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Capitulo 52 CLOSTRIDIUM Graciela Carloni GENERALIDADES El género Clostriinm comprenée un conjunto de microor- anistnes my diftdido en ln naturaleza,cuyo habitat puede ser el suelo os sedimentos marinos lacustes, las pastas os vegetles en deseamposicion y el tracto digestivo de diversas especies tnimales. Se ica taxondémicamentedento de familia Closiriizceae Enel Mana! de Taxcnomis Miobiana de Bergey se desriben aproximadaraente nas SDespecis de las cuales un gran mera no son palogenas. Algunas tienen importancia en tecnologia de alimentos y en salud plblica. Otras son agentes etioldgicos de ddeterninadss enfermedades de os animate, importantes por st repercusén econdmica et as expotaciones agropecuarias,y otras responsables de seversputologias en humanos. Aproximadamen- te unas 20 especies se consideran patbgenas © han sido aisadas 4 partir de caso clnicos en huranos o en animales Debido a su ubicuidad ecolgica yal hecho de que algunas especies del gensrointegran la microbiota residente de especies animales s los reconate en muchos casos como causantes de afecciones endégenas y como contaminantet ocasionales en algunos materiales clinios. En los aniisles domestios los clostrdios se comporsan, en te mayoria dels casos, como causants primarios de enfermedad ya que rara vez actin como invasores secundarios Este ginere comprende un mimero importante y heterogéneo de especies de bacilosarampositivos, con capacidad de esporels cid. anaerobes, con actividad fermentativa sobre carbobidratos {no productores de extalasa La mayoria son moviles por presencia de flagelos peritrics y algunas especies poseen ia pro- piedad de claboraedpsula Estes ma defnicién practca, usada { aceptaa generalmente por ls mayoria de los bactendlogos. Carecen de las enzimas catalase y peroxidasa que en otros sistemas biolégicos protegen dels efetos del deteriora inducido pore axigeno, También carecen de citocom oxidass, enna involucrada en el metabolism aerobo, aunque algunas especies poseen superdxido dismutasa, En le préctica el género Clos tun se diferencia de oto génerosesporuladosacrobios por na Product la enzma catalasa presente en el género Bacilus El térmigo anaerobio agrupa mieroorganismos que generan so energy sinetizan sus compuesios sin uizar oxigen mole- cular com receptor inal de eletones. Los clostridios, ver, demuestran ome singular gaduscin ene sensbiidad a ete ws, pudidndose enconzar ene ells desde especies aerotolerantes basta snacrabias estricts Si ben el contacto con el oxigeno resulta lal pars ls micro- organismos anaerobios en el caso de fs costidios ls capacidad de formar espora asegura su sobrevivencia ydiseminacién enel ‘medio, Las espoaspresentan unaelevada resistencia los agentes mbientaies la esporulacién se produce con facilidad fuera det hhospedador, va que estas bacteria son altrmente sensibles al oxigeno, Ls cantidad de esporas yl velocidad con que éstas se prodicen difiere segir a especie. Aun en los culvos yovenes, ye seein vitro en fase exponencial de crecimienta como tambign en cl individu infectado, se pueden detectar formes esporuladas TOXINAS Los clostidiosclaboran proteinas con actividad biokiice que som fas responsables d su patogenicidad, denominadas venérica- ‘mente toxinas. En la mayoria de los casos se trata de comaplejos rioleculares con un peso molecular variable ene 22y 600 k, con actividad enzimatica fécilmente exportables al medio. La calidad y Ia cinética de su prodvecion difiren segim Ia, toxins y la especie microbiana. Suclea denominarse toxins ‘mayores 0 menores de acuerdo 8 la importancia que poseen en cads patologia Algunas toxinas se encuentran ligadas 2 estructuras de la pared cellar, en el iaterior de Ia bacteria y se evidencian en la fase final de [a esporslacién, como es el caso dela entetotoxina claborada por alguncs serotipos de C. perjringens. Las toxinas exiracelulares, que constituyen la mayoria de las producidas por este género, atraviesan la pared celular y se vuelean al medio detectindose en su mixima concentraciér durante la fase logarimica de crecimiento, Finalmente, un tecer tipo lo constituyen las toxinas de lo- calizacién protoplasmatica. Estas se acumulan en ef citapiasms y se liberan al medio solamente cuando ocure isis celular. Le temperatura dptims del cultivo para laproduccién de estas toxinas provoplasmticas debe ser menor, ene 30 35°C. Suuejemplos eellas la neurotoxina de C, boruliman, la toxina aft de C.rowyi y ls toxina tetdnica Lasctividad bioligica de las toxinas permite su idemtificacton _ caracterizacion y se puede evidenciar por los efectos produeidas en animales de laboratorioo sobre cultivos de teideso, in vitro, detectando'la degredacién de diferentes sustratos sobte los que sctian como enzima, Poseen actividades enzimiticas capaces de bidrolizar gradualmente varias estructuras celulares eucarioas, desde la membrans citoplasmatica hasia la cromatina nucteer Pueden tener actividad de neuraminidase, coutribuyendo 2 Is ‘unin con las eélulas del hospedsdor, de lipssa fosflipasa lisando ertracitos, de Hiluronidasa, contribuyend a la inve- stin tisular y de desoxirribonucleass (DNAS2), destruyendo le estructura gencunica de Jas células musculares que invade. Ora denominaiias neuretoxinas, se unen areceptores del sisternaner- vioso a nivel de sinapsis neuromuscular, slterendo le fisiologia e Jos miseules estiados. ‘Tambien varian la forma de ingresar y difundirse por el or panismo, Algunas toxinas pueden ingertse preformades en un ‘alimento, como ccurre con Ie toxina boralnies. tras pueden se= absorbidas desde clintestina despus de laproliferecion anormal del microorganismo causal e9 las vias digestivas, hecho que ‘ocurre en la mayoria de fos cuadros de enterotoxemias. Microbiologia veterinaria G. Carton Er oiros casos, coma sucede en el earbunclo sintamatice 0 en las gangrenas gaseosas, as formas vegetaivas del microorganism elaboran las toxinas cuando las esporas germinan en los teidos. Estas toxinas gjereen su acciin en forma local sobre los tejidas lesionadas. se absorben y se difinden produciendo un toxemia -generalizada que induce ia muerte de individu afectado, Por iltimo. otras infecsiones se desarallan con card roduciendo lesiones tisulares de mena importancia, pero co Is elaboracion de potentes tovinss que actian a distancis como {enel tdianos. fa hemoglobinuria hacilar y tambien algunas tipox de enterotoxemias El desarrallo de tas infeceiones clostridiales es el esultago ol efecto combinada de Ia accidn local del micraorganismo dela actividad de las toxinas que elabore En la tabla 52-1 se mencionan las principales especies as de clostidios. i accin de sus toxins y fs via por Ha cual ‘ngresan al onganisma hespedade. GENETICA En el género Clostridium se describe wna concentracién de GC. com un rango entre 22 y 55 mol %, lo que indica una va riedad genomica signficativa coincidente con la biodiversidad ya mencionada [Le simtesis de iastoxinas descritas se encuentra codificada por genes de virulencia que pueden estar ubicados en el DNA ‘cromossmico” ylo “entracromosémico”, en plismidos 0 fagos lisogénicas Un ejemplo tipico de localizaciée “cromosémica” es C difficile. Los genes que codifican para las toxinas A y B de este microorganismo se encuentran contiguos, dentro de una misma regién de su eromosoms, En otras especies se han descrito plésmidos relacionados con esta funcién, como es el caso de la enterotoxina de C. perfringens, 0 en algunas cepas palogenas de C. sordelli y de C. bussricum. Estos genes también pueden estar ubicados en fagos en estado lisogénica como ocurre en C botulinum tipo C 0 en C. texan En la mayorie de los casos estos genes comprenlen se- cuencias ubicidas en regiones correspondientes con isles de patogenicidad, flanqueadas por transposones u otros elementos de insercién. Esto, sumado a fa codificacién en plismidos 0 fa- 0s explicaria los cambios en Ia eapacidad de producir toxinas, detectados con frecuencia en las cepas de laboratorio, Las secuencias cadifcantes de algunas toxinas se han identi- ficado y clonado en especies de clastridios no portadoras de ellas yen oiros microorganismos como E. cali, logrando en ambos casos le produccién de tas mismas, RESISTENCIA, Las formas vegetativas de las clostridins son sensibles « ta smayoria de los agentes fisieos y quimicas pero como ya se men cond la Facilidad de esporula, los paramenas de aplicacin de estos agentes se deben dirigir alas formas esporuladas Como géneto suelen presentar resistencia a sulfamidas, quinolonas, aztreonam y aminogglucésidos pero resultan sens bles la mayoria de los antimicrobianas de uso en chinice pars bacterias anaerobias grampositivas, como penieiina y evivados, tetraciclina, vancomicina, clindamicina y metronidazo!. En vetesinaria se emplea peniciline G siendo la droga de eleccién por su eficaci, facitidad de manejo y cosie. Le informacién sobte la resistencia & antimicrobianos de la eepas de clostridios sisladas a partir de animales en Argentina es eseusa y no se cita resistencia a penicilina en ells, La fiteratura internacional describe nes de resistencia {etraciclina (ce), aeritromicina (erm) y 2 cloranfenicl (cat) en C porfringens yen C. dficle vIn posibilidad de su transnisibn ‘otras especies, PREVENCION La ubicuidad de estos microorganisms y 1a residencia en deteminados (ractos 0 aperatos eu muchas especies animales, implican que su erradicacion sea pricticamente imposible. Se deben adoptar medidas de manejo y programas de inmunizacién, activa para prevenir las diversas enfermedades que producen, tanto en los animales como en el hombre, Por el sistema y las condiciones de la cria del gansdo en Argentina las especies microbianas que presentan mayor impor- tancia son C. chawwoet. C.septicum, C. haemolyticum, C.novyt C perfringens, C.tetani y C. botulinum, Este perfil endémico se cepite en el resto de los paises de ‘América y en Sudafrica, Australia, Nueva Zelanda, regiones con condiciones de explotacién ganadera similares a ta Repiblica ‘Argentina y en menor escals, por razones de dimensin teritorial, ‘eaJapéin. Eldenominador eomuisce ests paises es un predomtnio de la cria extensiva de ganado, En Europa, porel contrario, en otras zonas donde se desarro- lian sistemas de cra intensivos, las mayoresincidencias se encten- tran en las enterotoxemias por C. perfringenc y C.sordelli El erapleo de vacunas miltiples a partir de cultivos de dife- rentes especies de clostridios se ha convertide en una prictice habitual en produccién animal. Estas vacunss, debidamente claboradas resultan sumamente eficaces y son recomendables justficando ta inversin que su empleo representa Tabla $2-1. Clostridias patogenos de animales y su accion Microorganismo Via de entrada Toxina Sitia de produccién Sitio de accién bonutinum Oral Fuera del hospedador ‘Sistema nervioso © terani Hevidas Heridas Sistema nervioso C chawoet Oratueridas Masas musculares profimdas Miiseulo C perfringens Oratheridas Investinoimisculos Epiteliointestinalimiscalo C.septicun Heridas Heridas Misculo C haemoisticum —— Oral Rien Ritén/Sisioma nerviess nowy Heridas Subeutineo y miseulo Subcuténeo y miseulo C sordelli Oraltheridas Intestinotejidos Intestinohejides NO. Stanchi y cok DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Debide « fa ubicuidad ambiental de estos mieroorganicmos yysisus exigencias de cultiva, se deben seguir determinadas pau- de diagndstico para no idemtficar especies invasoras como entesetiolégicas primarios y, por el contraio, para a0 perder aquellas de cultive difcuitoso © extremedamente lbiles por la accién del oxigeno ambiental Las muestras pars aistamienty y para deteccion de toxinas se

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