SEMANA 15

REGULACIN GENMICA. CLULAS MADRE. CLONACIN.

1. Describir los componentes que forman la envoltura nuclear. Cul es la
relacin entre las membranas nucleares y el complejo del poro nuclear?
Cmo funciona el complejo del poro nuclear al regular el movimiento
bidireccional de materiales entre el ncleo y el citoplasma? Qu son la
importinas y las exportinas?
Est formada por:
Membrana externa
Espacio intermembrana
Membrana interna
Lmina nuclear
-Es responsable de la estructura y de la forma del ncleo, gracias sobre todo a la
lmina nuclear.
-Regula el trasiego de molculas entre el nucleoplasma y el citoplasma, que est
mediado por los poros nucleares.
-La membrana externa se contina con la membrana del retculo endoplasmtico.
POROS NUCLEARES
El transporte mediado por los poros nucleares est orquestado por las protenas RanGTPasas y por unas familias de protenas denominadas importinas y exportinas. Las
molculas Ran-GTPasas son trascendentales tanto para la importacin como para la
exportacin de molculas. Son las responsables de crear un gradiente que dirige el
transporte y crear este gradiente es la nica parte del transporte por parte de los poros
nucleares que gasta energa. Las molculas Ran pueden estar en tres estados: RanGTP, Ran-GDP y Ran. El paso de un estado a otro est mediado por otras enzimas.
En el nucleoplasma hay una mayor concentracin de Ran-GTP, mientras que en el
citplasma abunda la Ran-GTP.

Las Gradientes creados por las molculas Ran entre el citoplasma y el

nucleoplasma.
La energa se consume en el nucleoplasma para crear Ran-GTP a partir de
Ran y fsforo inorgnico, manteniendo la concentracin de Ran-GTP
elevada. En el citoplasma las Ran-GTP son rpidamente convertidas en
Ran-GDP, manteniendo la concentracin de estas ltimas elevada.
Mientras, la hidrlisis del Ran-GDP a Ran, mantiene la concentracin de
Ran-GDP baja en el nucleoplasma.
El tamao de los iconos son indicativos de la concentracin.
IMPORTINAS-EXPORTINAS

Las importinas y las exportinas son dos de las familias de molculas que
reconocen pptidos seal de entrada o salida, respectivamente, de aquellas
molculas que tienen que entrar o salir del ncleo. Son estas dos familias
de protenas las que interaccionan con las nucleoporinas durante su
trasiego por los poros nucleares.
Las importinas son heterodmeros, formados por dos subunidades, la
subunidad-a se une a la NSL de la protena nuclear permitiendo la unin
con la subunidadad-b. Esta unin origina una importina funcional que lleva
unida a la protena nuclear a ser transportada.

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Las Exportinas son el mecanismo para la salida nuclear de protenas

carga que contienen una seal de exportacin nuclear Las molculas de
mayor tamao requieren de una protena transbordadora o carioportina.

2. Cul es la diferencia en la estructura y la funcin entre heterocromatina y

eucromatina? Entre heterocromatina constitutiva y facultativa? Entre un
cromosoma X activo e inactivo en una clula de mamfero hembra?
HETEROCROMATINA
La heterocromatina es una forma compacta de ADN, el cual viene en
diferentes variedades. Estas variedades se encuentran en un continuo entre
los dos extremos de la constitutiva y la heterocromatina facultativa
Est conformada por secuencias altamente repetitivas
No posee actividad transcripcional
Es inactiva en cuanto a la expresin gentica pero que puede funcionar en
el control de actividades metablicas, la transcripcin y la divisin celular.

Est asociado con la regulacin de los genes para la proteccin de la

integridad de los cromosomas.
EUCROMATINA
Es una forma ligeramente compactada de la cromatina que es rico en la
concentracin de gen, y es a menudo bajo la transcripcin activa,
comprende la parte ms activa del genoma dentro del ncleo de la clula.
La estructura bsica de la eucromatina es un rgano alargado, abierto, 10
nm de microfibrillas.
Participa en la transcripcin activa de ADN a los productos de mRNA.
La estructura permite plegar las protenas reguladoras de genes y
complejos de ARN polimerasa para unirse a la secuencia de ADN, que
luego pueden iniciar el proceso de transcripcin.
HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA
La heterocromatina constitutiva contiene un tipo particular de ADN
denominado ADN satlite, formado por gran nmero de secuencias cortas
repetidas en tndem.
Es estable y conserva sus propiedades heterocromticas durante todas las
etapas del desarrollo y en todos los tejidos.
Es altamente polimrfica, probablemente debido a la inestabilidad del ADN
satlite.
Se encuentra fuertemente teida en la tcnica de bandas C,
HETEROCROMATINA FACULTATIVA
La heterocromatina facultativa se caracteriza por la presencia de
secuencias repetidas tipo line. Estas secuencias, dispersas a lo largo del
genoma, podran promover la propagacin de una estructura de cromatina
condensada.
Es reversible, su estado heterocromtico depende de la etapa del desarrollo
y del tipo celular.
No es particularmente rica en ADN satlite, y por ello, no es polimrfica.
No se encuentra nunca teida en la tcnica de bandas C.

CROMOSOMA X INACTIVO
Es un proceso por el cual una de las dos copias del cromosoma X presente
en las mamferos hembra se inactiva, el cromosoma X inactivo es silenciado

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por lo que se envasa de tal manera que tiene una estructura

transcripcionalmente inactiva llamada heterocromatina.
Inactivacin del cromosoma X con imprinting:
El cromosoma X de origen paterno se inactiva de forma preferencial en las
clulas de la placenta de los mamferos. Un posible mecanismo implicara el
presilenciamiento del cromosoma X de origen paterno en la lnea germinal
masculina mediante la inactivacin de los dos cromosomas X en meiosis;
de esta forma el estado inactivo del Cromosoma X podra transmitirse a la
prxima generacin, permitiendo la compensacin de la dosis en embriones
femeninos, porque slo las hembras heredan un Cromosoma X de sus
padres.
Inactivacin del cromosoma X al azar:
Ocurre tempranamente en el embrin de hembra, en el que los dos
cromosomas X, de origen materno o paterno, tienen la misma posibilidad de
ser inactivados. Cada clula femenina se encarga de distinguir entre dos
Cromosomas X dentro del mismo ncleo, y designar un Cromosoma X
como activo y el otro como X inactivo.
Cada clula cuenta, en primer lugar, su nmero de Cromosomas X,
entonces al azar escoge un X para permanecer activo, y, finalmente,
silencia el futuro X inactivo.

3. Cmo el cdigo de histonas es un factor determinante del estado de una

regin de la cromatina?
El cdigo de histonas, segn la que modificaciones sobre las colas aminoterminales de las histonas pueden tener consecuencias en cuanto a:
La facilidad con la que protenas asociadas a cromatina podran acceder
al ADN, las modificaciones actuaran como seal de reconocimiento para
protenas reguladoras, y por tanto, las formas modificadas resultara
relevantes para la regulacin gentica.
Las estructuras de eucromatina y heterocromatina sern en mayor medida
dependientes de las concentraciones locales de histonas modificadas.
La informacin contenida en estas histonas podra ser heredada por las
clulas hijas tras la replicacin del ADN.
4. Cul es la diferencia en la estructura y funcin entre los centrmeros y
telmeros de un cromosoma? Cul es la estructura y funcin de la
telomerasa?
TELOMERO
Son los extremos de los brazos cromosmicos y tienen una estructura especial
(formacin de ADN cuadruplexo) que protege al cromosoma de su degradacin por
los extremos y que adems permite la replicacin de los extremos cromosmicos
mediante la actuacin de encimas especficas como las telomerasas. Los
telmeros poseen extremos 3' monocatenarios (de una sola hlice) constituidos
por una secuencia corta rica en Guanina que est repetida en tndem (una detrs
de otra) cientos de veces.
CENTROMERO
Zona por la que el cromosoma interacciona con las fibras del huso acromtico en
las anafases mitticas y meiticas y que es responsable de los movimientos
cromosmicos que tienen lugar durante estas fases. Las estructuras centromricas

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que interaccionan con las fibras del huso se denominan cinetocoros. En la

estructura del centrmero tambin intervienen protenas centrmricas. Es la
constriccin primaria y aparece menos teida que el resto del cromosoma.

TELOMERASA. ESTRUCTURA Y FUNCION

La telomerasa es una ribonucleoproteina que consiste en un componente

de ARN denominado HTR human telomerase RNA este consiste en una
cadena molde de ARN que sirve para la sntesis del ARN telomerico y en
una subunidad proteca con funciones catalticas y que actan como una
trascriptasa inversa semejante a la trascriptasa inversa viral denominada
HTERT human telomerase inverse transcriptase

Estos dos componentes son necesarios y suficientes para la actividad de la

telomerasa in vitro, la protena TRF1, TRF2, tanquirasa, TIN2,RAP1, POT1
estn involucrados en la interaccin con el telmero y regulan la apertura y
cierre del telmero permitiendo el acceso al telmero de otros complejos
proteicos tales como las telomerasas.

Una variedad de protenas y ribonucleoprotenas incluyendo HSP90 as

como DKC1, L22, P23, GAR1, tambin participan en el ensamblaje de la
telomersa y facilitan la interaccin de la telomerasa con el telmero, otras
protenas tales como MR11A, NBS1, KU70, KU80, DNAPK y ATM
funcionan en la deteccin de telmeros cortos y disponen las vas de
respuestas para la reparacin de las secuencias telomricas.

Por tanto la regulacin de la actividad de la enzima in vivo es sumamente

compleja, de igual modo, sucede con la regulacin de la expresin
gentica de los genes que codifican para la sntesis de las subunidades
enzimaticas

5. Investigue sobre las implicancias para la medicina humana de las clulas

madre, la clonacin de animales y el desarrollo de la protena verde
fluorescente.

Protenas fluorescentes
Las protenas fluorescentes, entre las cuales se encuentra la GFP, son muy verstiles
y se utilizan en diversos campos como la microbiologa, ingeniera gentica y
fisiologa. Permiten ver procesos previamente invisibles, como el desarrollo de
neuronas, cmo se diseminan las clulas cancerosas, el desarrollo de la enfermedad
de Alzheimer, el crecimiento de bacterias patognicas, la proliferacin del virus del
SIDA, entre otros.
Por ejemplo, clulas cancerosas que expresan DsRED pueden implantarse en ratones
salvajes, o transgnicos con expresin de GFP en todas las clulas. Cuando los
ratones son iluminados con luz azul las clulas cancerosas pueden ser fcilmente
detectadas y seguidas (en los ratones verdes o normales) permitiendo la localizacin
de las metstasis y el fenmeno de angiognesis en tumores en proliferacin. Por otro
lado, el modelo permite seguir la evolucin comparativa de las metstasis en
presencia o ausencia de distintos frmacos. Esto sera slo uno de los mltiples usos
que se le estn asignando a estas protenas.

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La GFP tambin tiene una importancia especial en la biologa del desarrollo: si se

introduce en un estadio temprano de un embrin, se puede seguir la evolucin de las
primeras clulas, estructuras y rganos.
Por otro lado, la GFP y protenas similares tienen aplicaciones biotecnolgicas,
incluyendo la deteccin de arsnico en los pozos de agua. Por ejemplo, en partes del
sudeste asitico el arsnico presente naturalmente en el agua est envenenando a
miles de personas. Los investigadores han modificado genticamente bacterias
resistentes al arsnico que fluorescen en presencia de arsnico. Tambin se han
modificado organismos que fluorescen en presencia de trinitrotolueno o metales
pesados como el cadmio y zinc.
Ya se han generado monos, gusanos, algas, Escherichia coli, y cerdos con GFP en su
genoma, que fluorescen19. Y hasta se han fabricado juguetes con GFP que brillan en
la oscuridad.
CELULAS MADRE
Las clulas madre de los embriones obtenidos por fertilizacin in vitro, se ha intentado
obtener clulas embrionales por clonacin. Con esta tcnica se toma el ncleo de una
clula, por ejemplo de una clula de la piel y se introduce en un cigoto al que se le ha
retirado el ncleo. Una vez que se han cumplido tres a cinco das de la clonacin, el
complejo que contiene alrededor de 40 clulas se introduce en placas de cultivo con
medios adecuados para su desarrollo. Al cabo de meses las clulas madre originales
se han dividido en millones de clulas saludables sin diferenciarse en clulas
especializadas, obteniendo una lnea de clulas madre embrionarias.
Un hecho trascendente es que las clulas madre embrionarias tienen capacidad para
convertirse en cualquier tipo de clulas, lo que representa un desafo para los
investigadores.
El reto est en controlar y dirigir la diferenciacin celular: complejas combinaciones de
factores de crecimiento y seales qumicas y genticas que hoy recin se empiezan a
descifrar.
Factores de crecimiento, citoquinas, seales qumicas y genticas estn involucrados
en un proceso que requiere cuantiosos recursos para su evolucin y desarrollo.

USOS
Enfermedades cardacas
Uno de los ms relevantes avances es la aplicacin de clulas madre adultas de la
mdula sea a la recuperacin del tejido cardaco pues mejora la funcin del rgano
en vctimas de infartos o paros cardacos. Se inyectaron clulas madre de la mdula
sea del mismo paciente en las arterias coronarias y se observ aumento de la funcin
cardaca.
Mal de Parkinson
Como los implantes de tejido fetal han tenido xito parcial en la reduccin de sntomas
neurolgicos, algunos investigadores consideran, y lo estn intentando, que sera
posible estimular a las clulas madre del propio paciente para que genere dopamina.
Artritis reumatoide

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Las clulas madre adultas se emplean en la reparacin del cartlago lesionado por la
enfermedad, y es posible lograr la reduccin del dolor an temporalmente.
Diabetes del tipo I
Se encuentra en desarrollo su aplicacin en esta enfermedad empleando protenas
sobre clulas madre embrionarias para que puedan capacitarse para formar tipos de
clulas pancreticas que segreguen insulina.
BIBLIOGRAFIA:
Alberts et al. Biologa Molecular de la Clula, traduccin al espaol de la
5a edicin. Editorial Omega, Barcelona (2010). En Bs. As. distribuye Cspide.
Alberts et al. Molecular Biology of the Cell, 4th Edition:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21054/
Lodish et al. Molecular Cell Biology, 4th Edition:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21475/
Stryer,L.Biochemistry,5thEdition: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21154/
CASTAGNINO, Juan Miguel. Clulas madre embrionarias. Acta bioqum. cln.
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PEREZ MILLAN, Mara Ins; BECU-VILLALOBOS, Damasia. La protena verde
fluorescente ilumina la biociencia. Medicina (B. Aires), Ciudad Autnoma de
Buenos Aires, v. 69, n. 3, jun. 2009 . Disponible en
<http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S002576802009000400015&lng=es&nrm=iso>. accedido en 10 nov. 2015.
FIRMENICH, Beatriz M.. Estatuto ontolgico del embrin: La clonacin
teraputica.Medicina (B. Aires), Buenos Aires, v. 67, n. 4, agosto 2007 .
Disponible en <http://www.scielo.org.ar/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0025-76802007000400017&lng=es&nrm=iso>.
accedido en 10 nov. 2015

SUERTE EN EL EXAMEN CHIBOLOS PULPINES ;)

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