INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL.

Escuela Nacional de Ciencias

Biolgicas

Prctica No. 1

TRANSPORTE DE GLUCOSA EN LEVADURAS

Equipo 3
Integrantes:
o
o
o
o

Carmona Gonzlez Alejandra.

Chvaro Francisco Guillermina.
Monsalvo Meza Laura Denysse.
Guzmn Neri Kevin Alberto.

Grupo: 6QM2
Puntos a evaluar
Hiptesis
Objetivos
Anlisis de
resultados
Discusin de
resultados
Conclusiones
Bibliografa

Valor
1%
1%
1%
4%
2%
1%

Calificacin

Seccin: 1

Hiptesis
Si a una temperatura de 4 C se afectan todos los mecanismos de transporte por
la desnaturalizacin de las protenas entonces no habr protenas para que se
lleve a cabo el transporte facilitado.
Si el DNF es un inhibidor de la ATP sintasa que acta como desacoplante de la
cadena transportadora de electrones entonces la clula tendr un valor de glucosa
consumida cercano a cero.
Si el N-etil maleimida se une a los grupos sulfhidrilo de las protenas entonces no
se llevar a cabo el proceso de transporte de glucosa.

Objetivo general.
Determinar el valor de glucosa transportada por Saccharomyces Cerevisiae, y
concluir que tipo de transporte lleva a cabo.

Objetivos especficos
Conocer y analizar el efecto de los inhibidores en el transporte de glucosa en
Saccharomyces Cerevisiae.

Resultados
1.6
1.4
Temperatura a 4C

Matraz 2

1.2

Linear (Temperatura a 4C)

Temperatura Ambiente.

Glucosa consumida(mg/mL)

0.8

Matraz 3

Linear (Temperatura Ambiente.)

0.6

Agente qumico.(DNF)

0.4

Linear (Agente qumico.(DNF))

Matraz 1
Matraz 4

0.2
Agente qumico.(NEM)

Linear (Agente qumico.(NEM))

0
0

10

15

20

25

30

35

Matraz 4

Tiempo(Minutos)

Figura 1. Transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae expuesto a distintas

condiciones ambientales (temperatura 4C) y qumicas (2,4-dinitrofenol y N-etil
maleimida).

Anlisis de resultados:
En la figura 1 se puede observar la glucosa consumida por minuto en S. cerevisiae
expuesta a una temperatura de 4C y ambiental, este microorganismo tambin se expuso
al 2,4 Dinitrofenol (DNF) y al N- etil maleimida(NEM). El comportamiento del consumo es
muy similar en los matraces expuestos a Temperatura ambiente y al DNF. El consumo de
glucosa en los matraces expuesto a 4C y al NEM fue nulo.

Figura 1. Transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae expuesto a distintas condiciones

ambientales (temperatura 4C) y qumicas (2,4-dinitrofenol y N-etil maleimida).

Discusin de resultados
Matraz 1:
Denominado como control negativo, para comparar los efectos del DNF y NEM sobre el
transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae.
El hecho de que la levadura no transportara glucosa a una temperatura de incubacin de
4C, como se observa en la figura 1, se debe a que a bajas temperaturas la membrana se
vuelve ms rgida debido a que los lpidos se encuentran en un estado de gel cristalino,
donde su movilidad est restringida, esto altera la permeabilidad a los solutos [1,2]. Por lo
tanto, el efecto de las bajas temperaturas sobre las membranas biolgicas, en este caso
de Saccharomyces cerevisie, impide que se lleve a cabo cualquier mecanismo de
transporte.

Matraz 2:
En el control positivo se observa que el consumo de glucosa en Saccharomyces
cerevisiae es superior sobre aquellas levaduras a las que se les coloco DNF, NEM y las
del control negativo, debido a que a estas levaduras se les proporciono condiciones
favorables para el transporte de glucosa, las cuales fueron una temperatura de incubacin
ambiental y la ausencia de algn factor fsico o qumico que pudiese alterar la membrana
plasmtica y con ello la difusin de ciertas sustancias, o protenas en el caso de que estn
involucradas en el transporte de este carbohidrato por estas levaduras.

Matraz 3:
La cadena de transporte de electrones es un conjunto de complejos enzimticos
embebidos en la membrana mitocondrial que oxidan NADH y FADH2 generndose un
gradiente de protones.
La fuerza protonmotriz (p) es la energa almacenada en el gradiente de concentracin de
protones. Los protones que son translocados al espacio intermembranal mitocondrial por
la cadena de transporte electrnico regresan al interior de la matriz mitocontrial via ATP
sintasa.
El bombeo de protones a travs de la cadena de transporte electrnico crea una fuerza
protonmotriz, suma de las contribuciones de un potencial qumico y un potencial elctrico,
lo que genera la produccin de ATP.

El 2,4 dinitrofenol es un agente desacoplante de la fosforilacin oxidativa. Esta sustancia

es un cido dbil liposoluble, en presencia del cual el transporte de electrones funciona a
velocidad mxima sin que exista sntesis de ATP. El DNF introduce protones desde el
espacio intermembranal hacia el interior mitocondrial, disminuyendo el pH y aumentando
la concentracin de protones en la matriz mitocondrial, lo que contrarresta el gradiente de
protones necesario para la sntesis de ATP. (Fig 2.)

Fig. 2. Mecanismo de accin del DNF. [3]

Se sabe que todo tipo de transporte activo requiere de energa (ATP), por lo que si no se
produce no se puede llevar a cabo este tipo de transporte.
Debido a lo mencionado anteriormente, el DNF es un inhibidor del transporte activo.
Al matraz nmero 3 se le agreg DNF para observar su efecto que tiene en el transporte
de glucosa en Saccharomyces cerevisiae y determinar qu tipo de transporte de glucosa
lleva a cabo esta levadura.
En la figura 1 se observa que el comportamiento de glucosa consumida a los diferentes
tiempos en los cuales se estudi el matraz nmero 3, es proporcional al testigo positivo, lo
que significa que el transporte de glucosa no sufri alteraciones al adicionar esta
sustancia, por lo que el transporte que lleva a cabo la levadura utilizada no es de tipo
activo.

Matraz 4:
Como se puede obervar en la figura 1 el transporte de glucosa en Saccharomyces
cerevisiae fue nulo, este matraz contiene N- etil maleimida; este compuesto se une a los
grupos tiol de las protenas (principalmente en las cistenas expuestas) cambiando la
conformacin por lo que altera o bien nulifica su funcin.
El modo de accin de este compuesto esta ejemplificado en la figura 3.

Fig. 3. El NEM es utilizado para inhibir enzimas como la peptidasas. [4]

Este compuesto en la adicin de Michael acta como aceptor, en esta reaccin el grupo
tiol acta como nucleoflico lo que resulta en la formacin de un enlace covalente S-C y
por lo tanto en la unin de estos dos grupos.[4]
Es necesario recordar que el transporte de sustancias a travs de una membrana puede
dividirse en transporte mediado y no mediado, siendo su diferencia el uso o no de
protenas tranmembranales, respectivamente.
Por lo que podemos asegurar que el transporte utilizado por Saccharomyces cerevisae es
de tipo mediado ya que no hubo transporte y en conjunto con las discusiones del matraz
3, encontramos que este microorganismo utiliza un transporte pasivo mediado.

Conclusiones
El transporte de glucosa que lleva a cabo Saccharomyces cerevisiae es de tipo
pasivo mediado.

Bibliografa
1. M, Tomas D. Bioqumica. 4 edicin. Revert. Espaa, 2004. Pp. 509
2. SAVADA, D, et al. Vida. La ciencia de la biologa. 8 edicn. Medica
Panamericana. Buenos Aires, 2009. Pp. 847.
3. PRETO, J. Fundamentos de Bioqumica. Editorial Maite Simons. Universidad de
Valencia. Espaa, 2007.
4. McMURRY, J. Qumica orgnica. 7 edicin. Cengage Learning Pp. 904-906.