Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ingeniera
Escuela de Ingeniera Qumica
Ing. Carlos Wong

PRCTICA NO. 1: USO DEL MICROSCOPIO

Luis Emilio Garcia Laj

2012 13048
Seccin Q
Guatemala, 6 de agosto del 2015

ndice

Introduccin
3
Cuerpo de investigacin
Partes del microscopio

Historia del Microscopio

6
Uso del aceite de inmersin
9
Instrumentos de laboratorio
9
Conclusiones
17
Recomendaciones
18
Bibliografa

19

Introduccin
Dado que la Microbiologa es una ciencia muy amplia, es necesario
establecer los principios que la rigen para un mejor entendimiento de la
misma.

Se

empieza

entonces

con

aspectos

preliminares

para

introducirse al estudio de la microbiologa. Por ejemplo, se da un detalle

de cada una de las partes del microscopio, instrumento esencial en esta
ciencia, ya que permite observar todos aquellos microorganismos que a
simple vista no es posible ver, as como una breve resea histrica de
los

orgenes

del

mismo.

Se

incluyen

tambin

los

instrumentos

comnmente encontrados dentro del laboratorio y su funcin, para llevar

a cabo de forma exitosa todas las prcticas.
Todo esto es de suma importancia debido a que antes de empezar
con cada una de las prcticas, es necesario conocer el equipo con el cul
se estar trabajando y sus funciones. Se hace especial nfasis en el
microscopio, ya que este instrumento requiere aprender a manipular
algunas de sus partes para analizar el microorganismo o cuerpo de la
mejor manera posible. Resulta tambin interesante conocer la historia
del microscopio ya que a lo largo del tiempo, es posible observar cmo
este instrumento ha ido evolucionando para dar cada vez imgenes de
mejor resolucin.

Cuerpo de la investigacin
Partes de un microscopio

Ocular: es el lente situado cerca del ojo del observador (por aqu mira).
Su objetivo es ampliar la imagen del objetivo. Suele tener dos oculares,
por eso se llama binoculares, si solo posee uno, se denomina monocular.
Tubo: se puede acercar o alejar de la preparacin (lo que se desea ver)
por medio de un tornillo macromtrico o de grandes movimientos cuya

funcin es realizar un primer enfoque. El tornillo macromtrico permite

hacer un movimiento rpido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la
platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.
Revlver: posee los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,
cambiar los objetivos. La esfera suele denominarse cabezal y contiene
los sistemas de lentes oculares (monoculares o binoculares, segn
corresponda).
Brazo: es una pieza metlica de forma curvada que puede girar;
sostiene por su extremo superior al tubo ptico y en el inferior lleva
varias piezas importantes.
Platina: es el lugar donde se deposita la preparacin que se desea
observar. Tiene en su centro una abertura circular por la que pasar la
luz del sistema de iluminacin.
Objetivo: es la lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen
de sta determinando las cantidades de aumentos con la que queremos
observar.
Pinzas de sujecin: es una parte mecnica que sirve para sujetar la
preparacin. La mayora de los microscopios modernos poseen las
pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance
longitudinal y transversal de la preparacin.
Condensador: es una lente que concentra los rayos luminosos que
inciden sobre la preparacin. El condensador de la parte de abajo
tambin se denomina foco y es el que dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.

Tornillos de enfoque: macromtrico que aproxima el enfoque y

micromtrico que consigue el enfoque correcto.
Base: es bsicamente la sujecin de todo el microscopio.
Historia del Microscopio
Desde tiempos remotos, los antiguos saban que los espejos curvos y
las esferas de cristal llenas de agua aumentaban el tamao de las
imgenes.

En

las

primeras

dcadas

del

siglo

XVII

se

iniciaron

experiencias con lentes (as llamadas por tener forma de lentejas) a fin
de lograr el mayor aumento posible. Para ello se basaron en otro
instrumento con lentes que obtuvo gran xito, el telescopio, usado por
primera vez con fines astronmicos por Galileo, en 1609. Antes de esta
fecha, los seres vivientes ms pequeos conocidos eran insectos
diminutos. Naturalmente, se daba por sentado que no exista organismo
alguno ms pequeo.
Los instrumentos para aumentar la visin de los objetos, o
microscopios (la palabra griega significa para ver lo pequeo)
comenzaron a usarse progresivamente. Por primera vez la biologa se
ampliaba y extenda gracias a un mecanismo que llevaba el sentido de
la vista humana ms all de sus lmites naturales. As, los naturalistas
podan describir en detalle los pequeos organismos, cosa de otro modo
imposible, y los anatomistas podan descubrir estructuras

hasta

entonces invisibles. Existan dos tipos de microscopios: el sencillo y el

compuesto; el sencillo no era ms que una lente montada, el compuesto
estaba formado por una combinacin de lentes.
Fue as entonces como el microscopio se invent, alrededor de los
aos 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen, en opinin de
6

los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez

por los componentes de la Accademia dei Lincei, una sociedad cientfica
a la que perteneca Galileo y que publicaron un trabajo sobre la
observacin microscpica del aspecto de una abeja. A pesar de todo, las
primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopa
aparecen en los aos 1660 y 1665, cuando Malpighi prueba la teora de
Harvey sobre la circulacin sangunea al observar al microscopio los
capilares sanguneos y Hooke publica su obra Micrographia.
Fue as entonces como a mitad del siglo XVII un comerciante
holands, Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin
propia describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides
y glbulos rojos, atribuyndosele de esta manera los primeros grandes
avances en la ciencia, y en particular en las ciencias biolgicas.
Afortunadamente,

aos

ms

tarde,

gracias

la

invencin

del

microscopio ptico, el hombre pudo tener evidencia del gran mundo que
exista ms all de las lentes y descubrir as un universo inorgnico,
como los cristales de la sal de mesa o las sales de oxalato que se
encuentran en la orina y cuya acumulacin es la causa de los clculos
renales. Asimismo, pudo observar los lentos desplazamientos de un
parsito intestinal, la ameba, lo que tambin ayud a que se quitara la
venda del oscurantismo y dar as los primeros pasos en la ciencia
moderna. Un hecho ms, de entre tantos destacables, fue que gracias al
microscopio ptico algunos qumicos y mdicos, como Louis Pasteur y
Robert Koch, pudieran estudiar las enfermedades que asediaban a la
humanidad. Aunque el microscopio de Leeuwenhoek es simple, logra
aumentos de hasta 480 veces el tamao de los objetos usando una sola
lente, como las lupas, a pesar de su poca complejidad.
El microscopio ptico consta de tres sistemas: mecnico, de
iluminacin y ptico. El sistema mecnico se encarga de dar estabilidad
7

y fuerza a este aparato, as como facilitar su manejo. Su funcin ms

importante consiste en sostener el sistema ptico y variar la distancia
entre las lentes y lo que deseamos observar. La iluminacin se encarga,
como su nombre lo indica, de iluminar lo que se quiere ver. Finalmente,
el sistema ptico aumenta (pticamente) el tamao de las imgenes y
est integrado por lentes de cristal que desvan la luz al pasar a travs
de ellas, concentrndola o dispersndola.
Durante el siglo XVIII el microscopio sufri diversos adelantos
mecnicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso aunque
no se desarrollaron mejoras pticas. Las mejoras ms importantes de la
ptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teora del microscopio
y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopa de inmersin
sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener
aumentos de 2000A principios de los aos 30 se haba alcanzado el
limite terico para los microscopios pticos no consiguiendo estos,
aumentos superiores a 500X o 1000X sin embargo exista un deseo
cientfico de observar los detalles de estructuras celulares (ncleo,
mitocondria... etc.).
As entonces, desde 1660 hasta la actualidad el microscopio ptico
ha sido el pilar fundamental en el conocimiento de lo invisible. Aunque
su poder de resolucin aument a travs del tiempo (con la mejora en la
calidad de las lentes) al igual que el poder de magnificacin, su factor
limitante fue la longitud de onda de la luz. En 1930 el mundo sub
microscpico se ampli con la aparicin del microscopio electrnico cuya
ventaja principal con respecto al microscopio ptico es un aumento de
1000 veces en la magnificacin del material observado acompaado de
una mayor capacidad de resolucin generando una mejor definicin y
una ampliacin del mundo microscpico. ADN, virus y pequeas
organelas fueron observadas por primera vez con este microscopio. La
8

mayora de los pioneros en la microscopa electrnica en biologa siguen

vivos y los ms importantes son: Albert Claude, Don Fawcett, Earnest
Fullam, Charles Leblond, John Luft, George Palade, Daniel Pease y Keith
Porter. Claude y Palade recibieron el Premio Nobel de Medicina en 1974
por sus logros en biologa celular utilizando el microscopio electrnico.
Existen dos tipos bsicos de microscopios electrnicos los cuales
fueron inventados al mismo tiempo pero tienen diferentes usos. El
microscopio electrnico de transmisin (MET) proyecta electrones a
travs de una fina capa de tejido o material a observar produciendo una
imagen en dos dimensiones sobre una pantalla fosforescente. El brillo en
un rea particular de la imagen es proporcional al nmero de electrones
que son transmitidos a travs del material. El microscopio electrnico de
barrido (MEB) produce una imagen que da la impresin de ser en tres
dimensiones. Este microscopio utiliza dos o tres puntos de la muestra
donde llegan los electrones que escanean la superficie del espcimen a
observar y salen del espcimen como electrones secundarios siendo
detectados por un sensor. La imagen se produce como el espcimen
entero, a diferencia del MET donde la imagen corresponde slo a los
electrones transmitidos.
Para qu se emplea el aceite de inmersin?
El aceite de inmersin para microscopa posee aproximadamente el
mismo ndice de refraccin que el vidrio. Mediante el aceite de inmersin
se elimina casi por completo la desviacin de los rayos de luz y se
aumenta de manera considerable la eficacia de los objetivos de los
microscopios. El reactivo debe almacenarse entre 15C y 30C. Despus
de abierto, el contenido es estable hasta la fecha de caducidad indicada
en la etiqueta. Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.
Para

el

procedimiento,

en

la

observacin

al

microscopio

debe

inicialmente enfocarse la correspondiente parte en el preparado de la

9

lmina. Entonces se gira un poco la torre del objetivo. Se agrega una

gota de aceite de inmersin

sobre el rea a observar y se gira a su

posicin original el objetivo de inmersin. Cuando se ha acabado el

proceso de observacin al microscopio, se limpian la lente frontal y el
preparado para eliminar el aceite de inmersin. El microscopio usado
debe cumplir los requisitos de un laboratorio de diagnstico medio. Los
preparados deben estar secos antes de la observacin al microscopio
con aceite de inmersin, es decir, deben dejarse secar bien los
preparados o, si es necesario, montar un cubreobjetos, ya que de lo
contrario la imagen se enturbia.
Instrumentos utilizados dentro del laboratorio
Bandeja:

sirve

para

manipular

productos

peligrosos

dentro

del

laboratorio.

Lupa: es un instrumento utilizado para observar insectos, clulas y sus

estructuras.

10

Pinzas: son utensilios, generalmente de metal, que permiten sujetar

algunos objetos del laboratorio.

Pinzas de crisol: es una herramienta de acero inoxidable y su funcin

es sostener y manipular capsulas de evaporacin, crisoles y otros
objetos. Se utiliza principalmente como medida de seguridad cuando
estos son calentados o poseen algn grado de peligrosidad al
manipularlos directamente.

Balanza: es un instrumento de laboratorio que mide la masa de un

cuerpo o sustancia qumica, utilizando como medio de comparacin la
fuerza de la gravedad que acta sobre el cuerpo.

11

Mechero: se utiliza para calentar, fundir o evaporar sustancias. La

llama del mechero que arde correctamente es transparente y tiene un
matiz azulado.

Gradilla: es un utensilio utilizado para dar soporte a los tubos de

ensayos o tubos de muestras.

Gafas protectoras: es un equipo que debe utilizarse en todo momento,

ya que protege a los ojos de salpicaduras de reactivos qumicos.
12

Probeta: tubo de cristal alargado y graduado, cerrado por un extremo,

usado como recipiente de lquidos o gases, el cual tiene como finalidad
medir el volumen de los mismos.

Tubo

de

ensayo:

este instrumento

soluciones.

13

permite la

preparacin de

Beaker: tambin se le conoce como vaso de precipitados. Su objetivo

principal es contener lquidos o sustancias qumicas diversas de distinto
tipo.

Gotero: se usa para trasvasar pequeas cantidades de lquido

vertindolo gota a gota.

Pipeta: permiten la transferencia de un volumen generalmente no

mayor a 20 ml de un recipiente a otro de forma exacta. Este permite
14

medir alcuotas de lquido con bastante precisin. Suelen ser de vidrio.

Est formado por un tubo transparente que termina en una de sus
puntas de forma cnica, y tiene una graduacin (una serie de marcas
grabadas) indicando distintos volmenes.

Embudo: es una pieza cnica de vidrio o plstico que se utiliza para el

trasvasijado de productos qumicos desde un recipiente a otro. Tambin
es utilizado para realizar filtraciones.

Portaobjetos: Lmina de vidrio rectangular de color transparente

utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas
bajo el microscopio. Para mantener la muestra segura, se utiliza un
cubreobjetos que es colocado sobre la muestra bajo el portaobjeto.

15

Caja de Petri: Recipiente redondo, hecho de vidrio o de plstico, posee

diferentes dimetros, es de fondo bajo, con una cubierta de la misma
forma que la placa, pero un poco ms grande de dimetro, ya que se
puede colocar encima y cerrar el recipiente, como una tapa.

Bistur: cuchillo usado en ciruga y disecciones para cortar tejidos,

rganos y abrir.

Microscopio: es un instrumento que permite observar objetos no

perceptibles a al ojo humano. Esto se logra mediante un sistema ptico
compuesto por lentes, que forman y amplifican la imagen del objeto que
se est observando.

16

Cubreobjetos: es una fina hoja de material transparente de planta

cuadrada o rectangular. Se coloca sobre un objeto que va a ser
observado bajo microscopio, el cual se suele encontrar sobre un
portaobjetos.

Termmetro: es un instrumento utilizado para medir la temperatura

con un alto nivel de exactitud. Puede ser parcial o totalmente inmerso
en la sustancia que se est midiendo. Esta herramienta est conformada
por un tubo largo de vidrio con un bulbo en uno de sus extremos.

Esptula: es una lmina plana angosta que se encuentra adherida a un

mango hecho de madera, plstico o metal. Es utilizada principalmente
para tomar pequeas cantidades de compuestos o sustancias slidas,
especialmente las granulares.

17

Regla: es un instrumento de medicin con forma de plancha delgada y

rectangular que incluye una escala graduada dividida en unidades de
longitud, por ejemplo centmetros o pulgadas; es un instrumento til
para trazar segmentos rectilneos con la ayuda de un bolgrafo o lpiz, y
puede ser rgido, semirrgido o muy flexible, construido de madera,
metal, material plstico, etc.

Conclusiones
1. Es de suma importancia conocer las partes del microscopio para
llevar a cabo una buena ejecucin de este instrumento.
2. El microscopio ha sufrido distintos cambios a lo largo de la historia,
los cuales han ido mejorando la estructura del mismo.
3. El microscopio permiti a la humanidad observar partculas y
cuerpos diminutos que antes no era posible.
18

4. La invencin del microscopio se atribuye a los griegos, ya que ellos

desde ese entonces buscaban la manera de ampliar algunos
objetos a la vista.
5. Dentro del laboratorio existen diversos instrumentos, por lo que es
necesario conocer la funcin de cada uno para llevar a cabo de
forma exitosa los experimentos.

19

Recomendaciones
1. Aprender a utilizar de forma adecuada los tornillos micro y macro
mtricos del microscopio, para tener un mejor enfoque en el
objeto que se est analizando.
2. Portar en todo momento dentro del laboratorio el equipo
respectivo de seguridad para evitar cualquier accidente debido a
salpicaduras, quemaduras, derrames, entre otros.
3. Utilizar

de

manera

cuidadosa

los

instrumentos

dentro

laboratorio, ya que la mayora estn fabricados de vidrio.

20

del

Bibliografa
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04/08/2015.

Disponible

va

web

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http://www.ihrdiagnostica.com/tecnicas/pdf/AceiteDeInmersionv2.p
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http://vet.unicen.edu.ar/html/Departamentos/Samp/Microbiologia/
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edicin.

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