APLICACIN DEL MTODO CIENTFICO

1. DEFINICIN Y PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Se quiso evaluar la produccin de biomasa de la microalga
Scenedesmus sp. en el laboratorio. Se sembraron 3 botella con la cepa
de Scenedesmus sp, con el medio Guillard, y con aireacin e iluminacin
permanente, excepto en los das 3 , 4, 5 que se produjo un corte de
luz en la ciudad universitaria. Se realiz el conteo respectivo en la
cmara de Neubaver durante 7 das. Con los datos obtenidos se
construy la curva de crecimiento (Fig 1) y se obtuvo que las fases de la
curva, (dicho sea son las fases de latencia o fase lag, exponencial,
lineal, estacionaria y senescencia. ) no concordaban con los datos
revisados en la teora(Fig 2).

CURVA DE CRECIMIENTO Scenedesmus sp.

5000000
4500000
4000000
3500000
3000000
2500000
2000000
1500000
1000000
500000
0
0

Fig 1: Curva de crecimiento de Scenedesmus sp. obtenida durante el

trabajo.

Fig 2: Curva de crecimiento tipica

Entonces, Qu factores causaron que la curva de crecimiento de
Scenedesmus sp muestre tales deformaciones?
2. INFORMACIN PREVIA
Muchos factores contribuyen para el desarrollo ptimo de los cultivos de
microalgas, algunos de stos afectan las caractersticas del crecimiento.
Los recipientes de cultivo ms comnmente usados son de materiales no
txicos como las cajas de Petri, matraces Erlenmeyer, matraces
Ferenback, carboys o garrafas, etc., adecuados para cultivos de
laboratorio. Para cultivos a gran escala los recipientes de plstico,

madera y concreto son los ms recomendables, incluyendo los

estanques rsticos en reas rurales son los sistemas ms econmicos.
La aereacin es un factor muy importante para la homogenizacin de los
nutrientes y para evitar la sedimentacin de las microalgas. Las
diatomeas suelen acumularse en lugares donde el agua no se mezcla,
sto tambin depende de la forma del recipiente de cultivo que cuando
no es adecuado retarda el crecimiento.
Otro factor importante es la penetracin de la luz en el cultivo. Las
cloroficeas pueden soportar altas temperaturas entre 12.5 30C. El
crecimiento y la divisin celular son afectados por la intensidad de la luz
y el fotoperodo (horas de iluminacin y obscuridad) en relacin tambin
a la temperatura.
El fotoperodo es un factor que regula la divisin celular, el fotoperodo
continuo (horas de iluminacin prolongada) produce crecimientos
rpidos, un fotoperodo con horas de luz y obscuridad semejante al
fotoperodo solar mantiene un crecimiento normal y saludable.
Se han desarrollado diferentes medios para el cultivo de microalgas que
van desde las frmulas para enriquecer el agua de mar natural, hasta el
uso de medios artificiales , estos medios se usan principalmente para
fines experimentales, ya que como se ha mencionado, brinda resultados
constantes, aunque existen algunas especies que no crecen en medios
artificiales por factores desconocidos que afectan su crecimiento, las
principales frmulas utilizadas van desde el agua de Miguel, que data de
1910, desarrollada por Allen-Nelson; el medio de End-Schereiber de
1934, hasta frmulas especficas para familias como la frmula del
Laboratorio Haskins de Nueva York para diatomeas, Provasoli et al.,
1975; Matthiesen & Thorner, 1966; McIachlan, 1973; Guillard F., 1973;
Droop, 1975, 1979; Schoene, 1982, etc.
El fitoplancton se desarrolla y multiplica en relacin de las
condiciones fisicoqumicas del medio. En trminos generales son
los macronutrientes o factores limitantes del crecimiento el
carbono, Nitrgeno, Fsforo, Silicio, Magnesio, Potasio y Calcio,
que se requieren en cantidades relativamente grandes, mientras
que los llamados micronutrientes (Fierro, Manganeso, Cobre,
Zinc, Sodio, Molibdeno, Cloro y Cobalto) se necesitan en
menores cantidades.
3. HIPTESIS
Segn la informacin revisada se puede decir que el corte elctrico de la
luz durante el cultivo de la microalga afect la iluminacin y la aireacin,

por lo tanto no se cumplieron las condiciones ptimas de crecimiento

durante 3 das consecutivos resultando en una curva de crecimiento
amorfa.
4. DISEO DEL EXPERIMENTO
DISEO EXPERIMENTAL : Para poner a prueba nuestra hiptesis
replicaremos el trabajo realizado. Esta vez asegurndonos que la
aireacin y la iluminacin sean constantes durante el trabajo.
5. EXPERIMENTACIN
Se prepararon los soluciones a (macronutrientes ) y b(micronutrientes)
del medio guillard as como tambin la
solucin de vitaminas. Luego se procedi a
mezclar 200 ml del inculo de Scenedesmus
con 800 ml de agua y a todo se le agrego 1
ml de las soluciones a , b y c. Todo esto se
mezcl en una botella de 3 litros, dicha
botella no debe presentar ni bordes ni
ranuras, y deben estar colocadas boca abajo
En la parte superior de la botella, colocada
boca abajo, se hizo un agujero con el fin de
colocar una manguera para la oxigenacin.
Finalmente se pas a colocar las botellas en
un soporte de tecnopor, colocamos la manguera para la oxigenacin, y
colocamos las
botellas en una zona iluminada, es nuestro caso
utilizamos luz artificial (Fluorescente).
Para la determinacin de la densidad de poblacion de las microalgas, se
utiliz la cmara de Neubauer , el primer da de trabajo se tom cmo
da 0, extrajimos 1 ml del cultivo y se cont, en caso de no poder
contar en ese momento se colocaba en 1 vial con lugol para evitar que
las microalgas sigan dividindose.
Para realizar el conteo el procedimiento fue el siguiente: en la parte
superior de la cmara de Neubauer, se coloc un cubreobjetos, seguido
con una tuberculina se extrajo el inculo de Scenedesmus, luego se
coloc (por absorcin) en los bordes de la cmara de Neubauer.
Finalmente se llev al microscopio para hacer el conteo respectivo.

En los das siguientes se realiz el mismo procedimiento y los datos

obtenidos fueron anotados en una hoja de Excel para su posterior
anlisis.

6. ANLISIS DE LOS RESULTADOS

Bsicamente lo que hemos querido demostrar mediante la repeticin del
experimento y el control de la iluminacin y la aireacin, los cuales son
factores importantes, es obtener una curva de crecimiento tpica, como
se han mostrado en las grficas.
La aireacin es muy importante ya que las microalgas tienen la
necesidad de estar en contacto con el aire para eliminar sus emisiones
de CO2. No obstante un exceso de aireacin puede ocasionar una
disminucin del crecimiento por inhibicin del O2, tambin porque una
buena aireacin permite la distribucin homognea de los nutrientes del
medio y evita que las microalgas sedimenten; Y la luz porque sin ella no
podra realizar el proceso de fotosntesis.

CURVA DE CRECIMIENTO DE Scenedesmus sp.

14000000
12000000
10000000
8000000
6000000
4000000
2000000
0
1

Fig 3: Curva de crecimiento de Scenedesmus sp. experimental

7. CONCLUSIONES
En conclusin, nuestra hiptesis es aceptada, puesto que controlando
apropiadamente los factores de aireacin e iluminacin conseguimos
una curva de crecimiento con las fases claramente marcadas y que
coinciden con as curva de crecimiento tpica, esto debido a que se
cumplieron las condiciones apropiadas para un desarrollo rpido y
estable de las microalgas.