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DR.

BERLY MANRIQUE ORRILLO


MEDICO- PATLOGO

La enfermedad es la respuesta a una injuria

La histologa, al igual que otras


ciencias morfolgicas, pertenece a la
categora de las ciencias
fundamentales.
Desde su surgimiento sus xitos
cientficos estn relacionados con el
desarrollo de los mtodos de la
microscopa .

Histologa es la ciencia que estudia la


estructura microscpica de las clulas,
tejidos y rganos, estableciendo la relacin
con la actividad vital.
Mtodo de estudio histolgico:
el microscpico
Objeto de estudio: imgenes de los
preparados de tejidos fijados y coloreados .

Primer periodo: Premicroscpico


Desde el siglo IV hasta la mitad del siglo XVII.
Andrs Vesalio (1514-1564) fundador de la Histologa Cientfica

Nociones generales sobre los tejidos del


organismo (semejanza exterior )

Segundo perodo: microscpico


R.Hooke (1665 perfeccion el microscopio).
Permiti observar la estructura fina de los tejidos
celdas o clulas (del Lat.Cellula).
Malpighi (1671), el botnico Grez (1671) y el ptico
Leenwenhoek, A fines del siglo XVIII y principios del
XIX :teoras generales de la estructura de los
organismos y de su desarrollo. descripciones no
autenticas o tenan un carcter especulativo o
Apriorstico
-Teora de la estructura fibrosa y granular
de los organismos.
-Teora de la preformacin,
-Teora de la epignesis,

Marcello Malpighi (1628-1694)

Anton van Leeuwenhoek (16321723)

Segundo perodo:
microscpico
Culminacin de este periodo: T.Schwann: Teora celular (18381839) los seres vivos estn constituidos por clulas y productos
celulares.
Influy sobre la Biologa y la Medicina .
Fundamento principal para el desarrollo de la Embriologa,
Histologa y Fisiologa.
Aument las bases para la comprensin materialista de la vida,
la aclaracin de la correlacin evolutiva de los organismos y la
comprensin del desarrollo individual.

Tercer perodo:microscopia electrnica.

Se caracteriza por que desarrollo de la histologa se relaciona


con el desarrollo de los mtodos ms nuevos de las investigaciones
histolgicas ,ante todo de los mtodos microscpicos electrnicos:
Microscopia electrnica de transmisin y exploracin as como
histoqumica electrnica.
Microscopia electrnica : ultraestructura de las clulas, tejidos y
rganos. Los organelos celulares y su biognesis. El concepto sobre
membrana biolgica.
Microscopia electrnica de exploracin y el uso del mtodo de corte
por congelacin :
Estudio de las estructuras submicroscopicas en tres dimensiones,
procedimientos de unin de las clulas, separacin de las
secreciones, etc.

CONCLUSIONES
1.- Formar la concepcin materialista cientfica del mundo
sobre el equilibrio vital del organismo humano en estado
normal.
2.-Relacin con otras ciencias biomdicas:
como la anatoma es necesario para la comprensin de los
cambios que tienen lugar en el individuo enfermo fisiologa,
Patologa, Inmunologa, Gentica, disciplinas relacionadas
con la Clnica.
3.- Sus mtodos y tcnicas son diariamente utilizadas en l
diagnostico de muchas enfermedades por citlogos,
patlogos,

LA HISTOLOGA ES EL ESTUDIO DE
LOS TEJIDOS Y SU FUNCIN
LA FINALIDAD DEL CURSO ES GUIAR AL ALUMNO
SOBRE EL CONOCIMIENTODE LA MICROANATOMA
DE LOS TEJIDOS , RGANOS Y A CORRELACIONAR
LA ESTRUCTURA CON LA FUNCIN.

UTILIZAMOS LA MICROSCOPA PTICA PARA


NUESTRO
ESTUDIO
DE
PREPARADOS
HISTOLGICOS
DE
DIFERENTES
TEJIDOS
Y
RGANOS,
PERO
PARA
COMPRENDER
LA
NATURALEZA DE LA IMAGEN BIDIMENSIONAL DE
LOS CORTES HISTOLGICOS Y COMO SE
RELACIONA CON LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL
DE LA CUAL PROVIENE ,SE DEBE CONOCER LAS
TCNICAS QUE SE UTILIZAN PARA OBTENER
NUESTRAS LMINAS .

TCNICAS HISTOLGICAS DE
MICROSCOPIA OPTICA
Las tcnicas histolgicas nos permite estudiar
una capa muy delgada de tejido (algunos
micrones) ,susceptible de ser estudiada por
transparencia en el microscopio, conservando
adems de la forma , lo mas exacta posible la
estructura de las clulas y los tejidos , es decir ,
su agrupacin y disposicin recprocas.

ETAPAS
OBTENCIN DE LA
MUESTRA
FIJACIN
CONFECCIN DE LOS
CORTES
COLORACIN
CONSERVACIN

OBTENCION DE LA MUESTRA
Constituye la primera etapa de todo estudio
histolgico.
Descripcin macroscpica de espcimen.
El examinador debe instalarse adecuadamente
bajo una buena luz , donde dispondr de un
equipo de ciruga menor , regla , guante estriles ,
una bandeja de plstico o madera . Adems para
su proteccin utiliza adems delantales de de
material lavable. Lentes para tiles para
salpicaduras .

OBTENCION DE LA
MUESTRA
Tener muy cerca agua corriente, y un

frasco de boca ancha para la


colocacion de las muestras a obtener
Se procede a tomar un fragmento del
tejido ,que se obtiene de especimenes
de animales o humanos .
Los fragmentos convienen que sean
adems tan amplios y finos como sea
posible a fin de permitir un buen
estudio topogrfico y una fijacin
satisfactoria
El grosor de la muestra obtenida no
debe pasar de 5mm

OBTENCION DE LA MUESTRA

FIJACIN
Est destinada a inmovilizar las estructuras celulares y
tisulares en un estado lo ms prximo posible al estado
vivo.
La fijacin tiene como objeto asegurar una coagulacin
todo lo homognea posible de los geles proteicos
mejora los ndices de refraccin y endurecimientos de
los tejidos(favorece el corte y la observacin
microscpica).
Los fijadores ms comunes es el formol, el alcohol, las
sales de metales pesados, cido pcricos y cido
actico .
.

FIJACION DE LA MUESTRA
Reglas Generales :
La fijacin debe ser lo ms
precoz posible
La fijacin debe ser rpida
El lquido fijador debe ser
abundante
La duracin de la fijacin
El lavado de las piezas

FIJACION DE LA
MUESTRA

CONFECCION DE LOS CORTES


-Consta de las siguientes
etapas
A.- Inclusin
B,. Preparacin del Bloque
C.- Corte en Micrtomo
D .- Montaje de los cortes

A.- INCLUSION
Para confeccionar estos cortes
debemos preparar el tejido
endureciendose y esto se
consigue mediante la
inclusin .
Consiste en hacer penetrar lo
mas posible en el tejido una
sustancia homognea
solidificable .

La ms usada parafina,. como consecuencia


de la adherencia entre si de los bordes de los
cortes sucesivos de los bloques de parafina.
A esto se llama inclusin y consta de la
siguientes etapas
1.- Deshidratacion
2.-Aclaramiento o impregnacion por un
solvente intermedio de la parafina
3.- Inclusion en parafina

INCLUSION

1.- DESHIDRATACION:
Los baos sucesivos de alcohol etlico de menor
a mayor concentracin (70, 80,90,100%)
Una deshidratacin insuficiente es siempre
nociva, pues las vuelve frgiles.


DESHIDRATACION

2.- IMPREGNACION POR UN SOLVENTE


INTERMEDIO
DE LA PARAFINA
:
El ms usado es el Xilol , la
inmersin del xilol durante
un mximo de 12 horas
expulsa el alcohol , disuelve
las
grasas y deja la pieza
transparente
(ACLARAMIENTO)

3.-INCLUSION EN PARAFINA :
La parafina son mezclas de
carburos procedentes de la
destilacin del petrleo, su
consistencia depende del
punto de fusin (45 -70).
En la prctica 56-57 .Se
Practica 3 baos sucesivos .

INCLUSION EN PARAFINA

B.- PREPARACION DE LOS BLOQUES


Se realiza en moldes de metal con fondo plano y
bordes ensanchados que se untan previamente
con glicerina .
Se va endureciendo la parafina con bloques de
hielo .
Luego se espera que se solidifique y se procede a
los corte de los tejidos.
Luego son puestos sobre bloques de madera o
plstico.

MOLDE PARA BLOQUES DE PARAFINA

MONTAJE DE LOS BLOQUES EN SUJETADORES DE


PLASTICO

C.- CORTE EN MICROTOMO


Se realizan cortes seriados
de un espesor de 5 a 10
um.

cortando con el
Micrtomo.

PREPARACION DE LOS CORTES

CORTES EN MICROTOMO MINOT

D.-MONTAJE DE LOS CORTES


Se siguen 3 pasos :
extendido, adherencia y
secado

COLORACION:
El ms usado es la coloracin de Hematoxilina
Eosina
La mayor parte de los colorantes histolgicos se
emplean en solucin acuosa .
El corte de tejido est incluido en parafina , debe
desparafinarse y luego rehidratarse concentraciones
decrecientes de alcohol etlico ).
La H-E colorea el ncleo de azul violeta y el
citoplasma de color rosado

Fundamentos de la Coloracin :
La eosina (colorante acido),
lleva una carga neta
negativa en su porcin
coloreada .
La Hematoxilina (colorante
bsico) como lleva una
carga neta positiva en su
porcin coloreada .

LOS
COLORANTES
BSICOS
REACCIONAN
CON
LOS
COMPONENTES ANIONICOS DE LAS
CELULAS
Y DE
LOS
TEJIDOS,
MIENTRAS QUE LOS COLORANTES
ACIDOS REACCIONAN CON LOS
GRUPOS
CATIONICOS
DE
LAS
CELULAS Y TEJIDOS, EN PARTICULAR
LOS GRUPOS AMINO IONIZADOS DE
LAS PROTEINAS.

SET DE COLORACION H & E

BASOFILIA Y ACIDOFILIA
BASOFILIA :la heterocromatina y los nucleolos del
ncleo, componentes citoplasmticos. Sustancias
extracelulares .
Los componentes texturales que se tien con
colorantes cidos se denominan ACIDOFILOS ,
Clulas musculares , la mayor parte de los
componentes membranosos intracelulares y la
mayora de las fibras extracelulares.

METACROMASIA
Algunos
colorantes
bsicos reaccionan como
componentes texturales de
manera tal que su color
normal vara de azul a rojo
prpura .A este cambio de
absorbancia se
denomina METACROMASIA

CONSERVACION DE LA MUESTRA
Luego de la coloracin por lo general se realiza una
deshidratacin y aclaramiento tras lo cual se procede
al montaje , es decir , se cubre el corte con una gota de
lquido de montaje (Blsamo de Canad o
Merkoglass),luego se cubre con un laminilla
cubreobjeto obtenindose una superficie uniforme que
no crea reflejos molestos al observarse con el
microscopio .
Los medios de montaje no son miscibles en agua por
lo que es necesaria la deshidratacin previa.

TECNICAS DE 0BSERVACIN

Sabemos que nuestro objeto de estudio es el


preparado histolgico.
En el momento de las observaciones es imprtante
entender como se efectuan los corte a incluir.
Esto con la finalidad de interpretar las observaciones
realizadas.

GENERALIDADES DE LOS TEJIDOS


Un tejido es un conjunto o asociacin de clulas y
sustancia intercelular o matriz extracelular
elaborada por ellas mismas, que durante el proceso
de diferenciacin embrionaria, presenta un, mismo
origen.
La forma celular y la funcin biolgica a cumplir,
son semejantes.

A. CLASIFICACIN DE LOS TEJIDOS:

1.-Caracterstica morfofuncional:
Tejido epitelial: clulas ubicadas una al lado de otra (en
yuxtaposicin), con escasa sustancia intercelular.
Tejidos conectivo: escasa cantidad de clulas, separadas
por abundante matriz extracelular: Tejido conectivo o
conjuntivo, tejido cartilaginoso, tejido seo y sangre (clulas
sanguneas y plasma).
Tejido muscular: responden con contraccin a los
estmulos. Tejido estriado esqueltico o voluntario, tejido
estriado cardaco o involuntario y tejido liso involuntario.
Tejido nervioso: caracterstica fundamental (clulas
ramificadas, altamente especializadas, las neuronas). Se
distinguen 2 variedades: Neuronas y neurogla.

2 . Origen:
Ectodrmicos: tejido nervioso, piel y sus anexos, esmalte
dentario.
Mesodrmicos: epitelios del tracto genital y urinario,
endotelios, tejidos con sustancia fundamental, msculos,
aparato cardio-vascular.
Endodrmicos: epitelio de revestimiento y glandular del
aparato digestivo y respiratorio.

3. Grado de diferenciacin
Tejidos lbiles: son tejidos que presentan un bajo grado de
(clasificacin
diferenciacin tisular y una
segn
alta capacidad
Bizzoziro):
reparativa.
Ejemplos: epitelios de revestimiento, tejidos conectivos no
especializados.

Tejidos estables: son tejidos ms especializados y


diferenciados.
Su capacidad regenerativa es menor que en el caso anterior,
pero se pueden regenerarse lentamente. Ejemplos: tejido
seo, cartilaginoso, epitelio glandular.

Tejidos perennes: estos tejidos presentan un grado de


diferenciacin y especializacin mayor que los anteriores,
por lo que permanecen sin recambio durante toda la vida
del individuo.
Ejemplos: tejido nervioso y muscular liso y cardaco

4.-Grado de regeneracin:
El poder de regeneracin (autoplastia) de un tejido, es
inversamente proporcional a su grado diferenciacin
celular.
TEJIDOS AUTOPLSTICOS:
Son aquellos que se reparan rpidamente, a partir de
las propias clulas del tejido involucrado.
Ejemplos: tejidos lbiles como epitelios de
revestimiento y tejido conectivo no especializado.

TEJIDOS ANAPLSTICOS:
son aquellos tejidos que reparan a travs de clulas
menos diferenciadas que las propias, las que
posteriormente se diferencian para adquirir la
morfologa y funcin del tejido.
Es el caso del tejido seo y cartilaginoso. Por
ejemplo, un dao en cartlago origina una
proliferacin del tejido conectivo fibroso perifrico, el
pericondrio;
posteriormente estas clulas proliferadas, se
diferencian a condrocitos, es decir se .cartilaginizan.
posteriormente.

TEJIDOS HETEROPLSTICOS
son aquellos tejidos perennes, que poseen un alto
grado de diferenciacin y cuya reparacin se realiza
a partir de un tejido diferente y de menor grado de
diferenciacin.
Ejemplos: tejido nervioso y muscular liso y
cardaco; si se daa una zona del tejido nervioso,
esta ser reemplazada por un tejido afuncional de
relleno, a partir de clulas gliales

B.- PROPIEDADES DE LOS TEJIDOS:


1. Capacidad de regeneracin,
la cual vara
segn su grado de diferenciacin tisular. A mayor
diferenciacin, menor capacidad de reparacin.
2. Capacidad de cultivo, ya sea in vitro (medios
artificiales) o mediante injertos (medios biolgicos).
A mayor diferenciacin, menor capacidad de
cultivabilidad.
3. Especificidad, que corresponde a la mantencin de la
diferenciacin
o especializacin dentro del
organismo normal. Esta especificidad
puede
perderse frente a condiciones de anormalidad o
experimentales.

C.- CRECIMIENTO TISULAR


a) Hiperplasia: es decir, crecimiento por aumento en
el nmero de clulas y sus elementos
intracelulares constituyentes.
b) Hipertrofia: es decir crecimiento por aumento en
el tamao de las clulas

VARIACIONES A TRAVS DE LA
VIDA DEL INDIVIDUO

Hipoplasia: corresponde al menor tamao de


un tejido u rgano, como consecuencia de
un menor nmero de clulas presentes en l.
Hipotrofia: corresponde al menor tamao de
tejidos u rganos, debido a la presencia de
clulas constituyentes ms pequeas que lo
normal.
Agenesia: ausencia de un rgano o tejido, por
ausencia del esbozo embrionario
originario.
Metaplasia: transformacin de un tejido en
otro diferente.

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