Microscopio compuesto

Objetivos de un microscopio moderno.

Un microscopio compuesto tiene ms de un lente objetiva. Los microscopios

compuestos sirven especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en
lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes
de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est
conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener,
elevar y detener los instrumentos a observar.

El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de

tal manera que producen las ranuras de luz.

El sistema de lentes comprende las partes del microscopio que permiten un

aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de
antigel subsecuente".
ndice
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1Parte mecnica del microscopio

2Sistema ptico

3Sistema de iluminacin

4Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio

5Campo del microscopio

6Tipos de microscopios
6.1El microscopio electrnico

6.1.1Invencin del microscopio electrnico

6.1.2Funcionamiento del microscopio electrnico

6.1.3Tipos de microscopios electrnicos

6.1.4Microscopio electrnico de barrido

6.2Microscopio quirrgico

7Medicin a travs del microscopio

8Mantenimiento del microscopio

9Conclusiones

10Vase tambin

Parte mecnica del microscopio[editar]

Esquema de un micoscopio ptico.

La parte mecnica del microscopio comprende el pie o la base, el tubo, el revlver, el asa,
la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de
iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene

por lo general forma de Y o bien es rectangular.

La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la

base por su parte inferior mediante unabisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para
mejorar la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su
porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

El can : tiene forma cilndrica. El can se encuentra en la parte superior de la

columna, enfoca el objeto mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten
que el tubo se mueva mediante los tornillos.

El tornillo macromtrico o macroscpico: girando este tornillo, asciende o

desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un
mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la
preparacin.

El tornillo micromtrico o microscpico: mediante el ajuste fino con movimiento

casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque
exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de
0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de
los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca el objeto que se va a

observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los
rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece
inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede
centrarse o producir movimientos circulares.

Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar el objeto. Se
encuentran en la platina.

Ajuste ptico:este gira el lente para aumentar o disminuir la vision a travs del
microscopio

El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los
objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

Sistema ptico[editar]
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes
que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una
imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a

la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la
imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de
aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores
a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de
medir el tamao del objeto observado.

Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y

producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se
hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente
son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna

entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que
indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por
ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el
objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada
para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms
frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de

lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de
aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal
entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de
100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su
extremo inferior.

Sistema de iluminacin[editar]
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine
la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada.
Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de

tungsteno sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se
sita un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo,
que permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada,
para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del

microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los
microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de
movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con
iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no
poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.

Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es

concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de
luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo
de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara
superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran
abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden
que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La
abertura numrica mxima del condensador debe ser al menos igual que la del
objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su poder separador. El
condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante
un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia.

Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su

abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para
aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere
aprovechar la resolucin del sistema ptico.

la linterna:esta sustituye al espejo en diferentes tipos de microscopios, tiene la

funcin de iluminar la muestra mejor que usando el espejo ya que ms cantidad de luz
pasa a travs de la muestra.

Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio[editar]

El haz luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a travs del diafragma al
condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la luz es
concentrada sobre la preparacin a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue
por el tubo hasta llegar al ocular, donde es captado por el ojo del observador.
Propiedades del microscopio

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad

del microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que
pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su
distancia es menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por la
longitud de onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder
separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la
longitud de onda de la luz azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador
llega hasta 10 .

Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo

respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de
las aberraciones de las lentes utilizadas.

Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin

entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere
decir que si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos
viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de
la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est
proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al
objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y
un ocular de 10X, la ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X =
450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin
expresado como 450 dimetros.

Campo del microscopio[editar]

Paramecium aurelia. Microscopio ptico. El mejor conocido de los ciliados. Las burbujas que se ven
son vacuolas. Todo el cuerpo est cubierto de cilios, que se ven borrosos debido a sus rpidos
movimientos.

Se denomina campo del microscopio al crculo visible que se observa a travs del
microscopio. Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a
travs del microscopio.
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es
inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el dimetro del campo
del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrmetro, al que se har
referencia en el siguiente punto.

Tipos de microscopios[editar]
Existen diversas clases de microscopios, segn la naturaleza de los sistemas de luz, y
otros accesorios utilizados para obtener las imgenes.

El microscopio compuesto u ptico utiliza lentes para ampliar las imgenes de los
objetos observados. El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a la
longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones. El microscopio ptico puede ser
monocular, y consta de un solo tubo. La observacin en estos casos se hace con un solo
ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos ojos. Esto
presenta ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la observacin
y se perciben con mayor nitidez los detalles.
El Microscopio invertido el sistema ptico de este tipo de microscopio est en posicin al
revs comparado con un microscopio ptico convencional. La fuente de luz y el
condensador estn dispuestos sobre la plataforma apuntando hacia abajo; y los objetivos y
la torrecilla estn debajo de la plataforma apuntando hacia arriba. Las nicas partes que
estn en una disposicin normal son el tubo binocular o trinocular, as mismo la muestra
que es colocada sobre la plataforma o platina mecnica. Presenta la ventaja de poder
observar cultivos enteros o grandes muestras bajo estados ms naturales y con menores
condiciones de estrs.
El Microscopio estereoscpico: es un tipo de microscopio hace posible la visin
tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para
cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que requieren
pequeos aumentos. El ptimo de visin estereoscpica se encuentra entre 2 y 40X o
aumento total del microscopio.
Microscopio de campo oscuro. Este microscopio est provisto de un condensador
paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo,
sino que iluminan oblicuamente la preparacin. Los objetos aparecen como puntos
luminosos sobre un fondo oscuro.
Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de
los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparacin.
Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas
sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas. El
tratamiento del material biolgico con flurocromos facilita la observacin al microscopio.

El microscopio electrnico[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico

Invencin del microscopio electrnico[editar]

En 1932, Bruche y Johnsson construyen el primer microscopio electrnico a base de lentes
electrostticas. Ese mismo ao Knoll y Ruska dan a conocer los primeros resultados
obtenidos con un microscopio electrnico Siemens, construido con lentes magnticas. As
nace el microscopio electrnico. Para 1936 ya se ha perfeccionado y se fabrican
microscopios electrnicos que superan en resolucin al microscopio ptico.
Estos logros no slo representan un avance en el campo de la electrnica, sino tambin en
el campo de la Biologa, pues son muchas las estructuras biolgicas que se han
descubierto y que revelan detalles inusitados, al observarlas al microscopio electrnico.
Funcionamiento del microscopio electrnico[editar]
El microscopio electrnico utiliza un flujo de electrones en lugar de luz. Consta
fundamentalmente de un tubo de rayos catdicos, en el cual debe mantenerse el vaco. El
ctodo est constituido por un filamento de tungsteno, que al calentarse elctricamente
emite los electrones, los cuales son atrados hacia el nodo por una diferencia de potencial
de 50.000 a 100.000 voltios. La lente del condensador enfoca este haz y lo dirige hacia el
objeto que se observa, cuya preparacin exige tcnicas especiales. Los electrones chocan
contra la preparacin, sobre la cual se desvan de manera desigual.
Se acostumbra a utilizar el trmino microoscopicos para las fotografas tomadas a travs
del microscopio ptico y micrografa o electromicrografa para las que se toman en el
microscopio electrnico.

Los aumentos mximos conseguidos en el microscopio electrnico son del orden de

2.000.000X mediante el acoplamiento al microscopio electrnico de un amplificador de
imagen y una cmara de televisin. En resumen, el microscopio electrnico consta
esencialmente de:

Un filamento de tungsteno (ctodo) que emite electrones.

Condensador o lente electromagntica, que concentra el haz de electrones.

Objetivo o lente electromagntica, que ampla el cono de proyeccin del haz de

luz.

Ocular o lente electromagntica, que aumenta la imagen.

Proyector o lente proyectora, que ampla la imagen.

Pantalla fluorescente, que recoge la imagen para hacerla visible al ojo humano.

Tipos de microscopios electrnicos[editar]

Existen varios tipos de microscopios electrnicos, que cada da se perfeccionan ms.
El microscopio electrnico de transmisin que utiliza un haz de electrones acelerados por
un alto voltaje (cien mil voltios). Este haz ilumina una seccin muy fina de la muestra, sean
tejidos, clulas u otro material.
El microscopio electrnico de barrido se utiliza para el estudio de la morfologa y la
topografa de los elementos. Estos instrumentos utilizan voltajes cercanos a los 20.000
voltios. Las lentes magnticas utilizan un haz muy fino de electrones para penetrar
repetidamente la muestra, y se produce una imagen ampliada de la superficie observada
en la pantalla de un monitor. El microscopio electrnico mixto tiene propiedades comunes
con el de transmisin y con el de barrido y resulta muy til para ciertas investigaciones.
Hay otros microscopios analticos que detectan seales caractersticas de los elementos
que constituyen la muestra.
Con estos poderosos instrumentos, que utilizan el flujo de electrones y las radiaciones
electromagnticas as como la aplicacin de tcnicas histoqumicas y bioqumicas, adems
del empleo de marcadores radiactivos, se han logrado grandes avances en la biologa
celular.
Microscopio electrnico de barrido[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico de barrido
El microscopio electrnico de barrido est situado a la izquierda del operador, y las
imgenes computarizadas de la muestra se ven en la pantalla de la derecha. Aunque un
microscopio electrnico de transmisin puede resolver objetos ms pequeos que uno de
barrido, este ltimo genera imgenes ms tiles para conocer la estructura tridimensional
de objetos minsculos.

Microscopio quirrgico[editar]
El empleo de microscopios quirrgicos ha permitido que los cirujanos lleven a cabo
intervenciones que parecan imposibles, como la reimplantacin de un miembro y la ciruga
de los ojos y odos. Estos microscopios son en especial tiles cuando es necesario
realinear para unir o reparar fibras nerviosas y vasos sanguneos individuales. Se usa para
operaciones de dificultad.

Medicin a travs del microscopio[editar]

Muchas veces interesa al observador conocer el tamao real de los objetos o

microorganismos que est observando a travs del microscopio. Para estas mediciones
pueden utilizarse varios mtodos.
Mtodo de los micrmetros. Se utiliza para esto un micrmetro de platina o de objetivo,
que consiste en un portaobjetos en cuyo centro se halla una escala graduada (de 2 mm de
longitud), con separaciones, entre cada divisin, de una centsima de milmetro.
Adems se utiliza un micrmetro ocular que lleva una escala graduada en dcimas de
milmetros. Se coloca el micrmetro objetivo sobre la platina y se enfoca el microscopio
hasta que las lneas de la escala graduada aparezcan ntidas. Luego se hace superponer
la escala del ocular y se toma como referencia las primeras divisiones en que una lnea del
micrmetro objetivo y una lnea del micrmetro ocular coincidan o se superpongan
exactamente.
Luego, por simple regla de tres, se calcula el valor en mieras de cada divisin ocular.
Veamos un ejemplo. Si 9 divisiones del micrmetro objetivo (0,09 mm) equivalen a 30
divisiones del micrmetro ocular, cada divisin del ocular equivaldr a: 0,09 mm/30 = 0,003
mm = 3 m
Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada divisin del
micrmetro ocular equivale a 3 m. Una vez obtenido este dato para cada objetivo en la
forma que hemos expuesto, teniendo el microscopio ocular podran hacerse todas las
mediciones que se deseen. Para medir, por ejemplo, un Paramecium de una preparacin,
procedemos as: haremos coincidir los extremos del microorganismo con las divisiones del
micrmetro ocular. Si la longitud del organismo es de 75 divisiones del micrmetro ocular, y
cada divisin equivale a 3 m, la longitud del Paramecium ser 75x3= 225 m. Tambin se
pueden efectuar mediciones en el microscopio con cmara clara y utilizando una regla. En
realidad, estas medidas no son tan exactas como cuando se utilizan micrmetros por
errores que se introducen superponiendo imgenes.

Mantenimiento del microscopio[editar]

El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran
daarlo. Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien cubrirlo
con una bolsa plstica o campana de vidrio.
Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste se
puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro,
parafina, etc. Que hayan cado sobre las citadas partes.
La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales. Para ello debe
emplearse papel de ptico que expiden las casas distribuidoras de material de laboratorio
fotografa o utilizar un pao de algodn. Para el polvillo se puede utilizar un perilla con
pincel de pelo de camello. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y
condensador con los dedos; las huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se
secan resulta trabajoso eliminarlas.
Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel de ptica, envolviendo
un palillo con algo de punta con una solucin de ter/alcohol (70-30 %) y luego pasarlo por
la superficie cuantas veces sea necesario. La limpieza de la ptica ha de realizarse en
espiral, desde el centro hacia el exterior. El aceite de cedro que queda sobre la lente
frontal del objetivo de inmersin debe quitarse inmediatamente despus de finalizada la
observacin. Para ello se puede pasar el papel de ptica impregnado con una gota de xilol.
En caso de estar seco debe ponerse la zona a remojo con la solucin sealada.
Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y
bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su posicin ms baja, para evitar que
tropiece con alguno de los objetivos. Gurdese en lugares secos, para evitar que la
humedad favorezca la formacin de hongos. Ciertos cidos y otras sustancias qumicas
que producen emanaciones fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.

Conclusiones[editar]
Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los
rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sita cerca del objeto
que se quiere estudiar. El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice
que la imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la
imagen. La imagen es observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta
sencillamente como una lupa. El ocular est situado de modo que no forma una segunda
imagen real, sino que hace divergir los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del
observador parecen proceder de una gran imagen invertida situada ms all del objetivo.
Como los rayos luminosos no pasan realmente por ese lugar, se dice que la imagen es
virtual...