UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

Faculdade de Farmcia - Centro de Cincias da Sade

Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas
Disciplina: Toxicologia (ACT 0049)

Anlise de aflatoxinas em
amendoim por CCD

Profa. Paula da Silva Kujbida

Anlise de aflatoxinas em amendoim por CCD

Propriedades fsico-qumicas das Aflatoxinas:
Fluorescncia

sob luz UV (366 nm)

B1 e B2 azul
G1 e G2 verde

Substncias

Estveis

apolares

a temperaturas acima de 100C.

Anlise de aflatoxinas em amendoim por CCD

Amostra: Amendoim/paoca

Quais as etapas desenvolvidas?

1 extrao/separao;
Purificao (clean up) para eliminao de interferentes;
2 Extrao (lquido-lquido);
Identificao (CCD).

Anlise de aflatoxinas em amendoim por CCD

Amostra: Amendoim/paoca

Fundamento do mtodo

As aflatoxinas so extradas da matriz usada para anlise

com metanol e cloreto de potssio. Posteriormente
realizada a etapa de limpeza, com a precipitao de
protenas com agentes clarificantes (sulfato de cobre e
celite). As aflatoxinas so re-extradas com clorofrmio
por extrao lquido-lquido e separadas dos componentes
do extrato por cromatografia em camada delgada. A
deteco e quantificao das aflatoxinas so realizadas
por anlise visual sob luz ultravioleta (366 nm).

Anlise de aflatoxinas em amendoim por CCD

Cromatografia em Camada Delgada

(CCD)
(do grego :chroma, cor e :"grafein", grafia)
grafia

Cromatografia em Camada delgada (CCD)

Fase estacionria placa com slica gel
Fase mvelsolvente (capilaridade)
TCNICA DE ADSORO LQUIDO-SLIDO

Cromatografia em Camada Delgada (CCD)

Tcnica que consiste na separao dos compostos de uma
mistura por migrao diferencial sobre uma camada delgada
de adsorvente retido sobre uma superfcie plana.

2 aula

Anlise de aflatoxinas em amendoim por CCD

IDENTIFICAO DE AFLATOXINAS POR CCD

ressuspender
com 500 L de
clorofrmio

Soluo padro
de AFB1: 1 g/mL

Corrida cromatogrfica:
cuba saturada com o
sistema solvente
clorofrmio:acetona (9:1)

Leitura em UV