Universidade de Braslia

Instituto de Cincias Biolgicas

Departamento de Biologia Celular
Bioqumica e Biofsica Experimental 121886 1/2013
Professor: Fernando Fortes de Valncia

Desnaturao Enzimtica
19-07-2013

Ana Carolina Pl 13/0005461

Aline Rocha Oliveira 13/0004995
Marina Cavalcante Barros Lopes 130014681
Willian Vagner 13/0039241
Braslia, 20 de julho de 2013

Introduo

Materiais

Pisseta com gua destilada

Pera
Pipetas de 1,5 e 10 mL
Pote de plstico para descarte
Guaiacol 0,005%
Guaiacol 0,05%
H2O2 0,3%
Extrato de repolho roxo com tampo acetato 0,5 M
Estante
20 tubos de ensaio
Espectrofotmetro
Becker 50 mL

Procedimentos

1) Preparou-se 10 tubos de ensaio contendo 1mL de extrato de repolho roxo

2) Preparou-se 1 soluo contendo 1,6 mL de gua destilada, 1,4 mL de H2O2 e
1mL de extrato de repolho roxo (tubo de ensaio 1)
3) Preparou-se 9 solues com 2,6 mL de guaiacol 0,005% e 1,4 mL de H2O2
4) Mediu-se a absorbncia da soluo composta de gua destilada, gua
oxigenada e extrato de repolho roxo descrita no item 2
5) Identificou-se os tubos de ensaio com a soluo de extrato de repolho roxo com
nmeros de 1 a 10, encubando-os nos tempos 1, 3, 5, 7, 9, 11,13,15 e 16
minutos respectivamente
6) medida que os tubos de ensaio contendo extrato de repolho roxo foram
retirados da incubao com o passar do seu respectivo tempo, foi adicionado a
ele as outras 9 solues composta de guaiacol e H2O2 e aps 2 mediu-se sua
absorbncia

Resultados

Absorbncia das solues no comprimento de onda 470:

Tubo de ensaio 1 (branco)

0,248

Tubo de ensaio 2

Concluso
Com o experimento conclui-se que a peroxidase desnaturada 75 graus Celsius
acima de 1 minuto e menor ou igual a 3

Referncias Bibliogrficas