ANALISIS SEMEN

DAN
UJI FUNGSI SPERMA

DR. Restu Syamsul Hadi,M.Kes

PENDAHULUAN
Infertilitas merupakan masalah
klinis yang berpengaruh terhadap :
- Aspek kesehatan
- Psikososial
Statistik infertilitas :
15 % pasangan di AS
25 % faktor pria
(al.Oksidative Stress,kerusakan
DNA)

Pada kasus infertilitas dijumpai :

- banyak sperma mengalami kerusakan DNA
- penurunan laju fertilisasi
- penurunan kualitas embrio
(Makker et al., 2009.Indian J.Med Res 129:357-367).

Ada korelasi positif :

Infertilitas pria dengan jumlah apoptosis sperma
(Wang et al.,2003. Fertil Steril. 80: 531 -535 ).

Table

The causes of infertility and their approximate frequency

(adapted from Hull et al 19853)
Cause
Sperm defects or dysfunction
Ovulation failure
(amenorrhoea or
oligomenorrhoea)
Tubal infective damage
Unexplained infertility
Endometriosis (causing
damage)
Coital failure or infrequency
Cervical mucus defects or
dysfunction
Uterine abnormalities (such as
fibroids or abnormalities of
shape)

Frequency (%)
30
25
20
25
5
5
3
(<1)

Hull et.al 1985. British Medical

Journal 1693-1697
..gangguan fungsi sperma
merupakan penyebab terbesar
infertilitas pada manusia dan
dijumpai sekurangnya 50%
kasus infertilitas klinis

Analisa Dasar Semen

MAKROSKOPIK
SEMEN

Volume
Warna
Bau
pH
Viskositas

MIKROSKOPIK
SEMEN

Motilitas
Viabilitas
Morfologi
Densitas

Tujuan Analisa Semen

untuk mengetahui tingkat kesuburan
seorang pria melalui pengukuran :
-Jumlah semen
-Kualitas semen, yang dihasilkan
-Membantu mengatasi masalah infertilitas

Hull et.al 1985. British Medical

Journal 1693-1697
..gangguan fungsi sperma
merupakan penyebab terbesar
infertilitas pada manusia dan
dijumpai sekurangnya 50%
kasus infertilitas klinis

Human Semen
Semen can be divided into 4 fractions:
1. Pre-ejaculatory secretion from urethral
and bulbourethral gland (no sperms)
2. Dilute fluid from prostate gland (no
sperms)
3. Major portion of sperms from vas deferens
and distal epididymis (volume 5%)
4. Seminal vesicle secretion (few sperms)

Fraction 1, 2, 3 made up of the first

portion of the ejaculate (30% of total
volume).

Analisa Dasar Semen

MAKROSKOPIK
SEMEN

Volume
Warna
Bau
pH
Viskositas

MIKROSKOPIK
SEMEN

Motilitas
Viabilitas
Morfologi
Densitas

Cara koleksi semen

Abstinensi (tidak dikeluarkan)
min. 2 hari max.7 hari
Transportasi < 1 jam
Suhu simpan 20-40 oC
Semen mengalami likuifaksi (mencair
15-20 menit

Methods of collection
1. Masturbation (the method of choice for all
seminal fluid tests).
2. By condom : it is not recommended for
fertility testing because the condoms may
contain spermicidal agents.
3. By coitus interrupts : (withdrawal method).
4. TESA : Testicular sperm extraction (TESE)Open Testicular Biopsy:is a highly invasive,
open surgical procedure performed under
general anaesthetic. The scrotum and testes
are cut open, before testicular tissues are
cut away and examined for sperm, which, if
present can be extracted.

PEMERIKSAAN MAKROSKOPIK

Berdasarkan volume semen :

Aspermia,
jika dia tidak mengeluarkan semen
sewaktu ejakulasi.
hipospermia,
jika volume semennya kurang dari 1 mL.
hiperspermia,
jika volume semen lebih dari 6 mL.
Rata-rata volume semen pria Indonesia,
sekitar 2-5 mL.

Warna Semen
Semen yang normal berwarna putih
keruh/putih mutiara.

Adanya warna putih kekuning-kuningan

kemungkinan adanya leukosit -infeksi

Warna kemerah-merahan dapat

disebabkan adanya pendarahan saluran
reproduksi pria.

pH Semen
Semen normal : pH antara 7,2 8.
pH 7,8 dicurigai adanya infeksi.
pH 7 pada semen azoospermia,
kemungkinan terjadi disgenesis pada
vas deferens, vesika seminalis atau
epididimis.

VISKOSITAS SEMEN
Semen dengan konsistensi tinggi,
kecepatan gerak sperma
akan terhambat.
Semen yang terlalu encer,
jumlah spermanya rendah.
Kedua-duanya dapat menyebabkan
kesuburan pria berkurang.

PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK
SEMEN
Motilitas Sperma
-Katagori a, spermatozoa bergerak cepat
dan lurus ke depan.
-Katagori b, gerak lambat/sulit maju lurus
atau bergerak tidak lurus
-Kategori c, tidak bergerak maju
(bergerak ditempat)
-Kategori d, spermatozoa tidak bergerak
sama sekali

DENSITAS/JUMLAH SPERMA
konsentrasi spermatozoa :
Jumlah sperma terhitung
dalam bidang X
5 X 10.000 (faktor multiplikasi) X
faktor pengencer
Jika sperma terhitung 40
maka konsentrasi sperma adalah :
40 x 5 x10.000 x 20 = 40 juta/ml

SUMBER :
http://www.vivo.colostate.edu/hbooks/pathphys/reprod/semeneval/hemacytometer.html

SAMPLING

1 mm : 4 = 0,25 mm, .luas = 0,25 x 0,25

= 0,0625 m

1 mm

1 mm : 5 = 0,2 mm, .luas = 0,2 x 0,2

= 0,04 mm2
0,2 mm : 4 = 0,05 mm.luas = 0,05 x 0,05
= 0,0025 mm2

Berapa
jumlah
sel ?

SOAL:

Semen pasien diperoleh setelah ejakulasi sebanyak 3 ml, diambil 0,1

ml, diencerkan dengan penambahan pelarut sebanyak 9,9 ml.
(0,1 ml : 10 ml = 0,01pengenceran 100 x)
Sampel dihitung dengan hemositometer pada kotak bagian tengah yaitu
sebanyak 5 kotak kecil dari 25 kotak, diperoleh sebanyak 130 sel.
Berapa densitas sperm pasien?
Berapa total sperma pasien per-ejakulatnya?
JAWAB :
Jumlah sel per area : 130 x 5 = 650 sel
Pengenceran
: 100 x
Faktor pengali
: 10.000 = 10 4
Densitas sperma
= 130 x 5 x 100 x 10 4
= 650 x 10 6
= 6,5 x 10 8 sel/ml (650 juta sel/ml)
Jumlah sel per ejakulat
ejakulat)

= 6,5 x 3 ml x 10 8 sel/ ejakulat

= 19,5 x 10 8 sel/ejakulat
= 1,9 x 10 9 sel/ejakulat (1,9 miliar sel/

SPERMATOZOA

MIKROSKOPIS (lanjutan)
Viabilitas Sperma

Spermatozoa hidup atau spermatozoa mati.

Pewarnaan supravital yaitu Eosin Y.

dicampurkan satu tetes (10 15 mikroliter) semen

segar dengan satu tetes larutan Eosin 0,5 % pada
kaca obyek kemudian ditutup dengan gelas penutup
Setelah 1 2 menit diamati dengan menggunakan
mikroskop
biasa
atau
beda
fase
dengan
pembesaran 400 X

Mikroskop cahaya,

spermatozoa mati berwarna merah

spermatozoa hidup tidak berwarna

Interpretation - WHO Criteria

(1999)
Seminal parameter

Normal Value

Volume

> 2 ml

pH

> 7.2

Sperm concentration

20 million / ml

Motility

50 % a+b

Morphology

15 % (10 %)

ASAB

< 50 %

White blood cells

< 1million / ml

Interpretation - Terminology

Sperma dapat dikelompokkan menjadi :

Polyzoospermia : konsentrasi sperma sangat tinggi
Oligozoospermia : jumlah sperma 20 juta / mL
Hypospermia: volume semen 1,5 mL
Hyperspermia
: volume semen 5,5 mL
Aspermia
: tidak ada semen

Pyospermia : semen ditemukan adanya

leukosit
Hematospermia : semen ditemukan eritrosit
Asthenozoospermia: motilitas sperma 40%
Teratozoospermia : 40% sperma abnormal
Necrozoospermia : tidak ada sperma yang
hidup
Oligoasthenozoospermia: motilitas 8 juta
sperma / mL

Morfologi Sperma

Morfologi sperma abnormal :

-Kepala besar (macrocephalic)
atau kecil (microcephalic), bentuk
seperti tetesan air mata, bundar, tak
berbentuk, ganda
-Leher, midpiece rusak (defect): tebal,
patah, tipis atau asimetris
-Ekor rusak

Morfologi sperma normal :

-Kepala oval
-Leher, midpiece utuh
-Ekor tunggal

Uji Integritas Membran

Uji integritas membran dilakukan dengan
menggunakan Hypoosmotic Swelling Test /
uji HOS, yaitu suatu uji untuk menilai
integritas membran sperma yang terpapar
dalam suatu larutan (medium) hipotonik.

Hasil uji HOS yang menunjukkan

HOS(+) lebih dari 60%
di dalam semen, kelangsungan
hidup sperma akan lebih lama
di banding dengan semen pada hasil uji
HOS (+) kurang dari 60%.

Uji HOS

(lanjutan)

Penetrasi getah
serviks
Alat untuk penetrasi sperma yang terdiri dari tabung
kapiler dan kaca penetrasi
Ambil satu tetes semen dengan ependorf tipe blue dan
teteskan pada reservoir
Ambil getah serviks dengan pipet dan masukkan ke
dalam tabung kapiler dengan perlahan
Tutup/sumbat tabung reservoir yang telah diisi sperma
dengan menggunakan plastisin(lilin) dan taruh
perlahan
Diinkubasi selama kurang lebih 2 jam
Setelah cukup waktunya dilihat dengan menggunakan
skala penetrasi akan terlihat pergeseran sperma yang
ada di dalam tabung kapiler

REAKSI AKROSOM

Spermatozoa dengan pewarnaan simplified triple stain technique.

1.Sperma hidup, rewaksi akrosom
2.Sperma mati akrosom utuh
3. Sperma mati, rekasi akrosom degenerativ
4. Sperma hidup, akrosom utuh
5 dan 6. Sperma hidup akrosom utuh

Teknik pewarnaan Triple

(Trypan blue, bismark brow, bengal rose)

1.
2.
3.
4.

Sperma mati dengan reaksi akrosom (-)

Sperma mati dengan reaksi akrosom (+)
Sperma hidup dengan reaksi akrosom (-)
Sperma hidup dengan reaksi akrosom (+)

Perhatikan : bagian akrosom

(warna putih/merah muda)
dan post acrosom
(biru kehitaman, coklat muda)

What increases a man's risk of

infertility?
High temperature of testicles (testes) . Sperm are made
in the testes which are in the scrotum. This is the body's
way of keeping the testes slightly cooler than the rest of
the body, which is best for making sperm.
Smoking can affect the sperm count . If you smoke, you
should stop completely for optimum sperm production.
Alcohol: equivalent eight pints of normal strength beer or
sixteen small glasses of wine, may interfere with optimum
fertility.
Medicines and drugs . Most do not interfere with sperm
production
but
some
may
do.
These
include:
tetracyclines,,colchicine,allopurinol.

 Solusi Infertilitas ? Teknologi Fertilisasi Berbantuan/

assisted reproductive technology (ART)?

The different types of assisted reproductive technology

(ART)?

1. In vitro fertilization (IVF) means fertilization outside of the

body. IVF is the most effective ART. It is often used when a
woman's Fallopian tubes are blocked or when a man produces
too few sperm.
2. Zygote intrafallopian transfer (ZIFT): is similar to IVF.
Fertilization occurs in the laboratory. Then the very young
embryo is transferred to the Fallopian tube instead of the
uterus.
3. Gamete intrafallopian transfer (GIFT) involves transferring
eggs and sperm into the woman's Fallopian tube. So
fertilization occurs in the woman's body.
4. Intracytoplasmic sperm injection (ICSI ) is often used for
couples in which there are serious problems with the sperm.
Sometimes it is also used for older couples or for those with
failed IVF attempts. In ICSI, a single sperm is injected into a
mature egg. Then the embryo is transferred to the uterus or
Fallopian tube

ZIFT

Sekian, Wassalam