MICROBIOLOGIA

ADRIANA LUCIA OSORIO GARCIA

LUIS GONZAGA SALGADO SOTO
JOSE GIOVANNY PATIO MEJIA
ALFREDO LOPEZ ORTIZ

TECNOLOGO EN PROCESOS DE ALIMIENTOS

CENTRO PARA LA FORMACIN CAFETERA
SENA
30 DE JULIO DE 2010
MICROBIOLOGIA

INSTRUCTORA:
Bacteriloga
LILIANA CRISTINA LEGARDA ARISMENDI

Interpreta el plan de muestreo de acuerdo con las condiciones y protocolos

establecidos por la empresa. Realiza la toma de muestras de acuerdo con los
instructivos y procedimientos establecidos por la empresa

ADRIANA LUCIA OSORIO GARCIA

LUIS GONZAGA SALGADO SOTO
JOSE GIOVANNY PATIO MEJIA
AFREDO LOPEZ ORTIZ

TECNOLOGO EN PROCESOS DE ALIMIENTOS

CENTRO PARA LA FORMACIN CAFETERA
SENA
30 DE JULIO DE 2010

PRACTICA DE LABORATORIO
ANLISIS DE LECHE
Justificacin:
Con esta prueba vamos a aprender el proceso para realizar siembra por duplicado
y profundidad en la leche, utilizando agares EMB (Eosina azul de metileno) para
enterobacterias, PCA (plata count agar) para mesofilos aerobios, aprender hacer
agua peptonada; a utilizar los equipos y reactivos correspondientes para la
prctica.
Objetivo:

Alistar los equipos para la prctica.

Seguir el desarrollo de la gua para realizar la siembra por profundidad.
Aprender a elaborar el agua peptonada para la prctica de la leche.

PRACTICA DE LABORATORIO
ANLISIS DE LECHE

Se toma leche cruda proveniente del cuarto de refrigeracin en un recipiente de

acero inoxidable

Preparacin del agua peptonada

Para esta prueba en el laboratorio se requiere un pre alistamiento que consiste
en tener siempre como diluyente agua peptonada al 0.1% para el caso de la
prueba se requirieron 117ml + 1g de sal y 1.2g de peptona. = agua peptonada

Tipo de siembra: Por duplicado y profundidad

Este tipo de siembra se realiza para evaluar la proliferacin de microorganismos,
el factor de dilucin es de 1 en 10.

Agares a utilizar:
EMB: (Eosina azul de metileno) para entero bacterias.
El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado para el aislamiento y
diferenciacin de bacilos Gram negativos.

PCA: (plata count agar) para mes filos aerobios.

Es un medio de

crecimiento de uso general para determinar o supervisar

crecimiento bacteriano total de una muestra.

Del agua peptonada el 1% se realizan las dilusiones seriadas, 1/10

En un erlenmeyer se toma 10ml de leche y en los dems solo ira
1ml de la dilucin anterior

LECHE

9ml
AP

9ml
AP

9ml
AP

9ml
AP

En la preparacin de los agares tuvimos en cuenta la cantidad de agar a

preparar, en este caso 2 cajas por cada dilucin m10 -3 m10-4

 Para cada caja de petri se necesitan 20 ml de AP, lo realizamos con el

siguiente procedimiento:
Si para un litro de EMB (enterobacterias) se necesitan 36 gramos para
preparar 4 cajas con agar
Entonces:
36__________ 1000 ml
X __________ 80 ml = 2.8 gramos de EMB para 80 ml de A.D
Si para un litro de PCA ( mesofilos aerobios)se necesitan 23.5 gramos
Entonces:
23.5__________ 1000 ml
X ___________ 80 ml = 1.88 gramos de PCA para 80 ml de A.D
Colocamos un papel filtro en la pesa se tara y se empieza a adicionar el agar
hasta medir la cantidad que necesitamos

 En el erlenmeyer agragamos los 80 ml de agua destilada ms los gramos del

agar, se diluye haciendo un suave movimiento y se lleva a la estufa a

ebullicin.

Luego la llevamos a reposar a la cabina de flujo laminar .

Tomamos las cajas de petri y se marcan con nombre del analista, fecha, tipo
de agar y tipo de muestra analizada

 Se tomo una pipeta y se toma un ml de la dilucin del tubo con m10-4 y la

adicionamos a la caja de petri. Lo mismo se hace con la dilucin m10-3

EMB

Servimos los agares en las cajas de petri

45-50C

entre las cuales contienen

las muestras , teniendo en cuenta el mechero para evitar contaminacin de los

agares y siembras

Homogenizamos la muestra con el agar haciendo 5 movimientos suaves hacia la

derecha, 5 movimientos hacia la izquierda, 5 movimientos arriba- abajo y 5
movimientos de lado a lado.

Cubrimos

la caja de petri con cristaflex , la llevamos a incubar y

colocamos de forma invertida a 37o

la

LECTURA DE RESULTADOS MICROBIOLGICOS

DESCRIPCIN MACROSCPICA

Despus del tiempo de incubacin se debe realizar la lectura macroscpica (color,

textura, borde), la microscpica (morfologa y coloracin) y el conteo de unidades
formadoras de colonias UFC/10ml

RTA=
En las muestras realizada de los agares realizados de EMB y de PCA solo se
desarrollo la lectura macroscpica del agar EMB 10-4 de la cual se observaron
colonias de color amarillo, blanco , rosado , pequeos hongos en crecimiento, se
observan bacterias sin borde definido distribuidas varias formas y tamaos.
Del agar EMB 10-3 no se realizo muestreo presentaba muchos hongos ,en los
agares PCA 10-4 y PCA10-3 se observo que no contena las colonias necesarias
para el conteo y se vio muchas agrupaciones de hongos de la cual nos lleva a una
conclusin de que todas muestras salieron contaminadas por
malos procedimientos efectuados en el laboratorio por eso no se pudieron leer
todas

Este conteo se hace a simple vista pero si el conteo se hace muy difuso de usa el
contador de colonias, se pone en ceros se coloca la caja tapada y se empiezan a
contar la cantidad de colonias.

RTA= En la lectura del contador de colonias se miro el agar EMB-4 en el cual

se contaron 37 COLONIAS dndonos un resultado de= 370000

Nota: La prueba de labortatorio llego hasta este punto

LECTURA DE RESULTADOS MICROBIOLGICOS

DESCRIPCIN MACROSCPICA

Recomendaciones que vamos a tener en cuenta:

Asignar a cada grupo roles para agilizar las pruebas

Evitar el dialogo, ya que dependen los resultados finales por la contaminacion que
se pueda generar
Los equipos de laboratorio utilizados se deben dejar en el mismo orden y estado
que se encuentren.
Tomar el tiempo necesario para evitar incidentes durante el aprendizaje
Estar concentrados a la hora
correspondan a las del grupo.

de marcar

ya precisamente, las lecturas no