MEMBRANAS: TIPOS DE FASES Nomenelatura Letra mayuscula para determinar Subinaises el tipo de red e : I: topologia a oO e L= lamelar oe biked aA (aceite en agua) o*%o iB TI: topologia = ™ OQ invertida 8 , 2 ¢ &) H=hexagonal @29 ( agua en aceite) 25, oO Letras: Indican la conformacién de la cadena ccristalina i fase gel ordenada fase liquida GB coexistencia de fases gel y liquida MEMBRANAS: TIPOS DE FASES Fase cristalina: orden a largo y corto aleance 2 : YY en tres dimensiones & ys Fase gel: cadenas hidrocarbonadas ordenadas,en ae i i conformacién trans pero con capacidad de rotacién sobre el eje longitudinal en una escala de tiempo de sewn et 100ns RN gy “i” Fase Liquida: cadenas en conformacién liquida, expansion del area interfacial por molécula ( aprox 15-30%) y répida difusion lateral de las moléculas (O ans = 10! m? sec!)MEMBRANAS: TIPOS DE FASES Table 1 List of the well-established, translationally ordered lyotropic phase Description 3D lamellar erystals Lamellar stack of 2D crystalline bilayers Lamellar gel (untitled) Lamellar gel (tilted) Interdigitated j (5) a Rippled gel phase Ribbon phase with 6-packed chains Fluid lamellar phase Hexagonal Hexagonal, complex Rectangular Oblique Cubic Tetragonal Rhombohedral ins phase of square-packed, helically-coiled Referens MEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES 3 Tipos principales 1.- Transiciones entre fases lamelares ordenadas: cristal-cristal cristal-gel gel-gel 2.- Transiciones entre fases lamelares y fases no lamelares ¢j. fase lamelar-solucién micelar 3.- Transiciones entre fases fluidas cambio de simetria o topologia, ¢}. lamelar hexagonal.MEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES Variables termodinamicas intensivas que pueden inducir cambios de fase: temperatura y presién Condiciones biologicas: temperatura y presién constantes Otros factores que pueden inducir cambios de fase: cambios en la hidratacion cambios en el pH cambios en la concentracion de sales campos eléctricos composicion quimica MEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES Efecto de la estructura quimica: Cadena hidrocarbonada * La temperatura de transicién T, aumenta monoténicamente con el aumento en Ia longitud de la cadena debido a que las entalpias y entropias de la transicin AH, AS, aumentan con cada grupo CH, adicional El incremento para las diacil.fosfoetanolaminas es: T, = AM,/AS. AMh/Ancu;, = 4.5 + 05 kIM!; AS\/Ancy, = 12 +23M-! K-! * La presencia de dobles enlaces cis o trans reduce dristicamente la temperatura de transicién gel-fluido ( tipicamente 60 ° C un enlace cis ). El efecto miximo se consigue con el doble enlace en el centro de la cadena © Uniones de tipo eter entre la cadena y la cabeza polar aumentan la temperatura de transicion entre 1-5 °C , inducen la formacién de fases gel interdigitadasMEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES Cabezas polares Son importantes: + Ia polaridad + la carga electrostitica el volumen de la cabeza polar las interacciones entre cabezas Ej, fosfatidiletanolaminas pueden formar puentes de hidrdgeno entre ellas, 1o que aumenta la temperatura de transieién Efectos del soluto * Los iones presentes en la solucién interaccionan con los lipidos cargados reduciendo las repulsiones electrostaticas * El efecto del pH es complejo: + el pK de los grupos ionizables en la superficie puede diferir hasta en 3 unidades de pH con respecto al pK de los grupos en solucién + el cambio en la ionizacion de los grupos afecta tanto a las interacciones electrostaticas como al estado de hidratacion sla formacién de puentes de hidrégeno entre las cabezas también es sensible al pH MEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES Efecto del colesterol: * Difumina la transici6n gel-fluido: fluidiza la fase gel y ordena la fase fluida Solventes no polares * Se distribuyen preferentemente en el interior hidrofébico * Facilitan la formacién de fases invertidas Ej. aleanos, gases inertes, compuestos aromaticos, anestésicos, algunos péptidosMEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES ol S| Efecto de la Efecto del tipo de posicién de la cabeza polar y de la insaturacion en la longitud de ia cadena en la cadena en la temperatura de temperatura de transicion transici6n MEMBRANAS: TRANSICIONES DE FASES az as ent ei pane (a cp ats tain oe a Efecto del pH del Efecto de la fuerza medio en la idnica del medio en temperatura de Ja temperatura de ‘transicion transicionMEMBRANAS: DIAGRAMAS DE FASES t r © Fg) SP bs bo | aN B A B GA B 2) » Figure 1, Schama pase dagrams os «funtion of merase composon and tmpetare Te) binary reo oo poeple A and He (0) bay sof pana Wand holt Cad mary mitre of A and al oom epee, Sod pases adenoid by 8 hg (er a) phe by Lhe tbsrgs oan dard foro” and "seared pasha Tesi acl Magn Wetioes sold md gd pero Eat vy) the comespending regions between two liquid phases are dark grey. The three-phase ooexisence region in () fs denoted by 30. MEMBRANAS Importancia ica de los dominio: * La presencia de dominios: contraresta la cooperatividad de los lipidos y permite acomodar asimetrias_y zonas especializadas * Los dominios tienen distintas propiedades fisicas Membrana en fase sélida: no se puede estirar lateralmente, solo se puede doblar en una direccién ( como una hoja de papel) Membrana en fase fluida: permite deformaciones laterales que se relajan mediante el flujo lateral , por lo que se pueden doblar en dos dimensiones y formar segmentos esféricos ( como un globo)DOMINIOS EN MEMBRANAS BIOLOGICAS Coexistencia de dominios solidos y fluidos * Dominios fluidos: muchos procesos importantes de invaginacién, evaginacién a ‘escalas micrométricas requieren curvaturas de dominios fluidos * Dominios s6lidos ( Rafts ): fracciones de membrana resistentes a la extraccién con detergentes y enriquecidas en colesterol y esfingomielina. Tamafio alrededor de 50 nm. Enriquecidos en algunos tipos de proteinas (caveolina, por ejemplo) + Dominios de proteinas: Agregacién de proteinas de membrana: + receptores de sinapsis quimicas ( anclados por interaccién a proteins citoplasmaticas) + agregacion de receptores inducida por interaccién con ligandos DOMINIOS EN MEMBRANAS BIOLOGICAS wey Xys, evga == Svan ooye’y === Bb Sy 0 60 a = glicoesfingolipido lacental akaline phospatase”” ransferin receptor”MEMBRANAS: prESENCIA DE PROTEINAS La presencia de proteinas también puede generar “ fases laterales” gobernadas por * interacciones entre proteinas * interacciones de las proteinas de membrana con proteinas del citoesqueleto * composicién lipidica de la membrana ereotetional defect fioaten 4 salts eipe cotter MEMBRANAS: TENSION LATERAL La tension lateral regula la curvatura de la bicapa y puede regular la funcion de las proteinas Perfil de tensi6n lateral de la bicapa. Enel equilibrio la tensién lateral neta (la integral del perfil a través de la membrana) es igual a ceroMEMBRANAS: COEXISTENCIA DE FASES * Los dominios en membranas biol6gicas son importantes para la funcién, dinémicos y muy complejos * Estudios tedricos y experimentales en modelos sencillos ( mezclas de lipidos ) permiten conocer y cuantificar los parametros que determinan la segregacién de fase, la forma de los dominios ( determinada por la tensién de linea y la interaccién entre los dipolos de las moléculas en los dominios), las propiedades fisicas de las membranas, * Existen miltiples formas de reconstitucién de proteinas de membrana en sistemas lipidicos ( liposomas, liposomas gigantes, membranas ancladas,...) de composicién conocida que permiten estudiar mas en detalle la importancia de la interaccion lipido-proteina en la funcin biolégica MEMBRANAS: COEXISTENCIA DE FASES Formas de estudiar y/o visualizar los dominios lipidicos: * Calorimetria: permite medir cantidades termodinamicas * Métodos espectroscOpicos: fluorescencia, resonancia magnética nuclear, resonancia de spin electrénico * Microscopia electronica * Microscopia de fuerzas atomicas + Difraccion de rayos XMEMBRANAS: COEXISTENCIA DE FASES Microscopia de fluorescencia MEMBRANAS: COEXISTENCIA DE FASES Microscopia electronicaMEMBRANAS: COEXISTENCIA DE FASES Microscopia de fuerzas atomicas