Reviso de Cintica Qumica

7.51 setembro 2001

Experimentos Cinticos estudam a velocidade na qual as reaes ocorrem, quer dizer como
a concentrao de algumas espcies molecular muda em funo do tempo. Numa plotagem
de concentrao versus tempo, a velocidade da reao simplesmente a inclinao. No
experimento cintico mostrado abaixo, a velocidade da reao decresce medida que a
reao ocorre.

O caminho exato pelo qual a velocidade muda em funo do tempo e como esta velocidade
varia com a concentrao dos reagentes, depende do mecanismo de ao. Estudos cinticos
podem ser usados, entretanto, para testar mecanismos propostos.
Equaes de velocidade ou leis de velocidade mostram a variao na concentrao de uma
espcie molecular em relao ao tempo (a velocidade) como uma funo matemtica da
constante de velocidade ou da constante cintica, especificada por k, e a concentrao de
cada espcie molecular que participa da reao.
Os exemplos mostrados abaixo so equaes de velocidade para reaes que ocorrem em
uma nica direo (isto , a reao reversa no considerada). Em alguma destas, a
velocidade deve ser ajustada para ser consistente com a estequiometria da reao. Assim
para 2 A ! A 2 , a concentrao do monmero varia duas vezes tanto quanto a
concentrao do dmero.
rxn (1)
U ! N
veloc= -d[U]/dt = d[N]/dt = k[U]
rxn (2)

AB! A + B

veloc= -d[AB]/dt = d[A]/dt = k[AB]

rxn (3)

A + B ! AB

veolc=-d[A]/dt = -d[B]/dt = k[A] [B]

rxn (4) 2 A ! A 2

veloc.= -d[A]/dt = d[A2]/dt = k[A] 2

rxn (5) 2 A + B ! A 2 B veloc.= -d[A]/dt =-d[B]/dt = 2d[A2B]= k[A]2[B]

Observe que em cada uma das reaes mostradas acima, os reagentes e os produtos so
diferentes espcies moleculares. Isto significa que todos os reagentes participam da reao.
Isto no ser vlido entretanto, para a reao abaixo:
rxn (6) A + B + C ! AB + C veolc=-d[A]/dt = -d[B]/dt = k[A] [B]
Aqui, a equao de velocidade idntica a reao (3) e a concentrao de [C] no aparece
na expresso da velocidade por que C no participa da reao.
Velocidade expressa em unidade de concentrao/tempo (p. ex. M.seg 1 , M.min 1, nM.
seg 1, etc.). A unidade da constante de velocidade sempre contm o tempo recproco (p.ex.
seg 1, min 1, etc.) e dependendo da reao pode tambm conter uma ou mais
concentraes recprocas. Por exemplo, se o lado direito da equao k[A] [B], ento a
constante de velocidade deve ter unidades de M 1. tempo 1 assim a expresso ter como
unidade M.tempo-1.
Ordem de reao. Toda a ordem cintica de uma reao definida pelo nmero de
molculas que aparecem no lado direito da expresso da velocidade da reao. A ordem de
reao com relao a espcies particulares definida se estas espcies aparecem uma ou
mais vezes. Por exemplo, se o lado direito de uma equao de velocidade [A]m [B]n , ento
a ordem de reao ser m + n e a ordem de reao ser "m" com relao [A] e "n" com
relao [B]. Ordem zero significa que a velocidade de reao no varia em funo da
concentrao das espcies presentes. No existem reaes bioqumicas que sejam totalmente
de ordem zero.
Para as reaes mostradas acima, rxn (1) e rxn (2) so de primeira ordem por que apenas
uma concentrao aparece no lado direito da expresso matemtica da velocidade. Rxn (3)
uma reao de segunda ordem de uma forma geral e de primeira ordem em relao [A], e
primeira ordem em relao [B]. Rxn (4) de segunda ordem de forma geral e de segunda
ordem em relao [A]. Rxn (5) de terceira ordem de forma geral de segunda ordem em
relao [A] e de primeira ordem em relao [B]. Reao (6) de segunda ordem de
forma geral e de primeira ordem em relao [A] e [B] e de ordem zero em relao [C].
Unidades e magnitude das constantes de velocidade: Para processos de primeira ordem,
incluindo mudanas conformacionais (rxn 1) e reaes de dissociao (rxn 2), a constante de
velocidade tem unidade de tempo-1. Para reaes de segunda ordem ou processos de
associao bi moleculares, como a reao rxn (3) e rxn (4), a constante de velocidade de
segunda ordem tem unidade de M-1 tempo-1.
Existem limites superiores de magnitude para constantes de velocidade de primeira e
segunda ordem. Para processos de primeira ordem, reaes mais rpidas no podem exceder
a velocidade das vibraes moleculares ou as rotaes de ligao e assim existe um limite de
2

aproximadamente 1012 seg-1 para a constante de velocidade. A reao de dobramento

protico mais rpida conhecida ocorre com uma constante de velocidade de 10 6 seg-1 .
Mudanas conformacionais simples podem ocorrer com uma constante de velocidade de 109
seg-1 . Para reaes de segunda ordem, o limite superior da constante de velocidade
determinado pela velocidade de difuso, aproximadamente 109 M-1 seg-1, uma vez que duas
molculas no podem reagir se no colidirem. No existe limite inferior para constante de
velocidade. Em geral, para um determinado intervalo de concentrao, alta constante de
velocidade significa reao rpida e baixas ou pequenas constantes de velocidade significam
reaes lentas. Observe, entretanto, que uma alta constante de velocidade garante uma alta
velocidade. A reao bi-molecular A + B ! AB pode ter uma constante de velocidade de
difuso limitada (109 M-1 seg-1) mas ela no vai ocorrer a nenhuma velocidade de a
concentrao de [A] ou [B] for zero.
Diagramas de reao coordenada, como mostrado abaixo para uma reao de
desnaturao de protena, so geralmente usados para ilustrar a idia de que existem
barreiras energticas para o processo cintico. O maior, menos estvel ponto no perfil de
energia livre chamado de estado de transio. Mesmo se a reao energeticamente
favorvel (ela ocorre baixa energia livre), existe uma certa quantidade de energia livre de
ativao necessria para que a reao ocorra. Para a reao de desdobramento protico, um
alto Gu ** necessrio para quebrar as ligaes no covalentes que mantm a estrutura
protica unida. No diagrama da reao coordenada, grandes barreiras (valores altos para
G**) representam reaes lentas e vice-versa.

Expresso da velocidade para sistemas dinmicos. Relao entre cintica e constante

de equilbrio.
Existem relativamente poucas reaes na biologia que so verdadeiramente irreversveis.
Assim, quando escrevemos a reao do tipo:
AB ! A + B

pode no ser razovel ou possvel ignorar a reao reversa. Se considerarmos ambas,

reaes de dissociao e associao unidas,
AB < == > A + B
ento a equao de velocidade combinada :
d[AB]/dt = kon [A] [B] - koff [AB]
onde kon e k off significam as constantes de velocidade de associao e dissociao,
respectivamente. A poro kon [A] [B] a velocidade na qual AB formado a partir da
associao de A + B. A poro koff [AB] a velocidade na qual AB perdido pela
dissociao. Quando o sistema atinge o equilbrio, no existira variao nas concentraes
de [AB], [A], e [B]. assim,
d[AB]/dt = kon [A] [B] - koff [AB] = 0 e

[A] [B]/[AB] = koff /kon = Kd

Isto mostra a relao entre a constante de velocidade e a constante de equilbrio para uma
reao de dissociao bi molecular. Para uma reao unimolecular como
dobramento/desdobramento de uma protena no equilbrio,
N < == > U

d[N]/dt = kf [U] - ku [N] = 0 e [U]/[N] = ku /kf = Ku

Medindo velocidades e determinando as constantes de velocidades: Existem algumas

informaes importantes para desenhar experimentos para medir as constantes de
velocidades. Primeiro, deve haver um ensaio que possa distinguir reagentes de produtos. Isto
poderia incluir ensaios espectroscpicos (UV, absorbncia, fluorescncia, dicrosmo
circular, NMR, etc.) ou ensaios nos quais reagentes e produtos so separados e identificados
atravs de suas mobilidades em gel filtrao, HPLC, eletroforese etc...
Segundo, o experimento deve focalizar predominantemente um simples processo (por
exemplo, associao ou dissociao). Para um experimento de dissociao, deve-se comear
com o complexo AB numa concentrao X e fazer-se diluies de forma que a reao de
re-associao seja insignificante. Para uma reao de associao, A e B seriam misturados
no tempo zero se escolheria o intervalo de tempo no qual no se observa uma substancial
dissociao de AB (antes da formao de AB), ou seja, onde a velocidade de dissociao
de AB seja insignificante. Para medir a velocidade de um processo uni-molecular como de
dobramento protico, deve-se iniciar com a protena desnaturada em pH baixo (ou um
desnaturante como uria) e ento coloca-la em soluo com pH 7 onde o dobramento
favorecido. Como qualquer reao que atinge o equilbrio, as velocidades de avano e de
reverso so similares. Em geral, para estudar a cintica do avano ou da reverso de
reaes isoladas, trabalha-se nas condies mais distantes do equilbrio possvel.
A questo final como analisar os dados cinticos para determinar a constante de
velocidade. Os exemplos abaixo mostram caminhos simples para analisar a cintica de
reaes uni ou bi moleculares.

Reao de primeira ordem (uni molecular)

exemplo: mudana conformacional ou reaes de dissociao
Reao:
Equao de velocidade :
Soluo integrada:

A ! B
-d[A]/dt = k[A]
d[A]/[A] = -k .dt
ln [A] = -kt + ln [Ao ]
[A] = [Ao ] e -kt

Para qualquer reao de primeira ordem (como A ! B), existir um decaimento

exponencial na concentrao do reagente, como mostrado a esquerda do diagrama abaixo,
para uma reao com [A0] = 10-3 M e k= 0,1 seg-1 . Uma vez que o produto formado com a
perda do reagente, tambm existir um aumento exponencial da concentrao do produto.
Para qualquer reao de primeira ordem, tambm existe uma relao linear entre o ln
[reagente] e o tempo, conforme mostrado no lado direito do diagrama abaixo. A inclinao
desta reta corresponde k . Observe, entretanto, que plotando ln [produto] versus tempo,
no se obtm uma reta.

Uma boa relao linear para dados de experimentos cinticos plotados com ln [reagentes]
versus tempo fornece uma evidncia que a reao de primeira ordem ou de pseudoprimeira
ordem (veja abaixo)
A meia vida (t1/2 ) para a reao o tempo requerido para que a metade dos reagentes seja
convertida em produtos. Para uma reao de primeira ordem, t1/2 uma constante e pode ser
calculado a partir da constante de velocidade como:
t1/2 = -ln(0.5)/k = 0.693/k
No experimento mostrado acima, a meia vida 6,9 segundos. A relao recproca entre meia
vida e a constante de velocidade uma forma para se ter uma idia do tempo em que a
reao ocorre. Assim, para k= 0,01 seg 1 , a meia vida aproximadamente 70 segundos.
para k= 10 seg-1 , a meia vida seria cerca de 0,07 segundos ou 70 mili-segundos. A meiavida para reaes de primeira ordem, tambm independente do ponto de partida. Se ela
demora 20 seg. para que a primeira metade das molculas reaja, ela tambm vai levar 20
segundos para que a outra metade das molculas reajam, e assim sucessivamente. O fato de
que a meia vida constante durante uma reao de primeira ordem, significa que , a
qualquer tempo uma frao constante de molculas reagentes tem energia suficiente para
atravessar a barreira cintica e assim se torne produto. Isto faz sentido por que a energia de
uma populao de molculas distribuda randomicamente de acordo com a distribuio de
Boltzmann.

Reao de segunda ordem (dimerizao)

Reao:
Equao de velocidade:
Soluo integrada:

2A ! A2
- d[A]/dt = k[A]2
d[A]/[A]2 = -k .dt
1/[A] = k (t) + 1/[A0 ]
[A] = A0 /(A0 kt + 1)

A ltima equao uma equao hiperblica e a reao de segunda ordem, e a cintica de

dimerizao tambm chamada de cintica hiperblica.
Os grficos mostrados abaixo so para a reao de dimerizao com [A0 ] = 10-6M e
k
5
-1
-1
= 2x10 M seg . O decaimento de [A] com o tempo (grfico da esquerda) nesta reao
de segunda ordem parece superficialmente similar reao de primeira ordem descrita
acima mas na verdade diferente como pode ser visto na equao que descreve a variao
de [A] com o tempo.

O caminho mais simples para determinar a constante de velocidade neste caso,

plotar 1/[A] versus tempo e determinar a inclinao a qual ser igual a k. Observe,
entretanto, que plotando 1/ [A2] versus tempo no obtemos uma linha reta. A expresso para
a meia-vida desta reao de segunda ordem :
t 1/2 = 1/(k[A0 ])
Para os dados mostrados, a meia vida 5 segundos. importante notar, entretanto,
que as meias-vidas para reaes de segunda ordem, so fundamentalmente diferentes para as
de primeira ordem. No caso de primeira ordem, t1/2 independente da concentrao inicial
da reao. Aqui, a mesma reao realizada com diferentes concentraes iniciais tero
diferentes meias-vidas. Alm disso, se demora 5 segundos para que metade das molculas
reaja com uma dada concentrao de A, ento levar 10 segundos para que a outra metade
das molculas reajam. Isto num sentido intuitivo, por que a coliso entre duas molculas de
A torna-se mais difcil medida que a concentrao de A diminui.
Reaes bi-moleculares com reagentes diferentes:
! AB

Reao:

A+B

Equao de velocidade :

-d[A]/dt = -d[B]/dt = k[A][B]

Soluo integrada: COMPLICADA EXCETO SOB CONDIES ESPECIAIS

Devido ao fato de que uma soluo geral para esta classe de reaes bi-moleculares
complicada, trs caminhos so geralmente utilizados para determinar a constante de
velocidade de segunda ordem.
(1) Misturar A e B no tempo zero e estimar a velocidade inicial da reao com
diferentes concentraes dos reagentes. No t=0, [A]=[A0 ] e [B]=[B0], e a constante
de velocidade calculada como:
k = (velocidade inicial)/([A0 ][B0])
(2) Fazer o experimento com [A0] = [B0]. Agora a soluo integrada idntica reao
de dimerizao mostrada acima e a constante de velocidade pode ser obtida pelo
grfico de 1/[A] ou 1/[B] versus tempo.
(3) Fazer o experimento onde [A0] >> [B0] ou vice-versa. Se A est em grande excesso
em relao a B, ento a concentrao de [A] no ir variar significativamente
durante a reao e a equao de velocidade pode ser escrita como:
-d[B]/dt = k[A0 ][B] = k aparente [B] onde k aparente = k[A0]

Observe que esta expresso de velocidade agora tem a mesma forma e a mesma
soluo integrada do que uma reao de primeira ordem. Poderamos agora plotar ln [B] vs.
tempo e obter uma linha reta com uma inclinao igual a k [A0]. Pela manipulao das
concentraes iniciais, ns transformamos uma reao bi-molecular em uma reao de
pseudoprimeira-ordem. Ao contrario de uma reao de primeira ordem real, entretanto,
no obtemos o mesmo valor de k aparente nos experimentos realizados com diferentes
concentraes iniciais de [A0].
Testando Mecanismos de reao: Um dos usos da cintica em bioqumica estabelecer
qual o modelo que melhor representa a reao de interesse. Por exemplo, temos uma
interao monomrica de uma protena ligadora de DNA (R) que liga a um fragmento de 20
pares de bases (D) mas no sabemos se a protena liga como um monmero ou um dmero.
Se medirmos a velocidade inicial da reao de associao e encontrarmos que varia
linearmente com [R], ento o modelo preferencial seria:
R + D ! RD

desde que

d[R]/dt = -k[R][D]

Inversamente, se ns medirmos a velocidade inicial da reao e associao e encontrarmos

que ela varia na proporo de [R] 2 ento isto suporta o modelo:
2R + D ! R2 D desde que d[R]/dt = -k[R]2[D]
Experimentos cinticos, por si s, tambm podem ser usados para excluir certos modelos,
mas no podem ser usados para distinguir modelos que tenham a mesma dependncia de
concentrao para velocidade. No exemplo acima, especificamos que a protena ligante de
DNA livre era monomrica, e se no conhecssemos a forma oligomrica para a protena
livre? Ento, a variao linear da velocidade inicial de associao aumentando com o
aumento da concentrao inicial da protena seria consistente com o modelo de reao
expresso abaixo:
R + D ! RD; ou R2 + D ! R2 D; ou R4 + D ! R4 D; etc.
Neste caso, uma informao estrutural adicional sobre a forma oligomrica da protena livre
e/ou ligada seria necessria para distinguir entre os diferentes modelos de reao.

POSSVEIS PONTOS DE CONFUSO: Reaes do tipo 2R + D ! R2D; 2R2 + D ! R4D

e 2R4 + D ! R8D todas predizem uma dependncia quadrada da velocidade de associao
sobre a concentrao protica por que, em cada caso duas molculas livres da protena se
combina no complexo. De forma similar, R + D! RD; R2 + D ! R2D; e R4 + D ! todas
predizem a mesma dependncia linear da velocidade de associao sobre a concentrao
protica por que no existe variao na forma oligomrica da protena quando passa da
forma livre para forma ligada.
Assim a informao chave para a cintica no se um oligmero est ligado mas se existe
variao na forma oligomrica durante a reao de ligao.
Reaes de passos mltiplos: Reaes freqentemente no ocorrem num passo simples
mas envolve a formao de um ou mais intermedirios. Considerando a reao 2R + D!
R2D discutida acima. improvvel que trs molculas (2 de protena e um stio do DNA)
iro colidir no mesmo instante na soluo para formar um complexo tri-molecular. Existem
dois caminhos distintos nos quais a associao do complexo R2D deve ocorrer atravs de
sucessivas reaes bi-moleculares:
2R + D ! R2 + D ! R2D e/ou

2R + D ! RD + R ! R2D

os quais so mostrados no diagrama abaixo:

Estes mecanismos no precisam ser mutuamente exclusivos, mas se apenas um ou outro

representa o caminho da associao, que tipo de experimento poderia ajudar a decidir entre
um modelo ou outro? Um deles seria a identificao de possveis intermedirios. Ser que a
protena forma um dmero na ausncia de DNA em concentraes suficientemente altas?
Seria a espcie intermediria, com comportamento eletrofortico esperado para RD, vista
10

em um experimento de separao em gel? A deteco das espcies R2 ou RD, por si mesma,

no comprovaria que estas espcies participam como intermedirios iniciais de uma
determinada via de reao. Por exemplo, desenhando a ligao de DNA-dmero como:

mas talvez as espcies intermedirias R2 e RD tenham estruturas do tipo

Tais espcies poderiam ser formadas mas no ter relevncia no caminho de associao. Se
as espcies R2 e RD apresentarem estruturas mais razoveis como

ento isto indicaria a possibilidade de que elas foram associadas como intermedirios,
porm no necessariamente seja uma garantia disso.
A regra da significncia cintica afirma que para uma espcie ser um autntico
intermedirio numa reao, ela deve se formar e desaparecer numa velocidade maior do que
a do produto final. Assim, se as espcies R2 ou RD forem detectadas na reao mas
aparecem numa velocidade menor do que a formao de R2D, ento isto as excluiria como
intermedirios significantes no caminho da associao. De forma semelhante, se R2 for um
autentico intermedirio, ento a adio de D a R2 purificado resultar na formao de R2D a
uma velocidade muito mais rpida do que seria com 2R e D.

Passo velocidade determinante: Em reaes de mltiplos passos, um passo elementar

muito mais lento do que outros passos e se torna o determinante da velocidade. Isto quer
dizer, a velocidade de toda a reao determinada pela velocidade deste passo ou desta
etapa lenta. Em alguns casos, aumentando a velocidade de alguns passos elementares
observa-se um efeito insignificante na velocidade total da reao. Em sistemas biolgicos,
11

os passos velocidade determinante ou velocidade limitante, so os passos susceptveis a

regulao.
No exemplo unimolecular mostrado abaixo, a constante de velocidade para o passo B ! C
muito menor do que a constante de velocidade do passo A ! B. Assim, B! C o passo
lento e fundamental e determinante da velocidade (velocidade limitante).

Quando escrevemos reaes como acima, sem reaes reversas, estamos assumindo que a
constante de velocidade para estas reaes reversas muito pequena em relao a constante
de velocidade para as reaes de avano. Se, neste modelo, iniciarmos a reao com A puro,
o que acontecer? A rapidamente ser convertido em B, mas como B convertido em C
mais lentamente, a concentrao de B ir aumentar, como mostrado abaixo, e C aparecer
com uma cintica muito menor.

Aqui, B est de acordo com a lei de significao cintica, uma vez que se forma e
desaparece mais rapidamente que C aparece. Observe tambm que a formao de C ocorre
com uma meia vida de 0,7 segundos e a velocidade de 1 seg 1 , a magnitude da constante
de velocidade para o passo elementar e mais lento.

12

Agora considere a mesma reao porm com as constantes de velocidade invertidas:

Agora A !B o passo velocidade limitante. A medida que B formado, ele rapidamente

convertido em C e, como mostrado abaixo, relativamente pouco B se acumula. Em geral, os
intermedirios s se acumulam em quantidades significantes quando eles precedem um
passo lento ou velocidade limitante de todo o processo.

13

Nesta reao, B forma-se mais rpido do que C no incio da reao (satisfazendo a regra da
significncia cintica) mas pode ser difcil de mostrar experimentalmente a menos que se
utilize um mtodo extremamente sensvel para medir pequenas quantidades de B e C.
Novamente, observe que a formao de C ocorre com uma meia vida de 0,7 segundos e a
velocidade aproximadamente de 1 seg 1 , o qual a constante de velocidade para o passo
elementar e mais lento.

Velocidade Limitante pr-equlibrio: At aqui, temos enfocado reaes que ocorrem

numa simples direo. Uma classe comum de reaes cinticas envolve situaes como:

Neste caso, uma vez que uma molcula de B formada ela pode formar C ou se converter
novamente em A . Com as constantes de velocidades mostradas, deveria estar claro que a
maioria de B seria revertido em A por que a constante de velocidade para este passo 10
vezes maior do que a constante de velocidade para a converso de B! C. Assim, deveria
demorar 10 vezes mais, para formar tanta quantidade de C neste modelo, do que no modelo
onde no temos a converso de B! A.
Nestes sistemas, A e B efetivamente se equilibram.
-1
-1
Kab = [A]/[B] = (200 s )/(1 s ) = 200.

assim B nunca ser maior do que A . A velocidade de formao de C apenas 20 s-1 [B].
Substituindo [B] temos
d[C]/dt = (20 s-1)/(200) [A] = 0.1 s-1 [A]
Assim a meia vida de formao de C aproximadamente de 7 segundos, considerando que
era de 0,7 segundos quando a converso de B! A no ocorria. Este o mesmo resultado
que chegamos acima apenas considerando a velocidade em que B se forma como
intermedirio entre A e C . Observe que neste caso, a reao global mais lenta do que
qualquer outro passo.

14

O caso discutido acima um exemplo especfico para a reao geral:

Neste tipo de reao, se k-1 >> k2 (B forma A muito mais rapidamente do que forma C),
ento existir um pr-equilibrio velocidade limitante e a velocidade de formao de C ser
dependente das trs constantes de velocidade.
d[C]/dt = (k1 k2)/(k-1) [A]

equao 3.1

Se, entretanto, assumirmos que k2 >> k-1 (B forma C muito mais rapidamente do que forma
A), ento podemos efetivamente ignorar a reao reversa de B ! A e a nica questo ser
se k1 ou k2 o passo velocidade limitante.

15

Aproximao do equilbrio estacionrio: A cintica de reao deste tipo tambm pode ser
analisada escrevendo a expresso global para a variao de B e ajustando esta como
sendo zero. Fazendo isto, estamos assumindo que a concentrao de B rapidamente atinge
uma constante, um equilbrio estacionrio cujo valor no muda apreciavelmente durante a
reao.
d[B]/dt = k1[A] - k-1[B] - k2[B] = k1[A] - (k-1+k2)[B] = 0
(k-1+k2)[B] = k1[A]
[B] = (k1)/(k-1 + k2) [A]
substituindo d[C]/dt = k2[B] temos:
d[C]/dt = (k1k2)/(k-1 + k2) [A]
agora se, k-1 >> k2
d[C]/dt (k1 k2)/(k-1) [A]

esta a mesma equao: 3.1

em contraste, se k2 >> k-1

d[C]/dt (k1k2)/(k2) [A] = k1[A]

equao: 3.2

A equao 3.2 equivalente a se dizer que o passo k-1 o passo velocidade limitante de
todo o processo.
A aproximao do estado de equilbrio estacionrio para um intermedirio no se aplica se
o intermedirio formado a uma velocidade muito maior do que sua quebra. Por exemplo,
com as constantes de velocidade mostradas abaixo:

B formado muito mais rapidamente do que desaparece e a concentrao de B ir aumentar

mais do que atingir o equilbrio estacionrio. (Observe que a cintica aqui deveria ser muito
similar quelas mostradas na pgina 12) A maior parte de B ir formar C ao invs de voltar
a A e assim a reao global deve ocorrer a uma constante de velocidade de
aproximadamente 1 seg ---1 . Embora k2>> k-1 usando a equao 3.2 (a qual s valida se
d[B]/dt 0) neste exemplo poderia nos levar a uma resposta errada uma vez que no
vlido assumir o equilbrio estacionrio.

16

Estas idias gerais sobre um rpido pr-equilbrio e a aproximao do estado de

equilbrio estacionrio para intermedirios, so igualmente aplicveis a reaes nas quais o
primeiro passo bi-molecular. Por exemplo,

Com as constantes de velocidades mostradas, AB ir dissociar a A + B numa

velocidade 10 vezes mais rpido que se isomeriza em AC. Comparado reao na qual a
velocidade de dissociao de AB foi insignificante, isto ir demorar a formao de AC num
fator de aproximadamente 10. Ns podemos novamente fazer uma aproximao de estado
de equilbrio estacionrio para [AB] e deduzir a seguinte expresso:
d[AC]/dt = (k1k2)/(k-1 + k2) [A][B] (k1k2)/(k-1 ) [A][B]

desde que k2 >> k-1

Veremos expresses como esta ltima em alguns tipos de reaes catalisadas por enzimas.
Novamente, supomos o estado de equilbrio estacionrio para analisar o processo global,
onde a velocidade de formao de AB muito mais rpida do que sua quebra.
Quando os intermedirios no podem ser determinados diretamente: Algumas vezes os
intermedirios numa determinada reao no podem ser isolados como espcies moleculares
distintas ou caracterizadas diretamente. Nestes casos, a existncia de intermedirios,
muitas vezes derivada da passagem da fase de cintica lenta para a de grande acelerao, ou
de outros comportamentos multifsicos (p.ex. quando se observa o aparecimento de duas
fases exponenciais para uma reao unimolecular)
Entretanto, mesmo quando a cintica de uma reao unimolecular mostra uma nica
fase exponencial, a ausncia de intermedirios detectveis no pode ser usada como prova
de estes no existam. Isso quer dizer que, se os intermedirios existem, eles devem
desaparecer a velocidade significantemente mais rpida do que eles so formados. Isto, por
sua vez, geralmente significa so relativamente mais instveis do que os reagentes e/ou os
produtos. Por exemplo, durante o processo de dobramento protico s so detectadas
espcies moleculares que esto totalmente desnaturadas ou totalmente na forma nativa.
Neste caso, parece improvvel que uma cadeia polipeptdica desordenada possa adquirir a
conformao nativa atravs de um simples passo, uma vez que isto implicaria no ajuste
simultneo de centenas de ngulos de ligao simultaneamente. Este provavelmente um
caso no qual quaisquer que sejam os intermedirios eles so instveis e no se acumulam
durante o curso da reao.
Diagramas das reaes coordenadas para reaes com intermedirios: Conforme
observado acima, quando se escreve uma reao com mltiplos passos que ocorre em uma
nica direo, simplesmente ignoramos as reaes reversas o que justificado se estas

17

reaes ocorrem a uma constante de velocidade muito menor do que as que ocorrem no
sentido do avano da reao. O diagrama da reao coordenada para este tipo de situao
tem uma representao conforme mostrado abaixo:

Observe que a energia livre de A maior do que a de B a qual maior do que para C. A
reao ocorre no sentido decrescente. Tambm, a barreira energtica a ser vencida entre B e
C maior indicando que este o passo mais lento. Finalmente, B est localizado no fundo
de um "vale" profundo de baixa energia indicando que ele deve se acumular.
No prximo diagrama de reao coordenada, a primeira barreira a ser ultrapassada a
maior, e assim correspondendo ao passo mais lento na reao. B agora est num "vale"
muito mais raso do que no exemplo anterior e dessa forma vai se acumular menos .

18

Se agora ns considerarmos uma rpida reverso de B ! A, ns teremos um diagrama de

reaes coordenadas como o mostrado abaixo:

A primeira barreira ainda corresponde ao passo mais lento por que, distncia de A
para ultrapassar a primeira barreira, representa a maior variao de energia livre. B,
entretanto, agora menos estvel (tem maior energia livre) do que A . Uma vez que B
produzido, a reao reversa para A cinticamente mais favorvel do que a reao de
avano at C uma vez que a barreira energtica no sentido reverso menor do que no
sentido do avano. Em casos como este, onde existe um passo velocidade limitante prequilbrio, o ponto de maior diferena de energia livre (agora o pico entre B e C) no
representa o passo mais lento, mas representa o passo velocidade limitante ou velocidade
determinante da reao global.
Considere, por exemplo, o que aconteceria se a constante de velocidade para a converso de
B ! C fosse 100 vezes maior:

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Agora, uma vez que as molculas A sejam transformadas em B, elas vo imediatamente se

transformar em C. A barreira entre A e B novamente se tornou o passo velocidade limitante.
Acelerando a reao B ! C, a reao global agora ocorre mais rpido j que no h um
passo velocidade limitante pr-equilbrio. Este um caso onde a regulao de um passo que
no seja o passo mais lento, pode ter conseqncias cinticas na reao global de A ! C.

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