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DISCIPLINA: BIOLOGIA

PROFESSOR: JULIO ANDRADE


Sumário
• Histórico

• Introdução

• Conceitos

• Classificação e Nomenclatura

• Fatores que Influenciam a Atividade Enzimática

• Enzimas X Catalisadores Químicos

• Aplicações

• Conclusão

• Referências
HISTÓRICO
• Catálise biológica → início séc. XIX
– digestão da carne: estômago;
– digestão do amido: saliva.

• Década de 50
– Louis Pasteur - concluiu que a fermentação do açúcar em álcool
pela levedura era catalisada por “fermentos” = enzimas

• Eduard Buchner (1897)


– extratos de levedo podiam fermentar o açúcar até álcool;
álcool
– enzimas funcionavam mesmo quando removidas da célula viva.
• James Sumner (1926)
– Isolou e cristalizou a urease;
– Cristais eram de proteínas;
– Postulou que “todas as enzimas são proteínas”.

• John Northrop (década 30)


– Cristalizou a pepsina e a tripsina bovinas;

• Década de 50 – séc. XX
– 75 enzimas → isoladas e cristalizadas;
– Ficou evidenciado caráter protéico.

• Atualmente + 2000 enzimas são conhecidas.


INTRODUÇÃO
ENZIMAS Aminoácidos:

•Definição:
– Catalisadores biológicos; R C* COOH

– Longas cadeias de pequenas moléculas chamadas


aminoácidos.
NH2
•Função:
– Viabilizar a atividade das células, quebrando moléculas ou
juntando-as para formar novos compostos.
•Com exceção de um pequeno grupo de moléculas de RNA com
propriedades catalíticas, chamadas de RIBOZIMAS, todas as
enzimas são PROTEÍNAS.

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ENZIMAS – PROTEÍNA

Classificação proteínas

Proteínas globulares Proteínas fibrosas


Estrutura das proteínas

Primaria Secundaria Terciária Quaternária

ENZIMAS

Proteínas globulares Proteínas com alto peso molecular,


maioria entre 15 a 1000 Kilo Daltons
Unit (KD)
Estrutura terciária OBS: 1 Dalton = 1 unidade de peso
molecular (AMU)

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ENZIMAS –
COMPONENTES DA REAÇÃO

E+S ES P+E

Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
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ENZIMAS – COFATOR

 Algumas enzimas que contêm ou necessitam de elementos


inorgânicos como cofatores
ENZIMA COFATOR
PEROXIDASE Fe+2 ou Fe+3

CATALASE

CITOCROMO OXIDASE Cu+2

ÁLCOOL DESIDROGENASE Zn+2

HEXOQUINASE Mg+2

UREASE Ni+2
• Definição:
– Catalisadores biológicos;
– Longas cadeias de pequenas moléculas chamadas aminoácidos.

• Função:
– Viabilizar a atividade das células, quebrando moléculas ou
juntando-as para formar novos compostos.

• Com exceção de um pequeno grupo de moléculas de RNA com


propriedades catalíticas, chamadas de RIBOZIMAS,
RIBOZIMAS todas as
enzimas são PROTEÍNAS (globulares, de estrutura terciária).
Estrutura Holoenzima
Enzimática

Proteína Cofator
Cofator
Ribozimas
Apoenzima ou Pode ser:
Apoproteína • íon inorgânico
• molécula orgânic
RNA

Se covalente Coenzima

Grupo Prostético
ENZIMAS:

• Apresentam alto grau de especificidade;


• São produtos naturais biológicos;
• Reações baratas e seguras;
• São altamente eficientes, acelerando a velocidade das reações (108 a 1011
+ rápida);
• São econômicas, reduzindo a energia de ativação;
• Não são tóxicas;
• Condições favoráveis de pH, temperatura e concentração do substrato
CONCEITOS
As enzimas...

• Aceleram reações químicas

Catalase
H2O2 H2O + O2
Ex: Decomposição do H2O2

Condições da Reação Energia livre de Ativação Velocidade


KJ/mol Kcal/mol Relativa

Sem catalisador 75,2 18,0 1

Enzima Catalase 23,0 5,5 6,51 x 108


• Não são consumidas na reação

Catalase
H2O2 H2O + O2

E+S E+P
• Atuam em pequenas concentrações

decompõe
1 molécula de Catalase 5 000 000 de moléculas de
H2O2
pH = 6,8 em 1 min

Número de renovação = n° de moléculas de substrato convertidas


em produto por uma única molécula de enzima em uma dada unidade
de tempo.
• Não alteram o estado de equilíbrio
•Abaixam a energia de ativação;

Energia

Energia de ativação sem enzima


Energia de ativação com
Diferença entre S enzima
a energia livre P
de S e P

Caminho da Reação
• Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das enzimas
originou → Chave-Fechadura  , que considera que a enzima
possui sitio ativo complementar ao substrato.
• Koshland (1958): Encaixe Induzido, enzima e o o substrato
sofrem conformação para o encaixe. O substrato é distorcido para
conformação exata do estado de transição.
NOMENCLATURA E
CLASSIFICAÇÃO
• Século XIX - poucas enzimas identificadas

• Adição do sufixo “ASE” ao nome do substrato:


Ex:
- gorduras (lipo - grego) – LIPASE
- amido (amylon - grego) – AMILASE

• Nomes arbitrários:
- Tripsina e pepsina – proteases
• 1955 - Comissão de Enzimas (EC) da União Internacional de
Bioquímica (IUB) → nomear e classificar.

• Cada enzima → código com 4 dígitos que caracteriza o tipo de


reação catalisada:
•1° dígito - classe
•2° dígito - subclasse
•3° dígito - sub-subclasse
•4° dígito - indica o substrato
FATORES QUE
INFLUENCIAM A
ATIVIDADE ENZIMÁTICA
A atividade enzimática é influenciada por:

• pH;

• temperatura;

• concentração das enzimas;

• concentração dos substratos;

• presença de inibidores.
pH

• O efeito do pH sobre a enzima deve-se às variações no


estado de ionização dos componentes do sistema à medida
que o pH varia.

• Enzimas → grupos ionizáveis, existem em ≠ estados de


ionização.
TEMPERATURA

∀ ↑ temperatura dois efeitos ocorrem:


(a) a taxa de reação aumenta, como se observa na maioria das
reações químicas;
(b) a estabilidade da proteína decresce devido a desativação
térmica.

A temperatura ótima para que


a enzima atinja sua atividade
máxima, é a temperatura
máxima na qual a enzima
possui uma atividade cte. por
um período de tempo.
CONCENTRAÇÃO DOS SUBSTRATOS

• [S] varia durante o curso da reação à medida que S é convertido


em P.
• Medir Vo = velocidade inicial da reação.

•[E] = cte.
vo
•[S] pequenas → Vo↑ linearmente. Vmax
•[S] maiores → Vo↑ por incrementos cada
vez menores.
•Vmax → [S]↑ → Vo↑ insignificantes.
•Vmax é atingida → E estiverem na forma
ES e a [E] livre é insignificante, então, E
saturada com o S e V não ↑ com ↑ de [S].
[S]
PRESENÇA DE INIBIDORES

• Inibidor é qualquer substância que reduz a velocidade de uma


reação enzimática.

INIBIDORES

REVERSÍVEIS IRREVERSÍVEIS

COMPETITIVOS NÃO COMPETITIVOS INCOMPETITIVOS


CINÉTICA
ENZIMÁTICA
• Cinética Enzimática é estudada para:

• Determinar as constantes de afinidade do S e dos inibidores;

• Conhecer as condições ótimas da catálise;

• Ajudar a elucidar os mecanismos de reação;

• Determinar a função de uma determinada enzima em uma rota


metabólica.
ENZIMAS
X
CATALISADORES QUÍMICOS
Característica Enzimas
Especificidade ao substrato alta
Natureza da estrutura complexa
Sensibilidade à T e pH alta
Condições de reação (T, S e pH) suaves
Custo de obtenção (isolamento e purificação) alto
Natureza do processo batelada
Consumo de energia baixo
Formação de subprodutos baixa
Separação catalisador/ produtos difícil/cara
Atividade Catalítica (temperatura ambiente) alta
Presença de cofatores sim
Estabilidade do preparado baixa
Energia de Ativação baixa
Velocidade de reação alta
APLICAÇÕES
ENZIMAS – APLICAÇÕES
 Proteases

 Leite: na preparação do leite de soja.

 Carnes e Peixes: recuperação de proteínas do osso ou espinha.

 Vinhos: clarificação.

 Queijo: coagulação da caseína.

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TIPOS DE APLIÇÕES INDUSTRIAIS

• Alimentos

• Rações animais

• Papel e celulose

• Couro

• Têxtil
ALIMENTOS

• Indústria de azeite de oliva:


- Aplicação de polygalacturonase e pectinesterase na
melhoria de aspectos organolépticos e estabilidade a
longo prazo.

• Panificação:
- Melhoria de cor, sabor e estrutural através de
preparado enzimático que contém alfa-amilase fúngicas.
Atua sobre a farinha de trigo, acelerando o processo
de fermentação devido a uma maior formação de
açúcares para o fermento.
RAÇÕES ANIMAIS

• Utilização de enzimas nas rações para leitões durante o período


de lactação:

- Emprego de Xilanase, Beta-glucanase e Alpha-amylase


com o objetivo de digestão de amido e, em decorrência
disso, ganho de peso e abate precoce.
INDÚSTRIA DE PAPEL E CELULOSE

•Remoção de depósitos em máquinas de papel:

- Substituição de álcalis e ácidos fortes por enzimas


com o objetivo de assegurar a integridade física dos
funcionários e cumprir leis ambientais.
CONCLUSÃO
• Ampla aplicabilidade da atividade enzimática

• Vantagens frente aos catalisadores químicos

• Importância de fatores externos

• Necessidade de maiores estudos para viabilizar o uso de


diversas enzimas
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ENZIMAS –
INFLUÊNCIA DA TEMPERATURA

 O efeito da temperatura depende:


- pH e a força iônica do meio;
- a presença ou ausência de ligantes.

 Acima desta temperatura, o ↑ velocidade de reação devido a


temperatura é compensado pela perda de atividade catalítica
devido a desnaturação térmica.
ENZIMA TEMPERATURA ÓTIMA (°C)

Pepsina 31,6

Tripsina 25,5

Urease 20,8
REFERÊNCIAS
- JUNIOR, AGENOR FURIGO; DIRLEY, DIEDRICH KIELING. Enzimas.
Aspectos Gerais. Florianópolis, 2002.

- JUNIOR, AGENOR FURIGO; PEREIRA, ERNANDES BENEDITO. Enzimas


e suas Aplicações. Cinética Enzimática. Florianópolis, 2001.

-http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/

-http://www.suino.com.br/nutricao

-http://www.aboissa.com.br/azeitedeoliva/enzima.htm

-http://www.deb.uminho.pt/imprensa/curtumes.htm

-http://www.mylner.com.br/enzimas.htm

-http://www.novozymes.com/library/Publications/Biotimes_Sprog/pwhere.pdf