Universidad Catlica del Norte

Facultad de Ciencias
Departamento de Ciencias Farmacuticas
Espectrofotometra UV- Vis
Carolina Contreras Corts
Javiera Mancilla Ishihara
Pilar Parra Alzamora
13 de Mayo 2014

1. INTRODUCCIN
La espectrofotometra UV-visible es una
tcnica analtica que permite determinar la
concentracin de un compuesto en solucin.
Se basa en que las molculas absorben las
radiaciones electromagnticas y a su vez que
la cantidad de luz absorbida depende de
forma lineal de la concentracin. Para hacer
este tipo de medidas se emplea un
espectrofotmetro, en el que se puede
seleccionar la longitud de onda de la luz que
pasa por una solucin y medir la cantidad de
luz absorbida por la misma. [1]

La aspirina (Figura 2) es un medicamento de

mltiples acciones teraputicas comprobadas
como
por
ejemplo
analgsicas,
antiinflamatorias,
antipirticas
y
antiagregante plaquetario, tambin es uno de los
medicamentos ms consumidos en el
mundo. El cido acetilsaliclico posee una
estructura molecular de C9H8O4 y un peso
molecular de 180,16 g/mol, ya sintetizado el
cido acetilsaliclico, la aspirina se obtiene
mediante un proceso de cristalizacin, sus
cristales son alargados, de sabor ligeramente
amargo y de color blanquecino. [3]

Figura 1: Estructura espectrofotmetro UVVis

El frmaco utilizado para determinar la
concentracin de sus componentes en esta
experiencia es la Cafiaspirina, contiene
cido acetilsaliclico 0,5 g y cafena 0,04 g.
Se indica para el Alivio del dolor de cabeza
leve a moderado asociado a un ataque de
migraa, resfro, gripe, fiebre, dolores
musculares, de odos, muelas, neuralgias,
dolores reumticos y lumbago.[2]

Figura 2: Estructura molecular de cido

acetilsaliclico.

La cafena fue aislada en 1820. Es el

principal alcaloide de la Caffea planta tpica
del caf y del Cacahuatl o cacao de cuyos
granos se elabora el chocolate. Se consume
en mltiples alimentos y bebidas. En usos
teraputicos puede administrarse en forma
oral o en inyeccin intravenosa. Es un

estimulante del sistema nervioso central que

acta despus de 5 minutos de su ingestin
aumentando la actividad cerebral y
reduciendo la vigilia. Se vende bajo diversas
marcas
comerciales
(Cafiaspirina,
Saridn) recomendada para contrarrestar la
fatiga, para tratar la migraa y algunos otros
tipos de cefalea. En conjuncin con
analgsicos hace que stos trabajen mejor.
Por su capacidad para estimular la
respiracin tambin es recomendada en el
tratamiento de la apnea en los recin nacidos
y como antdoto para la depresin
respiratoria en sobredosis de herona y otros
psicoactivos opiceos. [4]

Figura 3: Estructura molecular cafena.

La ley de Lambert-Beer se utiliza para medir
las absorbancia aditiva de los componentes
del frmaco. Para esta ley se necesita de una
recta de calibrado para dos sustancias, y
calcular grficamente el valor de los
correspondientes coeficientes de extincin
molar. [5]

2. HIPTESIS
Los valores de absorbancia de AAS y
Cafena, indicados por el espectrofotmetro,
se encuentran entre 0,2-0,8 nm.

espectrofotometra UV-Vis y mtodo de

absorbancias aditivas.
3.2. Objetivos especficos
Manejar
correctamente
un
espectrofotmetro UV-Vis.
Interpretar
los
espectros
de
absorcin UV-Vis obtenidos.
Determinar las longitudes de onda de
mayor absorbancia de cafena y
AAS.
4. MATERIALES Y MTODOS
Materiales
Los materiales utilizados fueron tres
matraces de aforo de 100 mL y tres de 250
mL, tres tubos falcon, una probeta de 25 mL,
una piseta, un vaso de precipitado de 100 mL
cubetas
de
cuarzo
para
cada
espectrofotmetro, una pipeta graduada de 5
mL, una pro-pipeta. Los equipos utilizados
fueron dos espectrofotmetros (uno para
cada longitud de onda), un ultrasonicador,
una centrfuga, una balanza analtica y una
balanza granataria.
Reactivos
Los
reactivos
utilizados
fueron
aproximadamente 20 comprimidos de
Cafiaspirina de laboratorios Bayer, etanol,
cido clorhdrico 0,5 M y agua destilada.
Para comenzar se realizaron los clculos
correspondientes para calcular el volumen de
cido clorhdrico que haba que diluir para
llegar a una concentracin de 0,05 M a partir
de 0,5 M, como muestra la siguiente
ecuacin:

C 1 V 1=C 2 V 2
0,5 M V 1=0,05 M 250 mL

3. OBJETIVOS
3.1. Objetivo general
Determinar el contenido de AAS y Cafena
presentes
en
Cafiaspirina
mediante

V 1=25 mL
Una vez realizado esto, se pesaron por
triplicado 1,00 g, 1,023 g y 1,026 g de una

mezcla
homognea
pulverizada
correspondiente a 20 comprimidos de
Cafiaspirina, a los cuales se introdujeron en
cada matraz de aforo de 100 mL previamente
rotulados, adems, a cada matraz se le
adicion 50 mL de agua destilada, y 5 mL de
etanol, utilizando una pipeta y su respectiva
pro-pipeta, una vez realizado esto, se dejaron
los tres cido
acetil Cafena
saliclico
[]

[]

40 ppm

0,249

5 ppm

0,291

60 ppm

0,333

10 ppm

0,552

120
0,609
20 ppm
1,071
ppm
140
0,745
25 ppm
1,329
ppm
matraces en ultrasonido por 10 min para
favorecer la disolucin del compuesto.
Siguiendo, se afor a 100 mL, y
posteriormente, a cada matraz se le tom 10
mL, los cuales fueron introducidos en tubos
falcon para poder ser llevados a la centrfuga
durante 5 minutos. Pasado este tiempo, a
cada tubo se le tom una alcuota de 5 mL, y
se llev a un matraz de aforo de 250 mL,
adicionando 25 mL de HCl (de los clculos
anteriores) y se afor a 250 mL. El medio
cido provedo por el HCl permite que la
cafena aumente su solubilidad y en el caso
del cido acetilsaliclico, evita la ionizacin de
este compuesto.
Paralelamente a este trabajo se midieron las
absorbancias de los blancos de Cafena y de
cido acetilsaliclico, resultados que sern
discutidos ms adelante.
Para concluir con el laboratorio, se midieron
las absorbancias de los triplicados,
obteniendo valores que se escapan de los
rangos aceptados adems de ser muy
dispares, este asunto ser tratado en la
discusin.
5. RESULTADOS Y DISCUSIN

cido
acetil
saliclico

Cafena

[]

[]

5 ppm

0,182

10 ppm

0,295

10 ppm

0,363

20 ppm

0,600

20 ppm

0,727

40 ppm

1,080

25 ppm

0,893

60 ppm

1,646

Resultados
Los valores obtenidos al medir las
absorbancias del cido acetil saliclico y de la
cafena a determinadas longitudes de onda y
concentraciones
se
encuentran
especificadas en la Tabla 1 y 2.

=228 nm

Tabla 1. Absorbancias a 228 nm de cido

acetil saliclico y Cafena.

=273 nm

Tabla 2. Absorbancias a 273 nm de cido

acetil saliclico y Cafena.
Una vez preparada la muestra de
Cafiaspirina se procedi a medir las
absorbancias a 228 y 273 nm en triplicado
obtenindose determinados resultados.
Los resultados obtenidos por nuestro grupo,
se escapan totalmente de los rangos
aceptados adems de ser muy dispares,
asunto que ser tratado debidamente en la
discusin.
Para propsitos de clculos, se utilizaron las
absorbancias obtenidas por otro grupo, las
cuales se encuentran tabuladas en la Tabla
3.
Rplica
solucin
muestra

=228 nm

=273 nm

1
0,833
0,212
2
0,824
0,206
3
0,836
0,208
Tabla 3. Absorbancias obtenidas al medir la
absorbancia de la muestra de Cafiaspirina.
El concepto de absorbancias aditivas nos
seala que la absorbancia total es igual a la
sumatoria de las absorbancias de cada
componente.
La ecuacin utilizada para calcular las
absorbancias aditivas en este caso fue la
siguiente:

A228= caf * b * Ccaf + AAS * b * CAAS

Los clculos correspondientes de las

absorbancias
aditivas
se
encuentran
detallados en el Anexo 1.

0,065 g
El anlisis
siguiente:

Masa de cido acetil

saliclico
0,7024 g

estadstico

realizado

Discusin
Como se seal, las absorbancias originales
obtenidas por nuestro grupo fueron muy
dispersas y muy por debajo de los esperado,
hacindonos suponer que al realizar los
clculos con ellas obtendramos resultados
errneos y no comparables con los valores
reales, motivo por el cual ocupamos
absorbancias obtenidas por otro equipo.
El que obtuviramos absorbancias errneas
pudo deberse a:

A273= caf * b * Ccaf + AAS * b * CAAS

Masa de Cafena

273 nm. El valor de coeficiente de variacin

nos permite comparar dispersiones entre dos
distribuciones distintas, mientras mayor sea,
ms dispersos son los datos, por lo que los
valores de absorbancias a 273 nm son ms
dispersos que a 228 nm.

fue

el

Rplica
=228 nm
=273 nm
solucin
muestra
1
0,833
0,212
2
0,824
0,206
3
0,836
0,208
= 6,245 10-3 = 3,055 10-3
= 0,831
= 0,209

Al realizar los clculos, los valores tanto de

cafena como de cido acetil saliclico,
contenido
en
la
Cafiaspirina
son
significativamente
mayores
que
los
declarados por el fabricante, los que nos
conduce a pensar que el procedimiento no
fue realizado de la manera adecuada ya que:

El coeficiente de variacin se calcul con la

siguiente frmula:

CV =

Obtenindose como resultado de coeficiente

de variacin 7,52 10-3 a 228 nm y 0,015 a

La
mala
manipulacin
del
espectrofotmetro por parte de los
estudiantes, pudiendo significar que
una mala manipulacin de este
significara la descalibracin del
aparato y consigo la obtencin de
absorbancias errneas.
Al tomar la alcuota una vez
centrifugada la solucin/suspensin,
no se tomar del sobrenadante si no
que del fondo, lo que pudo conllevar
a que la porcin tomada tuviera gran
cantidad de excipientes alterando la
absorbancia.

Segn el manual de laboratorio

entregado, los patrones deban ser
preparados de manera tal que sus
absorbancias deban mantenerse
dentro de rango de menor error
fotomtrico 0,2 - 0,8 UA. De las
absorbancias obtenidas, algunas
superan con creces esos valores
mientras que otras se encuentran
bajo el rango por lo que podramos
sealar que un patrn mal preparado

nos pudiera conducir a valores no tan

correctos de absorbancias.
La presencia de excipientes tambin
pudo influir en que la masa tanto de
cido acetil saliclico como de
cafena aumentaran.
La sonicacin no hubiera sido
suficiente para la correcta agitacin
de las partculas por lo que pudieron
haber
quedado
partculas
no
disueltas lo que hubiera alterado las
absorbancias obtenidas

6. CONCLUSIONES:

Se nos instruy en la utilizacin del

espectrofotmetro UV-Vis, pudiendo
realizar la medicin de los patrones
de AAS y Cafena, bajo la
supervisin de los ayudantes, y la
posterior
medicin
de
las
absorbancias de los triplicados.
Al
obtener
absorbancias
tan
dispersar y fuera de rango en las
soluciones patrn, se estima que o
bien
no
fueron
medidas
correctamente, o no fueron hechas
correctamente, debido a que se nos
inform que de un da a otro los
valores
de
las
absorbancias
cambiaron.
Los valores obtenidos de las
absorbancias de los triplicados no
fueron las correctas debido a que en
un principio no se pes la cantidad
correcta que se debi haber pesado,
y por las razones inferidas descritas
en las discusiones.

7. REFERENCIAS
[1] ABRIL DIAZ Nieves. Departamento de
bioqumica y Biologa molecular, Campus
universitario
Rabanales,
Facultad
de
Medicina,
Argentina,
Crdoba.
Espectrofotometra: espectros de absorcin
y
cuantificacin
colorimtrica
de
biomolecular En: [en lnea]: [fecha de
consulta: 10 Mayo 2014]. Disponible en:
<http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR
%C3%8DA.pdf>
[2] Farmacias ahumadas S.A. Producto
Cafiaspirina en comprimidos [en lnea] [fecha
de consulta: 10 Mayo 2014].Disponible en:
<http://www.farmaciasahumada.cl/fasaonline/
fasa/MFT/PRODUCTO/P884.HTM>
[3] SIERRA I., MORANTE S. y PEREZ D.
2007. Experimentacin en qumica analtica.
Librera-Editorial Dykinson. 164 p.
[4] Iniciativa para la coherencia global.
Drogas, Cafena
[en lnea] [fecha de
consulta: 12 Mayo 2014].Disponible en:
<http://www.mindsurf.net/drogas/cafeina.htm>