INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA

CURSO PRCTICO DE MTODOS DE ANLISIS

NOMBRE DE LA PRACTICA: Anlisis espectrofotomtrica de

un sistema mltiple.

ALUMNA: PREZ GARDUO PAOLA REMEDIOS

GRUPO: 41V1

SECCIN: 2

PROFESOR: Gabriela E. Olgun Ruiz

FECHA DE ENTREGA: 29 DE OCTUBRE DEL 2015

Fundamento

El anlisis de varias especies absorbentes presentes en una muestra se

puede realizar sin separar necesariamente los analitos, ya que cada
analito presenta espectros de absorcin diferentes. En el anlisis
simultneo se aplica el principio de aditividad de las absorbancias:
Atotal=A1+A2
A=ambc
Si consideramos dos longitudes de onda:

A 1 = amA1 b CA +amB1 b CB
A

= amA2 b CA +amB2 b CB

La absortividad molar a cada longitud de onda se obtienen a partir de

las curvas de calibracin como valor de pendientes preparadas con
patrones de cada componente o de las curvas espectrales y Ca y Cb
resultan las incgnitas. Para manejar un sistema mltiple hay que
considerar que los componentes no deben presentar interacciones
qumicas entre s ni con el solvente comportndose cada mezcla o
analito como independiente, adems para poder escoger longitudes de
onda donde se considera que una absorba mas a una longitud y menos
en la otra y viceversa para que pueda cumplirse la ley de la aditividad.

Objetivo

Comprobar la Ley de la Aditividad en un sistema mltiple.

Determinar constantes fotomtricas y las aplicara en el clculo de la
concentracin de los componentes de un sistema mltiple.

Resultados (Tablas y grficas)

Tabla 1. Valores de absorbancia para
construir los espectros de absorcin de
K2Cr2O7 y de KMnO4
Longitud de onda (nm) A K2Cr2O7 A KMnO4
340
350
360
370
1.841
0.315
380
1.78
0.219
390
1.291
0.134
400
0.862
0.085
410
0.63
0.058
420
0.579
0.055
430
0.608
0.06
440
0.626
0.07
450
0.613
0.096
460
0.561
0.437
470
0.48
0.21
480
0.385
0.291
490
0.29
0.414
500
0.209
0.539
510
0.145
0.667
520
0.093
0.768
530
0.059
0.826
540
0.04
0.776
550
0.027
0.781
560
0.021
0.527
570
0.018
0.468
580
0.017
0.287
590
0.016
0.144
600
0.016
0.11
A partir de esta tabla graficamos el espectro de absorcin para poder
seleccionar las longitudes de onda a trabajar respecto al espectro de cada
sustancia.

Grafica 1. Espectro de absorcin de las sustancias

Las longitudes de onda se seleccionaron donde la absorbancia fuese mayor y la otra
no fuese muy pequea para ambas sustancias y evitar grandes errores:
Tabla 2. Valores de MX para
K2Cr2O7 y KMnO4.
Tabla 4. Curvas
de calibracin para
Compuesto
mx KMnO 4 y
K
Cr
O
a
1y
2.
K22Cr22O7 7
370
Compue Diluci
Concentracin
A1
KMnO4
510
A2

sto

K2Cr2O7
0.0016
M

KMnO4
0.0004

Molar (Cm)

1:7

0.0002285

1:6

0.0002666

1:5

0.00032

1:4

0.0004

1:3

0.00053

1:2

0.0008

1:7

0.00005714

1:6

0.00006666

0.39
3
0.45
5
0.54
4
0.66
9
0.84
6
1.24
9

0.03
5
0.03
6
0.04
0.04
5
0.05
3
0.07
5

0.04 0.13
4
6
0.05 0.14
1
2

0.05 0.16
6
2
0.06 0.19
1:4
0.0001
9
6
M
0.08
1:3
0.0001333
0.25
8
0.08 0.24
1:2
0.0002
7
7
Con la tabla anterior construimos las siguientes curvas de calibracin para
cada compuesto a distintas longitudes:
1:5

0.00008

Grafica 2. Curva de Calibracin del KMnO4 a 1(370 nm) y 2 (510 nm)

Grafica 3. Curva de Calibracin del K2Cr2O7 a 1(370 nm) y 2 (510 nm)

Obteniendose las ecuaciones para cada longitud en cada tabla usamos el valor
de la pendiente ya que esta corresponde al valor de las absortividades molares
respecto a la ley de Bouger-beer y la Ley de la aditividad completando la
siguiente tabla correspondiente a cada sustancia:
Tabla 5 .Valores de am para K2Cr2O7 y
KMnO4 a 1 y 2
K2Cr2O7

KMnO4

a m a 1

1486.6

315

a m a 2

70.56

859.53

Para el experimento de las mezclas se determino la concentracion para cada

uno como lo muestra la siguiente tabla:
Tabla 6. Valores de Cm y absorbancia en las mezclas
de K2Cr2O7 y KMnO4
Mezcl
a

Cm

Cm

No.

K2Cr2O7
(0.0016M)

KMnO4
(0.0004M)

0.0008

0.00004

A
Observada
1

1.40
8

0.16
2

0.0004

0.0001

0.79
4

0.20
1

0.00016

0.0002

0.39
6

0.36
7

Estas concentraciones se obtuvieron a travs del clculo de la adicin de los

compuestos a determinados volmenes, empleando la formulas C1V1 =
C2V2 .
Clculos:
Para el K2Cr2O7 =
C2=(0.0016M)(5mL)/(10mL)=0.0008 M
Para el KMnO4=
C2= (0.0004M)(5mL)/(10mL)= 0.00004 M

As calculamos para las otras mezclas de los dos compuestos.

Tabla 7. Valores de absorbancia observados y calculados de

absorbancia de las mezclas de K2Cr2O7 y KMnO4
Mezcla

A Observada

A Calculada

No.

1.408

0.162

1.201

0.090

0.794

0.201

0.626

0.114

0.396

0.367

0.300

0.183

Con los valores de Cm y am obtenemos las absorbancias calculadas, y en base

a la Ley General de la Fotometra podemos comparar las absorbancias
observadas y las calculadas, para poder representar en una grafica el
comportamiento de ambas y determinar el valor de R y R 2 para determinar
que cumple con la ley de la aditividad.

Grafica 4. Ley de la aditividad de dos longitudes de onda.

Con los valores obtenidos de R y R2 completar la siguiente tabla:

Tabla 8. Valores de R y R2 a 1 y 2

(370nm)

(510nm)

0.9993

0.9974

0.9987

0.995

En efecto se cumple la ley de la aditividad ya que los valores de las R y R 2 nos

indica que las sustancias no interaccionan entre s por lo que sus absorbancias
son aditivas.
Para la muestra problema se obtuvieron las absorbancias que se muestran en
la tabla 9 y en base a ella se determino la concentracin del analito
correspondiente.
Tabla 9. Concentracin problema

A1 = 1.333

A2 = 0.304

Cm de K2Cr2O7 =
8.9667X10-4

Cm de KMnO4 =
3.5368X10-4

Se observa que hubo ms dicromato que permanganato.

Discusin
Para determinar las longitudes de onda a trabajar se requiri determinar
que para el permanganato de potasio la longitud que representaba una
longitud alta era 530 sin embargo al comparar absorbancia que daba el
dicromato de potasio a esa longitud de onda era muy pequea por lo
que se opto por elegir la longitud de onda de 510 nm , para determinar
en el dicromato la longitud de onda se considero lo anterior
seleccionando
la longitud de onda de 370 nm, sin embargo la
absorbancias obtenidas para seleccionar fueron algo grandes lo que nos
indica finalmente que se tendra errores significativos, sin duda al
trabajar y realizar las curvas de calibracin cumplieron con la ley de
Bouger-Beer, aunque en la curva de calibracin del permanganato de
potasio presenta unos errores pequeos por lo que el coeficiente de
correlacin fue ms baja para las dos longitudes. Finalmente se
obtuvieron las absortividades molares y concentracin con las
ecuaciones de cada curva de calibracin, para finalmente comparar las
absorbancias calculadas y observadas, que hubo diferencias , pero que
al graficar ambas, se sigue un comportamiento lineal que nos indica que
se cumple la ley de la aditividad, y con ello se pudo calcular la
concentracin de una solucin problema proporcionada sealando que
en dicha muestra estaba en mayor cantidad el dicromato de potasio que
el permanganato que inclusive se pudo detectar tambin por el color
que presentaba la muestra .

Conclusin
Para que se cumpla la ley de la aditividad en una mezcla es necesario
conocer los espectros de absorcin de cada componente o cromoforo de
la mezcla para verificar que no haya interaccin qumica entre ellos y
que sus espectros estn separados, estableciendo una longitud mxima
no cercana a la del otro componente y que la otra longitud de onda
represente una longitud mnima de absorcin. As mismo incluyendo la
ley de Bouguer-Beer determinamos concentracin y absortividad molar,
para finalmente determinar la absorbancias de cada componente y se
sumen y se tenga la absorbancia total siendo una propiedad aditiva de
la ley.

Bibliografa

Qumica Analtica Moderna, W.F.Pickering, Editorial Reverte, 1980, pg.

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