UNIVERSIDADTECNICADEMANABI

FACULTADDECIENCIASDELASALUD
ESCUELADELABORATORIOCLINICO
TEMA:
Mutagenesis de ADN clonado
DOCENTE:
DRA. Mayra Parraga
CURSO:
Segundo c

INTEGRANTES:
Alcvar Macas Luis Antonio
Basurto Moreira Melanie
Milenka
Cobea Aguilar Jennifer
Maricela
Gilces Anchundia Estefana
Monserrate
Parrales Mendoza Mara Jos
Vega Lpez Melisa Juliana
Vera Mosquera Laura Leonela

PALABRA
S
CLAVES

genes
Fenotipo
Mutantes
ADN recombnate
Mutagenesis
Transgnicos
recombinacin homologa
in vitro
Oligonucletido
Hbridos
Antisentido
Microinyector

GLOSARI
O

FENOTIPO.- Es cualquier caracterstica o rasgo observable de un organismo,

como su morfologa, desarrollo, propiedades bioqumicas, fisiologa y
comportamiento
ADN RECOMBINANTES.- Es resultado del uso de diversas tcnicas que los
bilogos moleculares utilizan para manipular las molculas de ADN y difiere de
la recombinacin gentica que ocurre sin intervencin dentro de la clula.
MUTAGENESIS .- Engenticase denominamutagnesisa la produccin
demutacionessobreADN,clonadoo no. De realizarsein vitro, dicha alteracin
puede realizarse al azar (mutagnesis al azar), sobre cualquier secuencia, o bien
de forma dirigida (mutagnesis dirigida) sobre una secuencia conocida y en la
posicin de inters.
TRANSGENICOS.- Los transgnicos sonorganismos que han sido modificados
genticamente, intercambiando genes con otras especies.
RECOMBINACION HOMOLOGA.- tambin conocida comorecombinacin
general, es un tipo derecombinacin genticaen la cual las secuencias
denucletidos son intercambiadas entre dos cadenas similares o idnticas
deADN. El proceso incluye varios pasos de ruptura fsica y lareuninfinal del
ADN.
IN VITRO.- e refiere a una tcnica para realizar un determinado experimento en
untubo de ensayo, o generalmente en un ambiente controlado fuera de

OLIGONUCLETIDO .-Unoligonucletidoes una secuencia corta

deADNoARN, con cincuenta pares debaseso menos.
PLASMIDO.- Losplsmidosson molculas deADNextracromosmico circular
que se replican y transmiten independientes del ADNcromosmico.
NUCLEOTIDO.-Losnucletidossonmolculas orgnicasformadas por la
unincovalentede unmonosacrido de cincocarbonos(pentosa), unabase
nitrogenaday ungrupo fosfato. Elnuclesidoes la parte del nucletido formada
nicamente por la base nitrogenaday lapentosa.

 Existen muchos procedimiento de mutagenesis in vitro

para alterar genes clonados , que permite la
introduccin de lecciones, inserciones o alteraciones
de nucletidos unidos.
Un mtodo habitual de mutagenesis es el uso de
oligonucletidos sintticos para generara cambios de
nucletidos en una secuencia de ADN.
La molcula de ADN de nueva sntesis que contienen
la mutacin pueden ser aislada y caracterizada

 Ejemplo: pueden modificarse aminocidos especficos

de una protena para poder caracterizar su papel en la
funcin proteica.

La mutagenesis in vitro ha permitido la

caracterizacin en detalle del papel funcional tanto de
las secuencia reguladoras como de las codificantes
para protena de los genes clonados .

Introduccin de mutacione
en genes celulares

La transferencia de
genes clonados
dentro de las
clulas
proporciona una
poderosa
herramienta en el
estudio de la
estructura y
funcin gnica

En clulas animales la
recombinacin entre
el ADN trasferido y su
gen homologo
Es un hecho poco
frecuente, la
inactivacin de genes
por este mtodo es
mas difcil que en
levaduras
La mayor parte del
ADN transfectado se
integra en el genoma
receptor en sitios al
alzar por
recombinacin con
secuencias no
relacionadas

INTERFERENCIA CON LA EXPRESIN GENTICA CELULAR

Como alternativa a la inactivacin, se pueden emplear

una serie de tcnicas para interferir especficamente
con la expresin o funcin gentica. Un mtodo que se
ha empleado para inhibir la expresin de un gen diana
deseado es la introduccin de cidos nucleicos anti
sentido en clulas de cultivo.

En los ltimos aos la interferencia por

ARN(ARNi) ha emergido como un mtodo
altamente eficaz y utilizado para interferir
con la expresin gentica a nivel del
ARNm.

INTERFERENCIA DE ARN

Las molculas de ARN de doble hebra son escindidas por la enzima Dicer
en ARN pequeos e interferentes (siRNA: short interfering RNA). Los
siARN se asocian con el complejo de silenciador inducido por
RNA(RISC:RNA induced silencing complex) y son desenrrollados. La
hebra antisentido del siARN dirige a RISC a un ARNm homologo, que es
escindido por una de las protenas RISC. El complejo RISC-siARN es
liberado y puede participar en posteriores ciclos de degradacin de ARNm.

MUCHAS GRACIAS