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Nombre Agar Composición Fundamento

Diferencial
o Selectivo
Agar Sal y Fórmula (en gramos por litro) Una alta concentración de sal promueve el crecimiento de algunos organismos mientras
Staphilococcus Manitol inhibe el crecimiento de otros. AMS es un medio diferencial porque contiene el azúcar
Aureus Extracto de carne 1.0 manitol y el indicador de pH rojo de fenol. Los organismos que pueden fermentar el manitol
Pluripeptona 10.0 liberan subproductos ácidos, que causan un cambio de color. El rojo de fenol presenta un
color rojo cereza por arriba de pH 8.5, un color amarillo rojizo desde un pH 6.9 a 8.5, y un
d-Manitol 10.0 amarillo brillante por debajo de un pH de 6.9. Aunque tanto el Staphylococcus epidermidis y
Cloruro de sodio 75.0 Staphylococcus aureus puede tolerar el alto contenido de sal en el AMS, solamente S.
Agar 15.0 aureus puede fermentar el manitol, causando que el rojo de fenol vire al amarillo.
Microorganismos Crecimiento Características de las colonias
Rojo de fenol 0.025
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Excelente Amarilla
Gram (+)
Staphylococcus epidermidis ATCC
Bueno Roja
14990
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido Inhibido
Klebsiella pneumoniae ATCC
Inhibido Inhibido
700603
Agar Fórmula (en gramos por litro) Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp.,
Salmonella spp. Verde Pluripeptona 10.0 En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de
Brillante nitrógeno, vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono
Extracto de levadura 3.0
fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay producción
Cloruro de sodio 5.0 de ácido a partir de la fermentación de azúcares, el cloruro de sodio mantiene el balance
Lactosa osmótico, y el verde brillante actúa como agente selectivo.}
10.0
Microorganismos Características de las colonias
Sacarosa Escherichia coli ATCC 25922 Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento
10.0
Rosas, blancas o transparentes sobre fondo
Rojo fenol Salmonella enteritidis ATCC 13076
Gram (-) 0.08 rojo
Salmonella typhi Crecimiento inhibido
Rosas, blancas o transparentes sobre fondo
Salmonella typhimurium ATCC 14028
rojo
Shigella flexneri. ATCC 12022 Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento inhibido
Agar de Fórmula (en gramos por litro) Es un medio de cultivo que contiene una mezcla de sales en la cual, el acetato de sodio es
Escherichia Coli Acetato Acetato de sodio 2.0 la única fuente de carbono. No posee azúcares ni tampoco inhibidores del crecimiento
Sulfato de magnesio 0.2 bacteriano
Un microorganismo que es capaz de usar acetato como su única fuente de carbono, utiliza
Cloruro de sodio 5.0
también las sales de amonio como su única fuente de nitrógeno. Debido a la utilización de
Fosfato de amonio 1.0 sales de amonio, se libera amoníaco, que alcaliniza el medio, y esto produce un viraje del
Fosfato dipotásico 1.0 indicador azul de bromotimol del color verde al color azul.
Azul de bromotimol 0.08 La mayoría de las enterobacterias utilizan el acetato como única fuente de carbono, excepto
Gram (-) Agar 14.8 Shigella spp., Proteus spp., y Providencia spp.
Escherichia coli y Shigella spp., son enterobacterias que presentan gran homología entre sí,
y este medio de cultivo es útil para diferenciarlas, especialmente a Escherichia coli,biotipo
A-D, inmóvil, anaerogénico, de Shigella spp.
Microorganismos Crecimiento Apariencia
E. coli ATCC 25922 Bueno a excelente Azul
K. pneumoniae ATCC 700603 Bueno a excelente Azul
S. typhimurium ATCC 14028 Bueno a excelente Azul
S. flexneri ATCC 12022 Pobre a bueno Verde
Agar Yema Fórmula (en gramos por litro) En el medio de cultivo, el contenido de peptona es bajo (0.1%), y la adición de piruvato de
Bacillus subtilis de Huevo Manitol 10.0 sodio y emulsión de yema de huevo mejora el aislamiento y esporulación de esta bacteria.
o Agar Para verificar la utilización del manitol, se usa un indicador de pH, azul de bromotimol. Este
Cloruro de sodio 2.0
Selectivo medio es selectivo, por el agregado del suplemento para Bacillus cereus (código B03-606-
B.cereus Sulfato de magnesio 0.1 32) con el que se obtiene una concentración final de 100 U de Polimixina B por ml de
Fosfato disódico 2.5 medio.El diagnóstico primario se basa en la morfología y color de la colonia, en la
Fosfato monopotásico 0.25 precipitación de la lecitina hidrolizada y en la falta de utilización del manitol por Bacillus
Azul de bromotimol 0.12 cereus.
Piruvato de sodio 10.0 Las colonias típicas de B. cereus son crenadas, filamentosas de aproximadamente 5 mm de
Agar 14.0 diámetro a las 24 horas de incubación, y tienen un color turquesa (peacock blue) rodeado
por un precipitado de hidrólisis de yema de huevo. A las 48 horas de incubación presentan
Gram (+)
el color con centro grisáceo.
Estos hallazgos diferencian B. cereus de B. subtilis y B. licheniformis, pero pueden no
diferenciar B. cereus de otras especies de Bacillus, tales como B. thuringiensis, B. anthracis,
B. mycoides, y en estos casos, será necesario realizar mas ensayos para su identificación.

Microorganismos Crecimiento
Bacillus cereus ATCC 10876 Bueno
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Bueno
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido
Bacillus subtilis ATCC 6633 Bueno,
Agar Fórmula (en gramos por litro) Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp.,
Klebsiella Verde Pluripeptona 10.0 En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de
pneumonae Brillante nitrógeno, vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono
Extracto de levadura 3.0
fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay producción
Cloruro de sodio 5.0 de ácido a partir de la fermentación de azúcares, el cloruro de sodio mantiene el balance
Lactosa osmótico, y el verde brillante actúa como agente selectivo.}
10.0
Microorganismos Características de las colonias
Sacarosa Rosas, blancas o transparentes sobre fondo
10.0 Salmonella typhimurium ATCC 14028
rojo
Rojo fenol Klebsiella pneumonae ATCC 13883 Colonias mucoides amarillas
0.08
Gram (-) a verdes.
Shigella flexneri. ATCC 12022 Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Crecimiento inhibido
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
Shigella Flexneri Agar Mac Fórmula (en gramos por litro) La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo
Conkey Pluripeptona 5.0 de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del
Extracto de Proteus spp.
5.0 Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a
carne
partir del tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces
Lactosa 10.0
de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose
Mezcla de sales colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
8.5
biliares Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en
Gram (-)
Citrato de sodio 8.5 el medio de cultivo, y producen colonias transparentes.. La producción de ácido sulfhídrico
Tiosulfato de se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro.
8.5
sodio Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito
Citrato férrico 1.0 caldo (B02-120-05).
Agar 13.5 Microorganismos Colonias
Verde brillante 0.00033 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro
Rojo neutro 0.025 Shigella flexneri Incoloras
Shigella sonnei Incoloras
Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro
Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento
Fórmula (en gramos por litro) El medio de cultivo eosina y azul de metileno agar es selectivo y diferencial para el
Enterobacter Agar Agar 13.5 g aislamiento de bacilos entéricos que permite una diferenciación entre las colonias de
cloacae Eosina Azul de 0.065 g organismos fermentadores
Azul de metileno de lactosa y aquellos que no la fermentan. La presencia de sacarosa permite para ciertos
Metileno miembros del grupo coliforme, fermentarla con más facilidad que la lactosa. Las colonias
Eosina Y 0.4 g
lactosa positivas son verdes con brillo metálico o poseen centros oscuros con periferias
Fosfato 2.0 g transparentes incoloras ,
dipotásico mientras que aquellas que son negativas en lactosa o sacarosa son rosa pálido
Lactosa 5.0 g translucidas.
Peptonas 10.0 g
Gram (-)
Sacarosa 5.0 g Microorganismos Crecimiento
Colonias medianas azul a morado con
Escherichia coli ATCC 25922
brillo metálico verdoso.
Colonias grandes con centro oscuro y
Enterobacter aerogenes ATCC 13048 o
bordes
Enterobacter cloacae ATCC 13047
rosados, generalmente sin brillo metálico
Salmonella typhimurium ATCC 14028 o Colonias medianas transparentes ,
Shigella flexneri ATCC 12022 ó 9199 incoloras a rosa
Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes o rosadas
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Colonias mucosas rosadas- purpuras
Staphylococcus aureus ATCC 25923 o
Inhibición total o colonias puntiformes
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Fórmula (en gramos por litro) Leuconostoc se desarrolla bien en placas de agar sangre, es de forma esférica o lenticular y
Leuconostoc Infusión de músculo de mide de 0,5 a 0,7 µ de ancho por 0,7 a 1 µ de longitud. La temperatura óptima para su
375.0 desarrollo es entre 20 y 30º C, con un pH entre 4,4 y 5. En la superficie del agar son a-
corazón
Peptona 10.0 hemolíticas o no hemolítica, por lo que puede confundirse con otros Streptococcus grupo
viridans -razón por la que el laboratorio evaluó resistencia a vancomicina por difusión-,
Cloruro de sodio 5.0
Agar Enterococcus o Lactococcus sp. El 30% de estas bacterias pueden reaccionar con
Sangre Agar 15.0 antisueros contra grupo D .
2,8

Gram (+)

Proteus mirabilis Agar Fórmula (en gramos por litro) La presencia de sulfito de bismuto y de verde brillante inhiben el crecimiento de bacterias
Sulfito de Agar 20.0 g Gram positivas y de la mayoría de las bacterias Gram negativas. La producción de sulfuro
Bismuto Dextrosa 5.0 g de
hidrógeno se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro
Extracto de 5.0 g
grisáceo con brillo metálico por la reacción de los iones bismuto con el sulfuro de
carne
hidrógeno.
Fosfato de 4.0 g
Microorganismos Crecimiento
Gram (-) sodio
Colonias con centro negro y bordes
Peptonas 10.0 g
Salmonella typhi ATCC 19430 claros, a las 48 h con halo negro
Sulfato ferroso 0.3 g grisáceo y brillo metálico.
Sulfito de 8.0 g Salmonella enteritidis ATCC 13076 Colonias negras a verdes
bismuto
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Colonias negras a verdes.
(indicador)
Colonias pequeñas sin
Proteus mirabilis ATCC 12453 Swarming (crecimiento en
olas) verde pálido a veces mucoides
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento inhibido o colonias verdes
Agar CNI Fórmula (en gramos por litro) Varios antibióticos (Suplemento selectivo para Yersinia (CIN) así como el Violeta cristal y el
Yersinia Peptona de caseina 10.0 desoxicolato inhiben ampliamente la flora acompañante perturbante.
enterocolitica Por otra parte, una base nutritiva de alto valor favorece, conjuntamente con el piruvato, el
Peptona de carne 10.0
crecimiento de las Yersinias. Éstas degradan el manitol existente formando ácido, de tal
Extracto de levadura 2.0 forma, que sus colonias toman un color rojo debido al viraje del indicador Rojo neutro.
Manitol 20.0 Las Yersinias crecen como colonias con un centro rojo oscuro y un halo transparente. El
Cloruro de sodio 1.0 tamaño de las colonias, la anchura del borde de las mismas y la estructura superficial,
Sulfato de magnesio 0.01 pueden variar dependiendo del serotipo.
Piruvato de sodio 2-0 Ciertos gérmenes acompañantes (por ejemplo algunas Enterobacteriáceas y Pseudomonas)
Gram (-) Agar 12.5 también pueden aparecer en el medio pero con un crecimiento escaso.
Mezcla de sales biliares 1 Microorganismos Crecimiento Centro rojo en las colonias
Rojo Neutro 0.03 Yersinia enterocolitica ATCC 9610 Bueno/muy bueno Positivo
Cristal violeta 0.001 Yersinia enterocolitica ATCC 35669
Escherichia coli ATCC 25922 Nulo

Salmonella typhimurium ATCC 14028 Nulo

Enterobacter cloacae ATCC 13047 Nulo/ligero

Staphylococcus aureus ATCC 25923 Nulo

Fórmula (en gramos por litro) Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, esta dada por las sales
Diferenciación Agar Pluripeptona 10.0 biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Grampositivas, de la
Salmonella y Salmonella mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteusspp.
Shiguella Shiguella Extracto de carne 5.0 Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a
Lactosa 10.0 partir del tiosulfato de sodio
Mezcla de sales 8.5
biliares
Citrato de sodio 8.5
NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y distribuir unos
Tiosulfato de sodio 8.5
20 ml por placa. Secar la superficie del medio unos minutos en la
Citrato férrico 1.0
Agar 13.5
estufa.
Verde brillante 0.00033
Rojo neutro 0.025
Microorganismos Características de las colonias
Escherichia coli ATCC 25922 Cremiento de colonias rosadas o rojas
Klebsiella Pneumonae ATCC 700603 Colonias rosadas cremosas y mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Colonias Transparentes, centro negro
Shigella flexneri. ATCC 12022 Colonias Transparentes
Proteus mirabilis Colonias Transparentes, centro negro
Diferenciación de Agar TSI Fórmula (en gramos por litro) El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el
+3
Enterobacterias (Triple Agar 20.0 g sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe los cuales se combinan con el ácido
Sugar - Dextrosa 5.0 g sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro.
Iron) El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Extracto de 5.0 g
Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador
carne
rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido.
Fosfato de 4.0 g
sodio
El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el que reacciona luego con una sal
Peptonas 10.0 g
de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Sulfato ferroso 0.3 g
Sulfito de 8.0 g
bismuto
(indicador)
Tubo Microorganismo
Tubo 1 Sin inoculo
Tubo 2 Escherichia coli
Tubo 3 Enterobacter cloacae
Tubo 4 Klebsiella pneumonae
Tubo 5 Pseudomona aeruginosa
Tubo 6 Shalmonella Thyphi
Tubo 7 Shiguella sonnei

Bibliografia Consultada

http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/sangreagarbase.htm

http://www.articlearchives.com/manufacturing/food-mfg-dairy-product-cheese/1294421-1.html

http://www.biol.unlp.edu.ar/microbiologiagral/problemas01-08.doc

http://tegra.lasalle.edu.co/dspace/bitstream/10185/1222/1/13961076.pdf

http://80.37.246.49/ScharlabDades/Productos/descargarpdf.php?pag=38&pm=803

http://www.alimentariaonline.com/apadmin/img/upload/MLC006_quesoprobioWSF.pdf

http://www.farmacopea.org.mx/consulta/dispmed/DMD016.pdf

http://www.farmacopea.org.mx/consulta/dispmed/DMD016.pdf
Hecho por:

Guillermo Mercado Torres

Orlando Fabrizio Delgado Mota

Antonio Dominguez Garza

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