EXPERIMENTAO NO ENSINO DE QUMICA

Sebastio F. Fonseca e Caroline C.S. Gonalves

pigmentos naturais, cromatografia em coluna, acar comercial

Este artigo descreve um experimento que envolve a extrao de pigmentos do espinafre, utilizando removedor
de ceras domstico, e a separao dos pigmentos em uma coluna de acar comercial de forma rpida e
relativamente eficiente, usando materiais acessveis. O experimento pode ser executado em uma aula de 50
minutos, embora exija um perodo adicional para a discusso adequada dos fenmenos envolvidos.

Recebido em 26/8/03, aceito em 10/8/04

extrao de produtos naturais

e sua separao cromatogrfica podem ser utilizadas para
ilustrar vrios fenmenos envolvendo
interaes moleculares ou foras
intermoleculares. Entretanto, a dificuldade em encontrar materiais baratos
e acessveis muitas vezes desestimulou experimentos com essas
caractersticas nas escolas de Ensino
Mdio, e isso motivou a busca de
solues criativas (Oliveira et al.,
1998; Seleghini e Ferreira, 1998). Na
extrao e separao dos pigmentos
do espinafre (Mackenzie, 1971), os
materiais alternativos que usamos
foram removedor de ceras domstico
(na extrao e tambm como eluente
do sistema cromatogrfico) e acar
comercial (como fase estacionria
para cromatografia em coluna).
Uma coluna cromatogrfica clssica constituda basicamente por
uma fase estacionria, empacotada
em um tubo, e uma fase mvel ou
eluente. A separao de uma mistura
em um sistema cromatogrfico depende das interaes que ocorrem
entre os componentes da mistura e
as fases estacionria e mvel. Quan-

do apresentam interaes diferentes,

os constituintes de uma amostra podem ser separados, em princpio, por
cromatografia em coluna ou outro
mtodo cromatogrfico (Collins et al.,
1997).

Materiais

Extrao
15 g de espinafre (5-6 folhas)
10 mL de removedor de ceras
5 mL de acetona comercial (removedor de esmaltes)
0,3-0,5 g de sal de cozinha
Recipiente de vidro Pyrex
Pistilo de madeira
Proveta de 10 mL (ou outro recipiente graduado)
Bquer de 50 mL (ou recipiente
compatvel)
Pipeta de Pasteur e chupeta de
ltex (ou conta-gotas)

Coluna cromatogrfica
50 mL de removedor de ceras
16-18 g de acar refinado
Tubo de vidro de 1,8-2,0 cm de
dimetro, 30 cm de comprimento, com uma das extremidades

A seo Experimentao no ensino de Qumica descreve experimentos cuja implementao e interpretao contribuem
para a construo de conceitos cientficos por parte dos alunos. Os materiais e reagentes usados so facilmente encontrveis,
permitindo a realizao dos experimentos em qualquer escola. Neste nmero a seo apresenta dois artigos.
QUMICA NOVA NA ESCOLA

Extrao e separao de pigmentos do espinafre

afilada (ou bureta de tamanho

compatvel)
Algodo
Vareta de madeira
Tubo de ltex de 5-6 cm
Pina
Funil de boca larga
Pedao de mangueira para gs

Aplicao da amostra
5 mL de removedor de ceras
Pipeta de Pasteur e chupeta de
ltex (ou conta-gotas)
Frasco de Erlenmeyer de 50 mL
(ou frasco compatvel)

Desenvolvimento da coluna
10 frascos de penicilina de 8 mL
limpos e secos
100 mL de removedor
50 mL de soluo removedoracetato de etila 25%
Removedor de ceras contendo
25% de acetato de etila comercial (diluente ou removedor de
esmaltes, que pode conter etanol ou acetona)
Filme de polietileno (tipo Magipak)

Parte experimental

Extrao
Cortar em pedaos pequenos 5-6
N 20, NOVEMBRO 2004

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folhas de espinafre fresco (cerca de

15 g), colocar em um recipiente de
vidro resistente (Figura 1), adicionar
cerca de 5 mL de acetona e 10 mL
de removedor e prensar o material
com um pistilo de madeira durante alguns minutos. Transferir o lquido
resultante para um bquer e retirar a
fase aquosa com pipeta de Pasteur.
Adicionar fase orgnica (removedor/
extrato) uma pequena quantidade de
sal de cozinha (uma camada fina no
fundo do recipiente) para eliminar a
gua residual.

Montagem da coluna cromatogrfica

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Utilizar uma bureta de volume

compatvel ou tubo de vidro de 1,82,0 cm de dimetro e cerca de 30 cm
de comprimento com um afilamento
em uma das extremidades (Figura 1),
introduzir um chumao pequeno de
algodo e pressionar com uma vareta
para fix-lo. Colocar na ponta do
afilamento da coluna um pedao de
tubo de ltex de 5-6 cm e improvisar
uma torneira, com uma pina. Colocar
na coluna, com a torneira fechada e
utilizando um funil, o removedor, deixando um volume morto (sem solvente) de 6-8 cm. Com um funil de
boca larga, despejar sobre o removedor, de forma contnua, 15-18 g de
acar comum refinado sem grumos. Aps a adio de todo o acar, para melhorar o empacotamento,
bater suavemente na coluna com um
pedao de mangueira para gs.
Antes de realizar a prxima etapa
separar e numerar 10 frascos de
penicilina de 8 mL limpos e secos.

Aplicao da amostra
Depois do empacotamento da
coluna, escoar o eluente at 3-5 mm
acima da superfcie da sacarose (Figura 1). Com a torneira fechada aplicar a soluo de extrato/removedor
no topo da coluna, com pipeta de
Pasteur, deixando a soluo escorrer
lentamente pela parede do tubo de
vidro. Aps a aplicao da soluo,
escoar o solvente para um frasco de
Erlenmeyer at o nvel da soluo ficar
a 3-5 mm acima da superfcie do acar. Adicionar com pipeta de Pasteur
cerca de 5 mL de eluente (removedor) e repetir a operao anterior (Fi-

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gura 2). Antes de

outras adies de
solvente, introduzir
na coluna um pequeno chumao
de algodo, sem
tocar a sacarose.
Completar com removedor o volume
restante da coluna.

Desenvolvimento
da coluna
Aps a adio
do eluente, com
escoamento ade- Figura 1: Espinafre, extrato, coluna de acar e removedor.
quado, coletar as
fraes (2/3 do volume do frasquinho
de penicilina), completando o volume
de eluente e sem deixar a coluna secar
(Figura 2). Aps a coleta das fraes
da primeira faixa colorida, no colocar
mais eluente na coluna e deixar a altura
do lquido chegar a 1,0 cm acima da
fase estacionria. Completar o volume
da coluna, com cuidado, com uma
soluo de removedor de ceras
contendo 25% de acetato de etila
comercial. Proceder a coleta das
fraes da segunda faixa colorida at
a eluio completa (Figura 3).
Figura 2: Separao do extrato de espinaComparar o conjunto de fraes
fre na coluna de acar.
coletadas, registrar o eluente de cada
uma das faixas e fechar os frasquinhos usando filme de polietileno.

Resultados e discusso
O extrato de folhas de espinafre
foi obtido por macerao com removedor de ceras domstico (constitudo de hidrocarbonetos de cadeia longa como o dodecano, Figura 4) e um
pouco de acetona comercial. A fase
aquosa, contendo acetona, foi separada e a fase extrato/removedor foi
secada com sal de cozinha durante
alguns minutos e aplicada no topo da
coluna cromatogrfica. A fase estacionria usada no experimento foi
acar comercial refinado, sacarose,
Figura 3: Fraes da cromatografia em
uma substncia poli-hidroxilada (Ficoluna do extrato de espinafre.
gura 5), e a fase mvel (eluente) inicial
utilizada foi o removedor
usado na extrao.
Aps a aplicao da
amostra na coluna, adies
sucessivas de pores de Figura 4: Duas representaes estruturais do doderemovedor permitiram a cano.
Extrao e separao de pigmentos do espinafre

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eluio dos pigmentos amarelos,

constitudos principalmente de caroteno (I) e xantinas, ou xantofilas,
relacionadas (II) - Figura 6. Para a

Figura 5: Duas representaes estruturais

da sacarose.

eluio dos pigmentos verdes

[clorofila a, C 55 H 72 MgN 4 O 5 (III);
clorofila b, C55H70MgN4O6 (IV) - Figura
7], foi necessria a adio de
removedor contendo 25% de acetato
de etila comercial.
O -caroteno (I), um hidrocarboneto insaturado, mostrou interaes
mais efetivas com o removedor
(eluente, fase mvel) que com a sacarose (fase estacionria). As xantinas
(II), ou xantofilas, apesar dos grupos
hidroxila, possuem uma cadeia carbnica relativamente longa responsvel pela pouca afinidade com a sacarose. Por outro lado, as estruturas das
clorofilas a e b (III e IV, Figura 7), apresentam um metal (magnsio) no
centro de uma porfirina, V (uma substncia que contm quatro unidades
ligeiramente modificadas de pirrol, VI)
e favorecem interaes mais fortes
com a fase estacionria. Isso exigiu a

utilizao de um eluente mais polar,

contendo acetato de etila, para a eluio completa daqueles pigmentos da
faixa verde/verde-amarelada.
Desta maneira, a separao dos
pigmentos foi rpida, eficiente, com
um intervalo ntido entre as duas faixas coloridas, devido s diferenas
das afinidades e das interaes dos
constituintes do extrato com as fases
estacionria e mvel do sistema
cromatogrfico. Os frascos contendo
as fraes coletadas, as quais so
sensveis ao calor, ao ar e luz, foram fechados com filme de polietileno
e guardados em geladeira..
Para um esclarecimento adequado da separao necessrio um trabalho adicional enfocando polaridade
de ligaes covalentes e foras intermoleculares relacionadas (Allinger et
al., 1976; Carey, 1996). Outra abordagem que o experimento permite sobre as cores das substncias separadas, envolvendo sistemas conjugados e a presena de metais em ncleos porfirnicos.

Consideraes finais

Figura 6: Estruturas do -caroteno (I) e de uma xantina ou xantofila (II).

Figura 7: Estruturas da clorofila a (III), da clorofila b (IV), de uma porfirina (V) e do pirrol
(VI).
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Extrao e separao de pigmentos do espinafre

A extrao de folhas de espinafre

com removedor domstico foi eficiente e forneceu um extrato que foi separado facilmente da fase aquosa. A
utilizao do removedor tambm
como eluente permitiu a separao
dos pigmentos amarelos do extrato,
enquanto que os pigmentos verdes
s foram eludos com uma soluo
de removedor contendo 25% de acetato de etila. A separao dos pigmentos foi rpida e monitorada pela
diferena de cor, no sendo utilizada
outra tcnica cromatogrfica, e pode
ser realizada em um perodo normal
em sala de aula.
O experimento foi demonstrado no
I SIMPEQ (I Simpsio de Profissionais
do Ensino de Qumica), realizado em
10 e 11 de novembro de 2001 no Instituto de Qumica da Unicamp e apresentado na 25 Reunio Anual da
SBQ, realizada em 20-23 de maio de
2002 em Poos de Caldas - MG,
tendo bom impacto nos dois eventos.
O experimento descrito permite e
exige a abordagem de vrios conceitos para a compreenso dos fenmenos envolvidos e, com essas
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caractersticas, poder despertar a

ateno de professores e alunos do
Ensino Mdio para a Qumica Orgnica e para a Qumica de Produtos
Naturais.

Agradecimentos
Aos Grupos de Ensino de Qumica
do Instituto de Qumica da UNICAMP,
pelo apoio e o incentivo.
Sebastio Ferreira Fonseca (sfonseca@iqm.unicamp.
br), licenciado em Qumica pela Universidade Federal do Paran (UFPR), mestre em Qumica Orgnica
e doutor em Cincias pela Universidade Estadual
de Campinas (Unicamp), docente do Instituto de
Qumica da Unicamp. Caroline Costa da Silva Gonalves, bacharel em Qumica pela Unicamp, psgraduanda em Qumica Orgnica no Instituto de Qumica da Unicamp.

Referncias
ALLINGER, N.L.; CAVA, M.P.; DE
JONGH, D.C.; LEBEL, N.A. e STEVENS,
C.L. Qumica Orgnica. Trad. R.B. de
Alencastro. Rio de Janeiro: Guanabara
Dois, 1976.
CAREY, F.A. Organic chemistry. Nova
Iorque: Mc Graw-Hill, 1996.
COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos cromatogrficos. Campinas: Editora da Unicamp, 1997.
OLIVEIRA, A.R.M.; SIMONELLI, F. e MARQUES, F.A. Cromatografando com giz e
espinafre: Um experimento de fcil reproduo nas escolas do Ensino Mdio. Qumica Nova na Escola, n. 7, p. 37-38, 1998.

MACKENZIE, C.A. Experimental organic chemistry. Englewood Cliffs:

Prentice-Hall, 1971.
SELEGHINI, R.M.S. e FERREIRA, L.H.
Preparao de uma coluna cromatogrfica com areia e mrmore e seu uso na
separao de pigmentos. Qumica Nova
na Escola, n. 7, p. 39-41, 1998.

Para saber mais

BRAZ-FILHO, R. Qumica de Produtos
Naturais: Importncia, interdisciplinaridade, dificuldades e perspectivas.
Qumica Nova, v. 17, p. 405-419, 1994.
HARBORNE, J.B. Phytochemical
methods. Londres: Chapman & Hall,
1963.

Abstract: Extraction of Pigments from Spinach and Separation in Commercial-Sugar Column - This article describes an experiment that involves the extraction of pigments from spinach, using a
domestic solvent of wax, and the separation of the pigments in a commercial-sugar column in a fast and relatively easy way, using easily accessible materials. The experiment can be carried out in
a 50-minute class, though it requires an additional period for the discussion of the involved phenomena.
Keywords: natural pigments, column chromatography, commercial sugar

Nota
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In memoriam
Reinaldo Carvalho Silva (1950-2004)
Slido conhecimento, viso de
processo e histrica. Clareza nos conceitos e objetivos fundamentais. Estratgias didtico-pedaggicas adequadas. A dose certa de rebeldia e
criatividade. Compreenso, carinho,
amor. Para aqueles que tiveram o
prazer de desfrutar de suas aulas,
poucos sintetizaram de modo to
completo essas qualidades como o
nosso querido Rei, o professor
Reinaldo Carvalho Silva, recentemente falecido. Reinaldo comeou
sua carreira na Escola Tcnica Federal de Qumica do Rio de Janeiro.
Sua aptido para o ensino era tal que,
ainda durante o curso tcnico, foi
chamado a ser instrutor. Seu encanto
pela Qumica transbordava, sendo
impossvel, ao seu lado, no se deixar
envolver por esse encantamento.
Ousou duvidar da eficcia do ensino
tradicional, em um tempo em que
pouco ou nada se discutia como
alternativa. Trouxe para a sala de aula
experincias inovadoras. Entendia (e
praticava) o papel do professor como
um facilitador e estimulador da aprendizagem, e no como um depositrio

QUMICA NOVA NA ESCOLA

do saber. Inconformado com a esterilidade dos livros didticos de ento,

buscou alternativas, e hei-lo trabalhando com o Cotton-Lynch, realizando o experimento da vela. Trazia aos
seus alunos os conceitos mais recentes, e vejo-o agora lhes apresentando
mecanismos de reao, em contraste
com a Qumica Orgnica descritiva da
poca. Naturalmente, essa sem cerimnia em espalhar seu interesse por
todas as reas da Qumica trazia
atritos com colegas presos a modelos
tradicionais. Mas, saudveis atritos,
que levavam a discusses mais sistemticas e envolventes do ensino de
Qumica. Experimentalista de invejvel tcnica, fazia da mais simples
titulao uma operao artstica.
Ressuscitando velhos equipamentos
jogados no fundo do laboratrio,
introduziu as primeiras aulas de anlise instrumental da Escola, o que
levou, mais tarde, a um laboratrio
completo.
Mudou-se para Florianpolis em
1992, tornando-se professor do
CEFET-SC, orientando ali inmeros
projetos com seus alunos. Sua dedicao ao Ensino Mdio levou-o a
adiar, inmeras vezes, sua ps-graExtrao e separao de pigmentos do espinafre

duao, que terminou por acontecer

na UFSC. Brilhante, passou direto do
mestrado para o doutorado, concludo em Eletroanaltica. Tal como na sua
graduao, na UERJ, era um orientador informal dos colegas e, com sua
lgica simples e precisa, ajudava a
descortinar a sada dos problemas
mais diversos. autor de artigos em
Qumica Nova na Escola, o mais
recente no n. 19.
Bem, fica a alegria de t-lo conhecido, seu exemplo inspirador e uma
grande saudade.
Reinaldo Calixto de Campos
PUC-Rio
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