Mtodo DPPH

Aluna: Yasodhara Capella

Prof: Enayde Melo

Introduo
Vrios processos metablicos e estresses em
geral foram espcies reativas denominada
radicais livres.
O mtodo DPPH rotineiramente praticado
para avaliar o potencial de sequestro de
radicais livres por uma molcula antioxidante.
comumente usada em gro e farelo de
trigo, legumes, leos, e farinhas em
diferentes sistemas (etanol, metanol, acetona
e alcool aquoso, benzeno)

Introduo
DPPH um radical que se apresenta roxo,
absorvendo a luz a 515nm em metanol.
O mtodo baseado no princpio que o
DPPH vai aceitar um H de uma molcula
antioxidante, se tornando DPPH2 e
mudando a colorao para amarelo, com
uma diminuio da absorbncia a 515nm.
Essa mudana acompanhada com
espectrofotmetro.

 Esse mtodo foi desenvolvido pela

primeira fez por Blois, em 1958,
quando demonstrou a habilidade de
o DPPH aceitar H da cistena.
Com mudanas feitas por BrandWilliams, Cuvelier, and Berset em
1995, esse mtodo tem sido usado
mundialmente como um ponto de
referncia, sendo adotado com
modificaes de acordo com a

Fatores que afetam o

mtodo
[DPPH
]
Luz,
O2

Vol. e
tipo da
amost
ra

Mtod
o

Fe, Cu

pH

Tempo
de
reao

gua

Precipita
em
metanol

Proten
as
Estvel e
solvel
por
60min

Detergen
te no
inico

 Relao entre a concentrao do

antioxidante e o sequestro do DPPH
no linear, por isso medir o EC50
problemtico.
necessrio estudar o
comportamento de cada amostra e
obter uma curva padro para cada
uma.
As curvas no apresentam bons
ajustes, levando a erros

 Obteve EC20, com 40% de inibio

Para assegurar a linearidade entre a
inibio do DPPH e a concentrao
da amostra.
Sugeriu-se usar EC20 porque o EC50
est numa zona no-linear e no
definida, o que dificulta a
determinao de maneira acurada.