FACULTAD DE INGENIERA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE

INGENIERA AGROINDUSTRIAL Y
COMERCIO EXTERIOR

ALUMNO:
Arie Vaisman Gonzlez

PROFESORA:
Sandra Pagador Flores

CICLO:
V Ciclo
TEMA:
Laboratorio N 12

AO:

TRUJILLO-PER
2015

LABORATORIO N12: ANLISIS DE PIGMENTO POR CROMATOGRAFA

I.

OBJETIVOS

Separar pigmentos por cromatografa. Determinar el Rf de cada

pigmento.
II.

FUNDAMENTO

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores:

clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y
xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones. Todas estas
sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes
apelares, lo que permite su separacin cuando una solucin de las
mismas asciende por capilaridad a travs de una tira de papel poroso
(papel de cromatografa o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una
pelcula de un disolvente orgnico (etanol), ya que las ms solubles se
desplazarn a mayor velocidad, pues acompaarn fcilmente al
disolvente a medida que ste asciende. Las menos solubles avanzarn
menos en la tira de papel de filtro.
III.

MATERIALES y METODOS

Materiales
- Hierba buena
- 4 Morteros
- 4 cuchillos
- 4 tablas de picar
- 4 embudos
- 4 beakers 250 mL
- 4 tubos de ensayo
- gradilla
- 4 pipetas 5 mL
- 4 goteros
- Papel de filtro.
- 500 mL Alcohol etlico
- 500 mL Acetona
- 2 L Agua destilada
- 4 pizetas

Mtodos
Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las
nerviaciones ms gruesas, junto con 10 o 15 cm3 de etanol. Triturar sin
golpear hasta que el lquido adquiera una coloracin verde intensa
(utilizar campana de gases a lo largo de toda la prctica). Filtrar en un
embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente
con 2 o 3 cm3 de solucin de pigmentos). Colocar en un vaso precipitado
10 mL de etanol. Cortar una tira de papel de filtro de unos 7 cm, de
ancho y unos 10 a 15 cm, de altura.
Poner con el capilar en el papel de cromatografa entre 5 y 10 gotas de
solucin de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya
secndose el etanol y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se
pondrn siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lpiz),
situado a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel. Colocar el
papel en el beaker y fijar el papel, tapar con una placa petri. Esperar
unos 30 minutos y observar. Sacar el cromatograma y secar. Marcar los
compuestos y calcular el Rf de cada uno. Una vez concluido el
cromatograma, realizarlo con otros pigmentos vegetales.

IV.

RESULTADOS Y DISCUSION