RELATRIO DE AULA PRTICA PCR (LATEX)

O fundamento bsico das tcnicas de aglutinao similar ao princpio das tcnicas

que se utilizam do conceito de precipitao. No entanto, a reao de aglutinao baseia-se na
capacidade do anticorpo se ligar ao antgeno presente em uma superfcie de grande partcula
de tal forma que leva a uma alterao do estado fisco do antgeno que denominada interao
secundria.
A interao secundria pode ser identificada de diferentes maneiras como, por
exemplo, quando o antgeno est presente em uma superfcie de uma partcula grande como
uma bactria, fungos, ltex ou um eritrcito; os anticorpos, uma vez ligados, levam estas
partculas se agruparem de modo visvel num fenmeno conhecido como aglutinao.
OBJETIVO
Apresentar aos alunos a tcnica usada no pcr, o processo de diluies e as reaes de
aglutinao e compreender seu significado clnico.
MATERIAL E METDOS
Amostra de soro
Pipeta de 20 l
Pipeta de 200 l
Kit PCR
Palito para homogeneizar os reagentes
Soluo Fisiolgica
Estante para tubos com amostras
Tubos
O procedimento teve incio com as explicaes da professora sobre as diluies que
seriam necessrias para dar incio a tcnica, 40 l de soluo fisiolgica seria depositada em
seis tubos, 40 l de soro seria depositado no primeiro tubo homogeneizado e 40 l desse tubo
seria depositado no prximo tubo, repetindo esse at o ultimo tubo e descartando a mesma
quantidade.
40 l do reagente pcr seria colocada em duas superfcies da placa de fundo preto, uma
sendo pro controle positivo e a outra pro controle negativo, numa segunda placa de fundo
preto 40 l seria colocado em cada superfcie e 40 l da soluo com soro em cada uma das
superfcies tambm, aps homogeneizar e deixar tudo preparado para leitura e resultados.

RESULTADOS
Na leitura das placas foi perceptvel a aglutinao em escalas diferentes devido as
diluies do soro, um resultado comum na tcnica, foi ento dado o resultado do teste
definido pela diluies que mostrou aglutinao mais aparente.

RESUMO: Testes de tipagem sangunea, ABO, RH e TESTE DE COOMBS

SISTEMA ABO/RH
Com a determinao do tipo sanguneo e do fator Rh possvel avaliar casos de
transfuso de sangue e tambm a eritroblastose fetal quando a me tem RH negativo e o
filho, positivo. Na primeira gravidez, geralmente, no h problema. Na segunda, no entanto, o
sistema imunolgico da me produz anticorpos com mais rapidez e em maior quantidade e o
sangue da me (RH negativo) no contato com o do filho (RH positivo) pode resultar em
aborto.
MTODOS DE TIPAGEM ABO
Na tipagem direta, se ocorrer aglutinao quando as hemcias do paciente forem
misturadas com o anti-soro A, o antgeno A est presente e o sangue tipado como A. Se
ocorrer aglutinao quando as hemcias do paciente forem misturadas com anti-soro B, o
anti-soro B est presente e o sangue tipado como B. Se ocorrer aglutinao em ambas as
misturas, tanto antgenos A e B esto presentes e o sangue tipado como AB. Se no ocorrer
aglutinao em qualquer uma das misturas, no h antgenos presentes e o sangue tipado
como O.
Na tipagem reversa, se ocorrer aglutinao quando as clulas B forem misturadas com
o soro do paciente, existe anti-B presente e o sangue tipado como A. Se a aglutinao
ocorrer quando as clulas A forem misturadas, existe o anti-A e o sangue tipado como B. Se
a aglutinao ocorrer tanto quando clulas A quanto B forem misturadas, existem anti-A e
anti-B e o sangue tipado como O. Se no ocorrer aglutinao quando A e B forem
misturados, nem anti-A nem anti-B est presente, o sangue tipado como AB.
MTODO DE TIPAGEM RH
O sistema Rh classifica o sangue pela presena ou ausncia de antgeno Rho(D) nas
superfcies das hemcias. Neste teste, as hemcias de um paciente so misturadas com um
soro contendo anticorpos anti-Rho(D) e so observadas com relao aglutinao. Se ocorrer
a aglutinao, o antgeno Rho(D) est presente, e o sangue do paciente tipado como Rhpositivo; se no ocorrer a aglutinao, o antgeno est ausente e o sangue do paciente tipado
como Rh-negativo.
Os doadores de sangue em potencial so plenamente testados para excluir a variante
Du do antgeno Rho(D), antes de serem classificados como tendo sangue Rh-negativo. As

pessoas que tm esse antgeno so consideradas doadores Rh-positivos, porm so geralmente

transfundidas como receptores de Rh-negativo.
TESTE DE COOMBS
O soro Anti-IgG (Soro de Coombs) destina-se pesquisa de anticorpos da frao
gamaglobulina humana, quer estejam adsorvidos s hemcias humanas in vivo (Teste de
Coombs Direto), quer estejam livres no plasma, o que se detecta aps adsoro in vitro
(Teste de Coombs Indireto)
COOMBS DIRETO
Este teste empregado na pesquisa de anticorpos (gamaglobulinas) j fixados s
hemcias, como ocorre na Doena Hemoltica do Recm Nascido, Anemia Hemoltica
Adquirida e em pacientes que tenham recebido transfuses incompatveis.
COOMBS INDIRETO
Este teste utilizado na pesquisa de anticorpos bloqueadores (incompletos), os quais se fixam
s hemcias in vitro mas no as aglutinam. Para que a reao seja observada necessria
adio do Soro AntiIgG (Soro de Coombs) ao teste.
O teste de Coombs Indireto realizado nas pesquisas de anticorpos bloqueadores, nas
pesquisas de antgenos (usando o soro classificador apropriado) e nas provas de
compatibilidade, desde que tais reaes no dependam de complemento para a sua deteco.
Nos casos em que a reao pode ser mais bem detectada pela fixao de complemento, devese usar o Soro Anti-Humano (Anti-IgG e AntiC3d) Poliespecfico

CENTRO DE ENSINO PROFISSIONAL GRAZIELA REIS DE SOUSA

ROZIVALDO DA SILVA ARRELIAS

RELATRIO DE AULA PRTICA

MACAP
2015