudadas sob este aspecto so: Baccharis trimera, Eucalyptus citriodora,
Cymbopogon citratus, C. martinii, Ocimum gratissimum. No Brasil, somente
20% da populao consome 63% dos medicamentos disponveis, enquanto que
o restante encontra nos medicamentos de origem natural, especialmente nas
plantas medicinais, a nica fonte de recurso teraputico (DI STASI, 1996a).
At o momento, ainda no se conhece quase nada sobre a composio qumica

Uso de extratos vegetais no controle de fungos fitopatognicos

131

de 99,6% das plantas de nossa flora, estimadas entre 40 mil a 55 mil espcies
(MING, 1996). Alm disso, uma grande quantidade de compostos secundrios
das plantas medicinais j isolados e com estrutura qumica determinada, ainda
no foi estudados quanto suas atividades biolgicas. Esses compostos
pertencem a vrias classes distintas de substncias qumicas, como alcalides,
terpenos, lignanas, flavonides, cumarinas, benzenides, quinonas, xantonas,
lactonas e esterides, entre outras (DI STASI, 1996b). Quando esses compostos
so extrados das plantas por processos especficos, como a destilao por
arraste de vapor de gua, originam lquidos de consistncia semelhante ao leo,
volteis, dotados de aroma forte, quase sempre agradvel, insolveis em gua e
solveis em solventes orgnicos, denominados de leos essenciais (SILVA et
al., 1995). Compostos secundrios de plantas medicinais esto distribudos em
um grande nmero de famlias botnicas, com muitos deles apresentando
atividade antimicrobiana, como o caso dos alcalides, com origem
biossinttica a partir da via metablica do cido shiqumico (BENNETT &
WALLSGROVE, 1994).
Trabalhos desenvolvidos com extrato bruto ou leo essencial, obtido a
partir de plantas medicinais da flora nativa, tm indicado o potencial das
mesmas no controle de fitopatgenos, tanto por sua ao fungitxica direta,
inibindo o crescimento micelial e a germinao de esporos, quanto pela induo
de fitoalexinas, indicando a presena de composto(s) com caracterstica de
elicitor (es). O fracionamento dos metablitos secundrios dessas plantas, bem
como a determinao da atividade biolgica dessas molculas, com respeito
atividade elicitora ou antimicrobiana, podero contribuir para a aquisio de
maiores conhecimentos que reforcem sua possvel utilizao como um mtodo
alternativo de controle de doena de plantas.
Tanto o extrato bruto quanto o leo essencial de plantas medicinais
(alecrim (Rosmarinus officinalis), manjerona (Origanum majorana), alfavaca
(Ocimun basilicum), mentrasto (Ageratum conyzoides), babosa (Aloe vera),
mil-folhas (Achillea millefolium), organo (Origanum vulgare), cardo santo
(Argemone mexicana), pitanga (Stenocalyx michelli), erva cidreira (Lippia
alba), poejo (Mentha pulegium), hortel pimenta (Mentha piperita), rom
(Punica granatum), goiabeira vermelha (Psidium guayava var. pomifera),
eucalipto lima (Eucalyptus citriodora), manjerico (Ocimum basilicum), arruda
(Ruta graveolens) e carqueja (Baccharis trimera)) tm sido utilizados para
estudos, in vitro, de inibio de crescimento micelial e esporulao de fungos
fitopatognicos (Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Alternaria alternata,
Phytophthora sp. e C. graminicola) e em bioensaios para a induo de
fitoalexinas em sorgo (deoxiantocianidinas) e soja (gliceolina).
Bioensaios realizados por SCHWAN-ESTRADA et al (1997) para a
sntese de deoxiantocianidinas em mesoctilos de sorgo, com diferentes plantas
medicinais, mostraram que os extratos brutos de rom, erva cidreira,

132

Schwan-Estrada, K. R. F., et al.

manjerona, babosa e organo foram os mais efetivos, entre as plantas

medicinais testadas, em induzir o acmulo de um complexo de pigmentos
(Tabela 1). A maior induo foi observada pelo tratamento com o patgeno C.
graminicola, onde provavelmente se observa maior nvel de reconhecimento e,
portanto, maior ativao do metabolismo de defesa da planta. Os tratamentos
com ultravioleta e S. cerevisiae mostraram baixa atividade elicitora, ao
contrrio do observado por WULFF & PASCHOLATI (1998). Com relao
sntese de gliceolina em cotildones de soja (Tabela 1), os extratos brutos de
pitanga, cnfora, poejo, rom e cardo santo foram os mais efetivos, entre as
plantas medicinais testadas, em induzir o acmulo de gliceolina em cotildones
de soja. Os tratamentos com ultravioleta, S. cerevisiae e C. graminicola (no
patgeno) tambm mostraram bons resultados.
Em ensaios para verificar a inibio de germinao de condios de C.
graminicola, BERNARDO et al (1998) verificaram que houve 100% de
inibio na germinao em presena dos leos essenciais de Ocimum basilicum,
Baccharis trimera e Ruta graveolens. No tratamento controle a porcentagem de
germinao foi de 92%. Quando o extrato bruto aquoso de E. citriodora
(Tabela 2) foi utilizado, ocorreu um estmulo germinao dos esporos,
embora tenha reduzido entre 14 e 34% a formao de apressrios em
concentraes do extrato acima de 10% (BONALDO et. al 1998). O apressrio
uma estrutura necessria para penetrao do patgeno no hospedeiro, de tal
forma que a sua ausncia implica em reduo da porcentagem de infeco. J
para o crescimento micelial, houve 100% de inibio do crescimento micelial
dos fungos testados em todas as alquotas do leo de manjerico (O. basilicum).
Em leo de carqueja (B. trimera), houve crescimento de todos os fungos at a
alquota de 100 l e inibio de 100% para as demais alquotas (500 e 1000 l).
Em leo de arruda (R. graveolens), apenas A. alternata apresentou crescimento
micelial at a alquota de 40 l (inibio de 74%), havendo inibio de 100%
no crescimento nas demais alquotas (Tabela 3). Quando em presena do
extrato bruto, R. graveolens e O. basilicum inibiram totalmente o crescimento
micelial de S. rolfsii em concentraes acima de 10%. O extrato bruto de B.
trimera apenas inibiu parcialmente o crescimento micelial dos fungos
fitopatognicos testados. Para Dydimella bryoniae, tanto o extrato bruto quanto
os leos essenciais de E. citriodora, Ageratum conyzoides e Cymbopogon
citratus, inibiram completamente o crescimento micelial e a germinao dos
condios (FIORI et al., 2000).
Outros trabalhos desenvolvidos com plantas medicinais detectaram a
presena de compostos fungitxicos atravs de cromatografia de camada
delgada. STANGARLIN et al (1997) verificaram a presena de fraes nas
quais houve inibio do desenvolvimento de C. graminicola. Observou-se a
presena de duas fraes fungitxicas bem definida nos extratos de erva
cidreira, e uma nos de cnfora e alfavaca. Uma pequena banda de inibio foi
verificada nos extratos de organo, mentrasto e alecrim. Os extratos de

Uso de extratos vegetais no controle de fungos fitopatognicos

133

manjerona, mil-folhas, hortel pimenta, cardo santo, rom, poejo, pitanga,

babosa e goiabeira vermelha no apresentaram fraes fungitxicas.

CONSIDERAES FINAIS
As pesquisas realizadas in vitro indicam o potencial das plantas
medicinais estudadas no controle de fungos fitopatognicos e na induo de
alguns mecanismos de defesa das plantas. No momento, as pesquisas esto
sendo direcionadas para trabalhos in vivo utilizando-se patossistemas em
feijoeiro, soja, pepino, trigo e sementes de cereais, com o objetivo de verificar a
ocorrncia de induo de resistncia atravs do monitoramento da expresso
dos sintomas da doena, bem como, de outros mecanismos de defesa da planta
hospedeira, como a formao de papilas ou a sntese de protenas relacionadas
patognese. O fracionamento cromatogrfico e a caracterizao de fraes
elicitoras, dosagem e intervalo de aplicao que sejam mais eficientes e que no
provoquem fitotoxidez fazem parte desta etapa. O objetivo final obter, atravs
do leo essencial ou, principalmente do extrato bruto, uma tecnologia que possa
ser repassada para pequenos produtores rurais, ou aqueles interessados no
"cultivo orgnico", onde formas alternativas de controle de doenas so
necessrias. Por outro lado, alm desses benefcios no controle fitossanitrio, o
produtor rural teria a sua disposio um novo produto para comercializar, que
so as prprias plantas medicinais.

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ANEXOS
Tabela 1 - Produo de fitoalexinas deoxiantocianidinas em mesoctilos de sorgo e gliceolina em
cotildones de soja aps o tratamento com extrato bruto de plantas medicinais.
PLANTA MEDICINAL1
DEOXIANTOCIANIDINA
GLICEOLINA
(ou outros indutores)2
(ABS480/g.p.f.)3
(ABS285/g.p.f.)3
Organo
0,97 0,15
0,31 0,01
Cardo santo
0,72 0,26
0,40 0,01
Hortel
0,33 0,03
0,26 0,01
Alecrim
0,54 0,02
0,24 0,01
Mentrasto
0,61 0,04
0,30 0,02
Babosa
1,57 0,55
0,36 0,01
Manjerona
1,56 0,62
0,36 0,01
Erva cidreira
2,60 0,02
0,33 0,01
Cnfora
0,76 0,05
0,50 0,01
Pitanga
0,37 0,05
0,54 0,01
Goiabeira vermelha
0,54 0,03
0,29 0,01
Rom
3,50 0,01
0,43 0,01
Alfavaca
0,32 0,01
0,29 0,01
Mil folhas
0,36 0,02
0,28 0,01
Poejo
0,27 0,02
0,49 0,01
Luz ultravioleta
0,23 0,01
0,46 0,01
Saccharomyces cerevisiae
0,91 0,19
0,55 0,01
Colletotrichum graminicola
15,67 0,91
1,04 0,01
Controle (H2O)
0,21 0,01
0,31 0,01
1
Extrato bruto de plantas medicinais em concentrao de 20% (peso/volume);
2
Outros indutores: luz ultravioleta (agente fsico); S. cerevisiae e C. graminicola
(agentes microbianos);
3
Valor de absorbncia (480 nm ou 285 nm para deoxiantocianidina e gliceolina,
respectivamente) por grama de peso fresco (g.p.f.) erro padro da mdia.

Uso de extratos vegetais no controle de fungos fitopatognicos

137

Tabela 2 - Efeito in vitro do extrato bruto aquoso da planta medicinal Eucalyptus citriodora sobre
a germinao de esporos e formao de apressrios do fungo fitopatognico Colletotrichum
graminicola.

CONCENTRAO DO
EXTRATO BRUTO (%)1
1
5
10
20
50
Controle (H2O)

PORCENTAGEM DE
GERMINAO2,4
APRESSRIOS3,4
29,5 3,8
78 4
41,5 3,2
94 5
44,5 5,3
86 6
59,5 3,8
71 2
57,5 8,1
66 3
24,0 2,8
100 0

Porcentagem: peso fresco de folhas por volume de soluo;

Foram considerados germinados os esporos que apresentavam comprimento de seu tubo
germinativo pelo menos igual ao menor dimetro do esporo;
3
Porcentagem de apressrios calculada em relao ao nmero de esporos germinados;
4
Valores representam a mdia de 100 contagens erro padro da mdia.
2

Tabela 3 - Efeito in vitro do leo essencial das plantas medicinais Ocimum basilicum, Ruta
graveolens e Baccharis trimera sobre o crescimento micelial dos fungos fitopatognicos
Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Alternaria alternata e Phytophthora sp.
PLANTA
MEDICINAL

Alquota
(l)

INIBIO DO CRESCIMENTO MICELIAL (%)1

R. solani

B. trimera

R. graveolens

20
40
100

75
80
82

S. rolfsii
77
85
95

A. alternata

Phytophthora
sp.

76
85
95

76
85
95

20
100
100
45
100
40
100
100
74
100
1
Avaliao realizada 3 dias aps o incio do experimento para R. solani e S. rolfsii, 4
dias aps para Phytophthora sp. e 5 dias aps para A. alternata. O valor de inibio em relao ao
dimetro da colnia fngica obtida no tratamento controle.