PRCTICA N.

3
EXTRACCIN EN FASE SLIDA.
SEPARACIN DE COLORANTES
SINTTICOS

OBJETIVOS: Separar una mezcla de colorantes sintticos usados en alimentos, tartrazina y rojo
nmero, por extraccin en fase slida, aplicando los conceptos de cromatografa en fase reversa.
Comprobar la eficiencia de la separacin por medio de la cromatografa en capa fina sobre gel
slice.
RESULTADOS:
Rf Muestra

Rf Problema

tartrazina

0.097

0.097

Rojo n. 3

0.78

0.78

DISCUSIN
Al recolectar los eluatos de la cromatografa en columna y posteriormente realizar cromatografa
en capa fina, nos muestran que el primer componente el eluir fue la tartrazina mientras que al ir
aumentando la polaridad del disolvente, se observ que el segundo componente en eluir fue el
rojo n. 3. Al utilizar cromatografa en fase reversa la fase estacionaria es no polar y la fase mvil
debe ser polar, por lo que el analito ms polar ser el primero en eluir. En cromatografa en capa
fina observamos que el Rf de la tartrazina es cercano a cero, lo que quiere decir que est
interaccionando fuertemente con la fase estacionaria que es polar, mientras que el Rf del rojo n. 3
es de 0.78, esto nos indica que interacciona ms fuertemente con la fase mvil que debe ser de
baja polaridad y por eso el corrimiento es mayor. Por otra parte al observar la placa cromatogrfica
se observa una sola mancha en la aplicacin de tartrazina as como en la mancha de la aplicacin
de rojo n.3, lo que nos indica que se separ con eficiencia la mezcla de colorantes.
CONCLUSIONES

El analito ms polar es la tartrazina mientras que el rojo n. 3 es de menor polaridad.

La extraccin en fase slida nos demuestra que es eficiente para la separacin y
purificacin de muestras.

CUESTIONARIO
1.-Definir los siguientes conceptos eluir, eluyente, eluato, adsorcin, particin, exclusin,
intercambio inico, fluido supercrtico.
ELUIR: desplazar los componentes de una columna por adicin de un disolvente o disolucin.
ELUYENTE: fluido o disolvente que se desplaza a travs de la columna cromatogrfica en una
direccin definida.
ELUATO: Disolucin que sale despus de pasar por la fase estacionaria y que es recolectada
ADSORCIN: Fenmeno de adhesin superficial cuyo mecanismo consisteen interacciones
dipolares.
PARTICIN: Fenmeno de reparto entre las dos fases debido a su solubilidad. La solubilidad es
una medida de polaridad y de otro tipo de interacciones moleculares.
EXCLUSIN: Mecanismo por el cual se separan molculas en virtud de sus diferencias de
tamao.
INTERCAMBIO INICO: Mtodo que permite la separacin de molculas basada en sus
propiedades de carga elctrica. Se compone de dos fases: la fase estacionaria o intercambiador
inico, y la fase mvil. La fase estacionaria insoluble lleva en la superficie cargas electrostticas
fijas, que retienen contraiones mviles que pueden intercambiarse por iones de la fase mvil.
2.- Investigar los nombres, frmulas y propiedades de los colorantes artificiales usados en
alimentos y empleados en la prctica.
Propiedades fsicas
Es poco soluble en agua
Presentado en polvo con color rosa mexicano

Rojo N. 3

C20H5I4Na2O5

Tartrazina

C16H9N4O9S2Na3

Propiedades fsicas y qumicas

Estado fsico: Slido
Color: Blanco
Rotacin ptica (-28.6) (-35.0)
Solubilidades:
Agua Poco soluble
Soluciones alcalinas Soluble
Etanol Muy soluble
Cloroformo Muy soluble
Acetona Muy soluble

3. Discutir en base a las estructuras de los colorantes, el orden de elucin esperado de los mismos
en la cromatografa en columna y en la cromatografa en placa fina.
Comparando las estructuras de los colorantes tartrazina y rojo n.3 se puede decir que la tartrazina
es ms polar por los sustituyentes que posee y el rojo n. 3 es de menor polaridad, por lo que se
espera que al realizar cromatografa en fase reversa la tartrazina sea eluida en primer lugar ya que
al estar presente una fase estacionaria no polar, habr menor interaccin con ella, mientras que en
cromatografa en placa fina se espera que el Rf sea menor ya que habr mayor interaccin con la
fase estacionaria al ser polar. Posteriormente el rojo n.3 deber eluir despus de la tartrazina ya
que es menos polar y tiende a interaccionar con la fase estacionaria que es no polar y en placa
fina esperamos que haya un Rf mayor al de la tartrazina por ser menos polar, ya que habr mayor
interaccin con la fase mvil al ser esta no polar.
4.- Explicar si la relacin de polaridades utilizada para la fase estacionaria y para fase mvil
corresponde a la cromatografa en columna en fase normal o en fase reversa.
La relacin de polaridades que se utiliz corresponde a cromatografa en fase reversa ya que se
tiene una fase estacionaria no polar, mientras que la fase mvil es polar.
5.- Explicar Qu se entiende cuando la columna de cromatografa empacada con gel de slice de
fase reversa lleva en su etiqueta C12 C18?
El material de relleno utilizado para la columna de fase reversa se hace a menudo de gel de slice
modificada con un grupo funcional. El grupo funcional ms frecuentemente utilizado es el
octadecilo. El grupo funcional octadecilo es una cadena recta de 18 carbonos, C12 quiere decir
que fue modificada con una cadena de 12 carbonos.
BIBLIOGRAFA

Baqueiro Quirs, M Mecanismos y aplicaciones de la cromatografa lquida de alto

desempeo 1 edicin, editorial de la universidad de Costa Rica 2004.
Harris C. Daniel, Anlisis qumico cuantitativo 3 edicin, editorial Revert, 2007.