MTODOS NO ESPECTROSCPICOS

POLARIMETRA:
La polarimetra es la medicin de la rotacin angular de las sustancias pticamente activas en un
plano de luz polarizada. En la prctica la polarimetra es un mtodo para la determinacin de la
concentracin de soluciones, muy empleado en las industrias qumica y alimenticia, y
especialmente en la industria azucarera. El ente internacional que dicta las normativas para la
industria qumica y alimenticia es ICUMSA, (del ingls International Comitee of Uniform
Methods for Sugar Analises, Comit Internacional para la Unificacin de Mtodos para Anlisis
de Azcar), la OIML refiere a ICUMSA para las normas y parmetros.
APLICACIONES:
1. Los laboratorios industriales y los tcnicos con conocimientos y experiencia variada con la
tcnica usan los polarmetros para muchos fines. En algunas aplicaciones de control de calidad
hasta la investigacin fundamental de estructuras qumicas complejas.
2. A travs de esta medida se puede hallar la concentracin, contenido y pureza de la sustancia.
La polarimetra es empleada en control de calidad, control de procesos e investigacin
farmacutica y qumica, en aceites esenciales, saborizantes e industria alimenticia. Y en la
separacin de ismeros pticos.
3. En el campo del control de calidad y control de procesos la polarimetra se usa ms en las
diferentes ramas como la farmacutica (aminocidos, analgsicos, cocana, dextrosa, codena,
antibiticos), alimentacin (carbohidratos, glucosa, maltosa, monosacridos naturales), qumica
(biopolmeros, polmeros sintticos, polmeros naturales), etc.
4. Una aplicacin especfica de la polarimetra es la sacarimetra, la cual permite determinar la
rotacin molecular de las soluciones de azcares.
5. Dentro de la investigacin, el uso de la polarimetra es frecuente para el aislamiento de
cristalizados, para evaluar y caracterizar compuestos pticamente activos, para las reacciones
cinticas y para la monitorizacin y cambios de concentracin.

EJEMPLO PRCTICO:

CARACTERIZACIN DE ISMEROS PTICOS POR POLARIMETRA

Objetivo:
Caracterizar los diastereoismeros puros del complejo [Co(en)3]3 . I3 previamente sintetizado
por medio de la medicin de su actividad ptica usando un polarmetro.

Mtodo:
Primero se llena el tubo del polarmetro con agua destilada y se determina el cero del
polarmetro. Luego se pesan 10.0 g del [Co(en)3]3 . I3 y se disuelven en agua destilada en un
matraz aforado de 25 mL. Para disolver al complejo se puede usar un vibrador ultrasnico o
calentar. Se llena el tubo con la disolucin problema y se lee en el instrumento la rotacin en
grados, sabiendo la concentracin en g/100 mL se puede calcular la rotacin especfica a la
longitud de onda y temperatura usadas usando la ecuacin bsica de la polarimetra.

DISPERSIN PTICA ROTATORIA

Es la rotacin de la polarizacin lineal de la luz cuando viaja a travs de ciertos
materiales. Suele ser un fenmeno que ocurre en soluciones que presentan molculas
quirales tales como la sacarosa (azcar), slidos con planos cristalinos rotados, tales
como el cuarzo, y la polarizacin circular de gases atmicos o moleculares. Se emplea
en la industria de elaboracin de azcar para medir en los siropes la concentracin de
azcares, en ptica para manipular la polarizacin, en qumica para caracterizar
sustancias en solucin acuosa, y en medicina est siendo evaluado en la actualidad
como un mtodo de determinacin de la concentracin de azcar en sangre en casos de
personas que sufren la diabetes.

REFRACTOMETRA
Se denomina refractometra, al mtodo ptico de determinar la velocidad de
propagacin de la luz en un medio/compuesto/substancia/cuerpo, la cual se relaciona
directamente con la densidad de este medio/compuesto/substancia/cuerpo. Para emplear
este principio se utiliza la refraccin de la luz, ((la cual es una propiedad fsica
fundamental de cualquier sustancia), y la escala de medicin de este principio se llama
ndice de refraccin, Los refractmetros son los instrumentos que emplean este
principio de refraccin ya sea el de refraccin, (empleando varios prismas), o el de
Angulo crtico, (empleando solo un prisma), y su escala primaria de medicin es el
ndice de refraccin, a partir de la cual se construyen las diferentes escalas especficas,
Brix (azcar), Densidad Especfica, % sal, etc. Los refractmetros se utilizan para medir
en lquidos, slidos y gases, como vidrios o gemas.
APLICACIONES:
En el anlisis de una mezcla sencilla al igual que una la mezcla binaria (por ejemplo la
mezcla alcohol/agua), el mejor mtodo es la refractometra. Las medidas de densidad

son aplicables si el rango de composicin es grande. Las principales utilidades de la

refractometra son:

Confirmacin de la identidad de la sustancia.

Anlisis de muestras y corrientes en proceso
Clculo de propiedades de polmeros tales como el peso molecular, tamao y
forma.
Clculo de propiedades fsicas tales como reflexin y dispersin ptica.

El grado con que una sustancia refracta la luz depende de su concentracin relativa y de
su estructura. Por lo tanto, la refraccin molar y el ndice de refraccin pueden usarse
con fines analticos y fisicoqumicos. Desde el punto de vista analtico, el ndice de
refraccin es un valor caracterstico de cada especie qumica, y podra identificar
lquidos puros desconocidos.
No obstante muchas sustancias tienen ndices de refraccin parecidos, por lo tanto
habra que complementar la informacin con la que proporcionan otras propiedades de
la muestra (densidad, viscosidad, punto de fusin). Una vez conocida la naturaleza del
compuesto, tambin se podra determinar su grado de pureza.
En disoluciones o mezclas se puede conocer la concentracin de un compuesto
mediante curvas de calibracin trazadas a partir de patrones de concentraciones
conocidas, de los que se mide su ndice de refraccin. Desde el punto de vista
fisicoqumico, como los valores del ndice de refraccin y refraccin molar son
indicativos del modo de interaccin de la radiacin con la materia, estas variables tienen
que ser tiles, necesariamente, para investigar propiedades de los compuestos qumicos.
Un ejemplo de aplicaciones es en rea de alimentos. Ciertos lquidos viscosos, con
cierto contenido en slidos, tales como ketchup, mermeladas, zumos, etc.
Un ejemplo es el anlisis continuo de los slidos solubles en el ketchup. Una muestra es
bombeada desde el fondo del depsito, llevada a un refractmetro colocado en lnea y
devuelta despus al depsito. Cuando el producto alcanza la composicin deseada se
descarga y se llena de una nueva carga. Bebidas carbonatadas y otros procesos
industriales, en los que se mide la concentracin de azcar despus de ser carbonatada y
justo antes de envasar. Otras aplicaciones son medidas de las mezclas glicerina-agua,
formaldehido-metanol, procesos en el caucho sinttico, alimentos como caf o t.

INTERFEROMETRA
La interferometra es una tcnica utilizada en astronoma que consiste en combinar la
luz proveniente de diferentes receptores, telescopios o antenas de radio para obtener una
imagen de mayor resolucin. Esta tcnica se utiliza especialmente en radioastronoma,
siendo ms difcil su implementacin en longitudes de onda ms corta (visible). La
principal razn es la mayor precisin mecnica que se requiere al utilizar longitudes de

onda ms corta. En la actualidad hay proyectos ambiciosos de interfermetros pticos

de gran escala combinando los haces de luz de grandes telescopios terrestres, como el
interfermetro Keck en Hawi y el Very Large Telescope Interferometer VLTI en Chile,
mientras que en los observatorios radioastronmicos se encuentran el Very Large Array
(VLA) en EEUU y el Atacama Large Millimiter/submilliter Array (ALMA) en Chile.
En todos los casos el principio fsico utilizado es que dos ondas de luz que coinciden en
fase se amplifican mientras que dos ondas en oposicin de fase se cancelan, existiendo
tambin cualquier combinacin intermedia. Esto permite mediante medicin del grado
de cancelacin o amplificacin de dos haces lser, realizar mediciones de superficies
menores a la longitud de onda.
La interferometra no solo se utiliza en astronoma; existen usos ms comunes como la
medicin de curvatura de lentes y espejos, as como la identificacin de defectos tanto
en su superficie como en su composicin.
Para estas aplicaciones se pueden utilizar diferentes tipos de interfermetros, como el
interfermetro Twyman-Green y el interfermetro de Fizeau, entre muchos otros.
Uno de los primeros usos de la interferometra fue en el famoso experimento de
Michelson y Morley (1887), que demostr la inexistencia del ter, proporcionando las
primeras evidencias experimentales en las que ms tarde se asentara la relatividad
especial. En la actualidad, interfermetros similares al de Michelson se construyen en
grandes instalaciones (vase LIGO o VIRGO) en un intento de detectar ondas
gravitatorias, una consecuencia de la teora de la relatividad general.

APLICACIONES:
EJEMPLOS
1) Interfermetro angular:
Se utiliza un bloque en el que se integran los dos reflectores, que ahora son mviles. El
separador de haz lleva acoplado un prisma a 45 con lo que se consigue que los haces
separados por su diferente frecuencia resultan paralelos y no perpendiculares como el
separador visto con anterioridad.

Figura 1. pticas para medida de ngulos

Un desplazamiento en la direccin del haz provoca un mismo incremento en los
caminos pticos de ambos brazos del interfermetro, pero una inclinacin como la
indicada en la figura 12 determina que el incremento del camino del brazo superior
resulte mayor que el del inferior. As, el instrumento detecta un desplazamiento relativo
proporcional al ngulo girado (para los pequeos valores angulares con los que es
operativo el sistema) y a la distancia que separa los vrtices de los reflectores.
Con las pticas de medidas de ngulos, los interfermetros lser sustituyen
ventajosamente a los clsicos niveles de medida con burbuja en trabajos especficos
como la calibracin de grandes mesas de planitud. Para ello se fija el bloque reflector a
una base de tres patas en las que dos patas, separadas una distancia L, son las patas de
medida. En la mesa de planitud se establece una retcula cuadrangular en la que los
cuadrados elementales tienen lados de longitud L.
El bloque mvil se va desplazando a lo largo de las diferentes ferentes lneas de retcula,
de forma que sus patas de medida siempre se apoyan en los vrtices de cuadrados
elementales. En esencia, se trata de medir la pendiente a de cada tramo, lo que permite
obtener la variacin de altura entre sus extremos
(figura 2).
La altura h respecto de un plano de referencia se obtiene sumando los incrementos de
cada uno de los tramos anteriores del mismo perfil

Figura 2. Esquema para la medicin de planitudes

TURBIDIMETRA Y NEFELOMETRA
La turbidimetra mide la disminucin de la luz transmitida a travs de una suspensin
de partculas utilizando para ello un espectrofotmetro (detector en la misma direccin
del haz de luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que
haya una buena disminucin de la luz transmitida) ejemplo:
Determinacin de protenas totales en suero o en orina (haciendo que las protenas
precipiten con cido sulfosaliclico).
La nefelometra es un mtodo para medir la intensidad de una radiacin dispersa en un
ngulo de 90 C conrespecto a la fuente. Se mide en un espectro fluormetro .Para
determinar la concentracin de analito en este mtodo aplicamos:

APLICACIONES:
Imunoprecipitacin
La imunoprecipitacin cuantificada por turbidimetra o nefelometra se emplea hoy en
los laboratorios de autoinmunidad para determinar el factor reumtide.Tanto en los reactivos como en el suero pueden existir partculas que produzcan una
dispersin de luz no deseada ej. lipoprotenas, quilomicrones Tambin puede interferir
la suciedad. -

La intensidad de la luz dispersada. Las protenas suelen tener un pico de absorcin en el

ultravioleta y los cromgenos del suero entre 400-425nm; por todo ello se suele trabajar
a frecuencias que oscilen entre 320-380nm y 500-600nm.Muy frecuentemente, para
cuantificar protenas concretas, se utilizan anticuerpos que reaccionan con dichas
protenas de la muestra, en este caso se habla de inmuno turbidimetra e inmuno
nefelometra .Cuando se ponen en contacto un Ag y un Ac especfico contra ese
antgeno ambos reaccionan y forman un complejo Ag-Ac. Inicialmente los complejos se
forman rpidamente pero, existe una segunda fase de crecimiento de complejos ms
lenta y, es precisamente en sta fase en laque aparece la dispersin de la luz. As, en la
inmuno turbidimetra e inmuno nefelometra se mide la dispersin de la luz provocada
por los complejos Ag-Ac. En ocasiones los Ac se unen a bolitas de ltex para aumentar
el tamao de los complejos (inmuno-anlisis potenciados).La inmuno precipitacin, se
utilizan partculas de ltex recubiertas con IgG. Existen muchos equipos comerciales
para como analizadores automticos de bioqumica o nefelmetros automticos, y sus
mtodos estn estandarizados con calibradores que se basan en preparaciones
de referencia.
Inmunodifusin radial
En este caso se aade un antisuero especfico a la agarosa que, a su vez, se vierte sobre
placas.Se forman pozos en el gel y se colocan en ellos estndares de protenas y
problemas (antgenos). El antgeno difunde en el gel durante varias horas y va
reaccionando con el Ac. Enla zona de equivalencia se produce un anillo de precipitacin
Inmunodifusin doble o tcnica de Ouchterlony
Se forman pozos en el gel de agarosa, generalmente en patrn de roseta. Se depositan
antisueros especficos en los pozos centrales y los estndares de protenas y los
problemas en los pozos circundantes. Al difundir las muestras en el gel, donde el
anticuerpo y el antgeno alcanzan la equivalencia, se forman bandas de precipitados
insolubles. La posicin y forma dela banda se determinan segn la concentracin del
antgeno y del anticuerpo, y sus tamaos. La distancia de las bandas con respecto al
anticuerpo es directamente proporcional a la cantidad de antgeno presente.

DIFRACCIN: RAYOS X
La difraccin de rayos X puede proporcionar informacin detallada de la estructura
tridimensional en estado slido demuestras cristalinas de compuestos orgnicos,
inorgnicos y rgano metalicos, consistiendo en la descripcin geomtrica en trminos
de distancias y ngulos de enlace, ngulos de torsin, etc. Tambin se puede obtener
informacin sobre empaquetamientos, interacciones intermoleculares, etc.
APLICACIONES DE LA DIFRACCIN DE RAYOS X

Determinacin mineralgica y cristalogrfica de cualquier tipo de material de

tipo cristalino.
Estudios de transformacin de fases en funcin de la temperatura desde 24C
hasta 160C.
Anlisis cuantitativo de fases.
Determinacin de tamao de crista
Determinacin cuantitativa de amorfos en polmeros medianamente cristalinos
Determinacin cuantitativa de elementos en aceros al carbn e inoxidables.
EJEMPLO:

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS :

http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jpn/file/Quimica_de_Coordinacion/8_
Caracterizacion_por_Polarimetria.pdf
http://es.slideshare.net/CalexisIbal/resumen-polarimetria
http://lauraucros.blogspot.pe/2014/10/turbidimetria.html
http://ruc.udc.es/bitstream/2183/10986/1/CC%2057%20art%204.pdf
http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y-Nefelometria#scribd
http://ocw.uniovi.es/pluginfile.php/717/mod_resource/content/1/1C_C11812_A/
contenidos%20en%20pdf%20para%20descargar/18.pdf