A reao da ninhidrina (hidrato de tricetoidrindeno) utilizada para verificar a
presena de aminas em soluo. As classes de substncias que reagem
positivamente a esse teste, so: protenas, peptdeos, aminocidos, aminas primrias e amnia.
Esta reao importante para demonstrar a presena de protenas em
materiais biolgicos e tambm quantific-las, pois o complexo cobre-protena apresenta uma absoro mxima em 545nm. Para que a reao do Biureto seja positiva h a necessidade da presena de pelo menos duas ligaes peptdicas na molcula, portanto, aminocidos e dipeptdeos no reagem positivamente a esse teste. Quando adiciona-se sais neutros ao sistema, h um aumento da fora inica do mesmo. Os ons carregados provenientes da dissociao dos sais passam a interagir com as molculas proticas, diminuindo a interao entre as prprias molculas da protena. Deste modo, observa-se um aumento na solubilidade da protena em meio aquoso. A esse fenmeno d-se o nome de salting-in. Em condies de elevada fora inica, as molculas de gua apresentam maior tendncia de solvatao de partculas (nesse caso, os ons). As molculas de gua, desse modo, interagem mais com os ons, desfazendo suas interaes com a estrutura proteica. Em contrapartida, temos: maiores interaes protena-protena, resultando na diminuio da solubilidade em meio aquoso. A esse fenmeno d-se o nome de salting-out.
Quando em contato com o calor, a protena desnaturada, evidenciada pela
precipitao no meio, pois a mesma se torna insolvel devido as mudanas em sua estrutura. Na presena de metais pesados, as protenas tambm so desnaturadas, reagindo com os ctions metlicos e formando proteinatos insolveis, que portanto, precipitam. A adio de solventes orgnicos tambm desnatura as protenas, causando a precipitao das mesmas.