Você está na página 1de 63

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure; tel. 0265-163268, tel./fax 0265-123682; e-mail: haemolab@fx.ro; website: www.haemolab.

ro
Reprezentane: Bucureti: 021-3262154, 0722-475466, Constana: 0723-577467, Piatra Neam: 0744-475175, Cluj-Napoca: 0723-577469, Tg. Mure: 0723-577464
Reg. Com.: J26-636-07.09.2001; Cod Fiscal: R14166519; Raiffeisen Bank Sovata Cont: 1536780; Trezorerie Tg. Mure Cont: 506914166519; BRD Tg. Mure Cont.: 251100996091136

INSTRUCTIUNI DE FOLOSIRE A
REACTIVILOR DE BIOCHIMIE
aprilie 2002
ACID BILIAR .............................................................................................................................................. 3
ACID URIC .................................................................................................................................................. 4
ACID URIC .................................................................................................................................................. 5
ALBUMINA ................................................................................................................................................. 6
ALFA - AMILAZA ....................................................................................................................................... 7
ALFA - AMILAZA (EPS) ............................................................................................................................ 8
ALFA-HBDH................................................................................................................................................ 9
ALT ( GPT) ................................................................................................................................................. 10
ALT (GPT) .................................................................................................................................................. 11
AMILAZA PANCREATICA (EPS) ........................................................................................................... 13
ASLO LATEX ......................................................................................................................................... 14
AST ( GOT) ................................................................................................................................................ 15
AST (GOT) ................................................................................................................................................. 16
CALCIU ..................................................................................................................................................... 18
CALCIU-ARZENAZA III .......................................................................................................................... 19
CALCIU OCPC/AMP ................................................................................................................................ 20
CAPACITATEA DE LEGARE A FIERULUI ............................................................................................ 21
CK-MB ....................................................................................................................................................... 22
CLORURA ................................................................................................................................................. 23
COLESTEROL ........................................................................................................................................... 24
COLESTEROL ........................................................................................................................................... 25
COLESTEROL ADPS................................................................................................................................ 26
COLESTEROL HDL ............................................................................................................................... 28
CHOLESTEROL LDL ............................................................................................................................ 29
COLINESTERAZA .................................................................................................................................... 30
1

CREATININA ENZIMATICA ................................................................................................................... 31


CREATININA ENZIMATICA ................................................................................................................... 32
CREATIN CHINAZA................................................................................................................................. 33
CREATIN CHINAZA................................................................................................................................. 34
CREATININA ............................................................................................................................................ 35
CRP LATEX ............................................................................................................................................ 36
CUPRU ....................................................................................................................................................... 37
DIA QUICK PANOPTIC ........................................................................................................................ 38
FIER (FERROZIN)..................................................................................................................................... 39
FOSFATAZA ACIDA ................................................................................................................................. 40
FOSFATAZA ALCALINA ......................................................................................................................... 41
FOSFOR ..................................................................................................................................................... 42
FR LATEX ............................................................................................................................................... 43
GAMMA GT ........................................................................................................................................... 44
GAMMA GT ........................................................................................................................................... 45
GLUCOZA GOD/PAP .............................................................................................................................. 46
GLUCOZA ................................................................................................................................................. 47
GLUCOZA - HK ........................................................................................................................................ 48
HCG LATEX ........................................................................................................................................... 49
DEHIDROGENAZA ACIDULUI LACTIC (LDH) ................................................................................... 50
LDH ............................................................................................................................................................ 51
ALFA-HBDH.............................................................................................................................................. 52
MAGNEZIU ............................................................................................................................................... 53
PROTEINA TOTALA ................................................................................................................................ 54
PROTEINE (BIURET) ............................................................................................................................... 55
RETI COUNT .......................................................................................................................................... 56
SLE LATEX ............................................................................................................................................. 57
Syphilis RPR Newmarket ........................................................................................................................... 58
TRIGLICERIDE ADPS .............................................................................................................................. 59
TRIGLICERIDE PAP ................................................................................................................................. 60
TRIGLICERIDE ......................................................................................................................................... 61
UREE (CARBAMIDA) U.V....................................................................................................................... 62
CARBAMIDA (UREE) .............................................................................................................................. 63

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

ACID BILIAR

Coninut: 12 x 10 ml
Nr. cod: 45311

Reactiv folosit pentru determinarea colorimetricenzimatic a acidului biliar n ser uman.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea reactivului:
Se dizolv o fiol de reactiv R2 intr-un flacon de
reactiv R1.
Stabilitatea soluiei:
20-25C 8 ore
2-8C
2 zile

PRINCIPIUL DETERMINRII:
3--hidroxi-acid biliar+NAD
biliar+NADH+H+
NADH+H++NBT

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

3 HSD

>3-oxo-acid

diaforaz

>NAD++formazan

METODA DE LUCRU:

3--hidroxi-acid biliara n prezena NAD i 3-hidroxisteroid dehidrogenaz se transform n 3oxo-derivate, formndu-se n acelai timp i NADH.
NADH-ul mpreun cu Nitro-Blue-Tetrazoliu
(sruri NBT) sub aciunea Diaphorazei formeaz
un derivat de Formazan de culoare albastr.

Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:


Lungimea de und: 540 (500-550) nm
Temperatur: 37C
Cuve: 1 cm
Mod de msurare: cinetic
Determinarea:

LITERATUR:
Mashige F. Imai K. Osuga T.: Clin.Chem.Acta 70,79-86
(1976)
Mashige F. Tanaka N. Maki A. Kamei S. Yamanaka M.:
Clin.Chem. 27,1352-1356 (1981)
Osuga T. Mitamura K. Mashige F. Imai K.: Clin.Chem.Acta
75,81-90 (1977)

Ap distilat
Standard
Prob
Reactiv

Martor
150L
1 mL

Standard
150L
1 mL

Prob
150L
1 mL

Dup amestecare i incubare de 2 minute se va citi


variaia absorbanei in fiecare minut timp de 3
minute.

VALORI DE REFERIN:
0-6 mol/L
REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
Tampon TRIS 0,1 mmol/L
2.Reactiv (R2)
3HSD 0,62 mmol/L
Diaforaz 125 U/L
NAD 1 mmol/L
NBT 0,3 mmol/L

CALCUL:
( A prob/ A standard) x C standard = C prob
A= absorbana
C= concentraia
Linearitate:
200 mol/L

PROB:
Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.

Peste aceast valoare proba se va dilua cu soluie


fiziologic. La calcule se va lua n considerare
factorul de diluie.
Observaie:
Metoda se folosete doar n cazul diagnosticrii
in vitro.
3

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 15x20ml

20x100ml

Nr. cod:

40962

40921

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

ACID URIC

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Uricaza transform acidul uric din prob n


alantoin, iar n urma reaciei rezult CO2 i H2O2 .
H2O2 mpreun cu peroxidaza va reaciona cu
fenolul i n prezena 4-amino antipirinei formeaz
un complex colorat. Intensitatea coloraiei, msurat
la 520 nm, este direct proporional cu concentraia
acidului uric din prob.

Pregtirea amestecului de reactivi: se va


dizolva coninutul unui flacon de reactivi R2 n
cantitatea corespunztoare de reactiv R1.

Acid uric+2H2O+O2 uricaza alantoina+CO2+ +H2O2


2H2O2 +4-amino-antipirina+DHBS peroxidaza derivat
chinon + 4H2O

METODA DE LUCRU:

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2-8 C

Ap distilat
Standard
Proba
Am. de reactivi

DHBS=3,5 diclor-2-hidroxi-B-sulfonat
LITERATUR:

VALORI DE REFERIN:
Ser

Urina

200-416 mol/L
148-357 mol/L
250-750 mg/24h

2.

20L
1 mL

20L
1 mL

20L
1 mL

A= absorbana
C= concentraia
LINEARITATE:

50 mmol/L
4 mmol/L

Pn la 1800 mol/L (300mg/L) absorbana este


direct proporional cu concentraia. Dac se
depete valoarea menionat, proba se va dilua
cu soluie fiziologic n proporie de 1:5 sau 1:10,
iar rezultatul se va nmuli cu 5 sau 10.

Reactiv (R2)

uricaz
peroxidaz
4-amino antipirin

Proba

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Reactiv (R1)

Tampon fosfat, pH=7.5


DHBS

Standard

CALCUL:

34-70 mg/L
25-60 mg/L

REACTIVI:
1.

Martor

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37


C sau 10 minute la 25C, se va citi valoarea
absorbanei (A) la 520 nm (490 -550 nm), n cuve
de 1 cm, fa de martor. Metoda de msurare: cinetic
(cu punct final).

Barham., Trinder. Analys. 97,142 (1972)


Fossati., Principe. Clin.Chem. 28.227 (1980).

Brbai
Femei

7 zile
28 zile

80 U/L
660 U/L
1 mmol/L

OBSERVAIE:

Standard de acid uric

Urina, nainte de determinare se va incuba la


60C timp de 10 minute, timp n care acidul uric
se dizolv. Coninutul ridicat de acid ascorbic
perturb determinarea, de aceea se va folosi urin
diluat. Metoda este recomandat
diagnosticrii in vitro.

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat, urin.

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

ACID URIC

Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

46762

46761

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Determinarea enzimatic-colorimetric a
activitii acidului uric:

Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva dou pri din reactivul
R1 ntr-o parte din reactivul R2.
Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2 spt.
2-8 C
4 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata
pentru folosire.

acid uric+2H2O+O2 uricaza alantoina+CO2+ +H2O2


2H2O2 +4-amino-antipirina+ADPS peroxidaza derivat
chinon + 4H2O
LITERATUR:
Trivedi R.C.,Rebar R.,Berka E.,Strong L.:Clin.Chem.,
1978,24:1908

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:

VALORI DE REFERIN:
Ser, plasm
Urin

Martor

178-345mol/L
4760-5960 mol/L

REACTIVI:
1.

Reactiv (R1)

Tampon Pipes, pH=7,0


4-amino-antipirin
peroxidaz
ascorbat-oxidaz
2.

50 mmol/L
0,37 mmol/L
1500 U/L
1600 U/L

Proba

Metoda de lucru cu doi componeni:


Martor

Standard

Proba

Am. de reactiv 1 mL
1 mL
1 mL
Ap distilat
50 L
Standard
50 L
Proba
50 L
Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
500 L
500 L
500 L

Reactiv (R2)

Ferocianid
ADPS
Uricaz

Standard

Am. de reactiv 1 mL
1 mL
1 mL
Ap distilat
50 L
Standard
50 L
Proba
50 L
Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37
C se va citi valoarea absorbanei (A) la 546 nm
(520 -570 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

240 mol/L
1,1 mmol/L
140 U/L

Standard de acid uric


Hemoliza deranjeaz determinrile.
Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

Se amestec i dup o incubare de 5 minute la 37


C se va citi valoarea absorbanei la 546 nm (520 570 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

PROBA:

CALCUL:

Ser nehemolizat. Plasm heparinizat.


Urin diluat cu ap distilat n proporie de 1:10.

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 1487,5 mol/L.

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Continut: 1x250ml

4x250ml

Nr. cod:

41252

41251

ALBUMINA

EFECTUAREA ANALIZEI:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Reactivii sunt gata de folosin.

In mediul alcalin verdele - bromcrezol se leag


cantitativ de albumin.

La 2-8 C i pstreaz stabilitatea pn la data


menionat pe pachet.

LITERATUR:

METODA DE LUCRU:

Doumas, B. et al.:Clin. Chim. Acta 31, 87, (1971)


Doumas, B. et. A: In Standard Methods of Chimical
Chemistry, Acad Press N.Y., 7,175, (1972)
Drupt, F.: Pharm. Biol. 9, 777 (1977)

Martor
1 mL
-

Reactiv
Standard
Proba

VALORI DE REFERIN:
Albumina: 38-54 g/L

Standard
1mL
10 L
-

Proba
1mL
10 L

Se amestec i, dup o incubare de 5 minute se


citete valoarea absorbanei fa de martor la 578
sau 628 nm, n cuve de 1 cm, la 20-25 C, 30 C,
37 C. Metoda de msurare este cu punct final.

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Verde de bromcrezol
Tampon succinat pH=4.2
Brij 35

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

0.15 mmol/L
75 mmol/L
7 mmol/L

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

2. Reactivi (R2)

A= absorbana
C= concentraia

Soluie standard (albumina din ser de bovin)


PROBA:

LINEARITATE:

Ser nehemolizat, plazm obinut din snge


recoltat pe heparin sau EDTA.

Metoda este linear pn la 69g/L.


OBSERVAIE:
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

- AMILAZA
Reactiv lichid cu un component
Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
45801

12x10ml
45811

1x100ml
45861

1x600ml
45863

20x100ml
45862

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Reactivul conine 2-clor-4- (nitro-fenil)- alfagalactozil-maltozid (GALG2-CNP). Amilaza din
prob disloc 2-clor-4-nitrofenolul (CNP) de pe
substrat, ce poate fi msurat fotometric. Viteza de
reacie este proporional cu activitatea amilazei.

EFECTUAREA ANALIZEI:

GALG2-CNP alfa-amilaza GALG2 + CNP

METODA DE LUCRU:

Pregtirea reactivului: reactivul nu necesit o


pregtire prealabil. A nu se reintroduce n sticl
cantitatea rmas dup determinare!
A se pstra la 2-8C.

Reactiv
Proba

LITERATURA:

3 mL
50 L

Street, H.V. and Close, J.R.:Clin Chem.Acta 1:256 (1956)


Henry, R.J. and Chiamori, N.:Clin Chem. 6:434 (1960)
David, H.,Clin Chem. 28:1485, 1985
McCroskey R.,Chang, T., David, H. and Winn, E. Clin
Chem. 28:1787,1982
Young D.S.,Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests,
third edition, AACC Press, Wasington, D.C. 1990

Se amestec i se incubeaz timp de 1 minut la 37C.


Variaia absorbanei se va citi la 405 nm, n cuve de
1 cm, timp de 2 minute, din 30 n 30 de secunde. Se
va determina variaia de absorban pe minut.
Mod de msurare: cinetic, cresctor.

DOMENIUL DE REFERIN:

CALCUL:
A/min. x 21630=U/L (CFAS EPS)
A/min. x 7570=U/L (CFAS liquid)

Ser :
Calibrat la valoarea lichidului Boehringer
CFAS:
15-77 U/L
Calibrat la valoarea Boehringer EPS:
43-220 U/L
Domeniul de referin variaz n funcie de vrst,
sex, condiii de trai. Se recomand ca fiecare
laborator s-i fixeze propriul domeniu de referin.

A/min.= variaia de absorbie pe minut


LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 2000 U/L. Dac variaia
absorbanei pe minut depete 0,25, proba se va
dilua cu ser fiziologic, n proporie de 1:3. La calcul
se va ine cont de aceast diluie.

REACTIVI:
GALG2-CNP
Acetat de calciu
Clorur de sodiu
Tampon, pH=6
Conservani

4.55 mmol/L
5.0 mmol/L
51.5 mmol/L

OBSERVAIE:
A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.
Compuii care formeaz chelai, pot tulbura mersul
reaciei. A nu se utiliza anticoagulani ca EDTA,
citrat sau oxalat. Reactivul conine calciu, care poate
cauza precipitarea fibrinogenului din plasm.

PROBA:
Ser nehemolitic, plasm heparinizat, lichid duodenal.
Urina: se va colecta ntr-un recipient curat i uscat.
Se va pstra la 2-8C, pn la efectuarea
determinrii.

- AMILAZA (EPS)

Reactiv lichid n doi componeni


Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
47461

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

1x600ml
47462

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Determinarea cinetic a activitii -amilazei:
5-etilidin-G7-pNP+5H2O -amilaza 2-etilidin- G5+2- G2-

EFECTUAREA ANALIZEI:

Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva cinci pri din reactivul R1
cu o parte din reactivul R2.
Stabilitate:
20-25C
5 zile
2-8C.
4 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata de
folosire.

pNP +2-etilidin-G4+2-G3-pNP +
etilidin-G3 + G4-pNP

2-G2-pNP + 2 G3-pNP + G4-pNP + 14H2O -glicozidaz


5pNP + 14G

G = glucoz
pNP = p-nitrofenol

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur component

LITERATURA:
A.Kurrie-Weittenhiller, W.Holzel, D.Engel, J.Finke,
G.Klein: Clin. Chem. 42, 598 (1996)

Amestec de reactivi
Proba

DOMENIUL DE REFERIN:

Se amestec i dup o incubare de 1 minut la 37C


se va citi valoarea absorbanei la 405 nm(400-420
nm), n cuve de 1 cm, fa de ap distilat, timp de
3 minute.

La 37C
cu calibrator lichid Boehringer CFAS 100 U/L
cu calibrator EPS Boehringer CFAS 230 U/L
factor de conversie: lichid x 2,3 = EPS

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
500 L
Proba
8 L
Se amestec i dup o incubare de 3 minute se
mai adaug:

REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
Tampon HEPES, pH= 7,15
NaCl
MgCl2
- glicozidaz

50 mmol/L
70 mmol/L
10 mmol/L
4 kU/L

Reactiv R2
100 L
Se amestec i dup o incubare de 3 minute la 37C
se va citi valoarea absorbanei la 405 nm(400-420
nm), n cuve de 1 cm, fa de ap distilat, timp de
3 minute.

2.Reactiv (R2)
4,6-etilidin-G7-pNP(EPS)
Tampon HEPES pH= 7.15

600 L
8 L

3 mmol/L
50 mmol/L

CALCUL:

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

A/min. x 16744=U/L (CFAS EPS)


A/min. x 7280=U/L (CFAS liquid)

PROBA:
Ser nehemolizat, urin.

A/min.= variaia de absorbie pe minut

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii
sunt stabili pn la data menionat pe ambalaj.

LINEARITATE:
Dac valoarea absorbanei pe minut la 405 nm
depete 0,15, proba se va dilua cu ser fiziologic
de NaCl n proporie de 1:10, dup care se va repeta
determinarea.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

ALFA-HBDH

Coninut: 20x3ml

15x20ml

60x20ml

Nr. cod:

42921

42922

42901

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Afinitatea izoenzimelor LDH se deosebete esenial


fa de substratul -cetobutirat. Marea afinitate a
izoenzimei LDH-1(- hidroxibutirat
dehidrogenaza) ne ajut la determinarea rapid a
activitii sale enzimatice.

EFECTUAREA ANALIZEI:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2-8 C

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv R2 n cantitatea
corespunztoare de reactiv R1.

Izoenzima LDH-1 n prezena NADH+H +


transform alfa-cetobutiratul n alfa-hidroxibutirat
cu formare de NAD. Schimbarea absorbanei este
proporional cu activitatea enzimei.

METODA DE LUCRU:
Amestec de reactivi
Proba

-cetobutirat + NADH + H+ -HBDH - hidroxibutirat


+ NAD+

Rec.GSCC(DGKC): J. Clin.Chem.Clin.Biochem .,
.8:658,(1970)
Rec.GSCC(DGKC): J. Clin.Chem.Clin.Biochem .,
10:182,(1972).

CALCUL:

VALORI DE REFERIN:
30C
70-190U/L

37C
80-220U/L

340nm:
334nm:
365nm:

REACTIVI:

=U/L
=U/L
=U/L

50 mmol/L
3 mmol/L

Dac variaia absorbanei pe minut la 340 nm


depete 0.1 sau la 365nm 0.05, proba se va dilua
cu soluie fiziologic de NaCl n proporie de 1:10,
dup care se va repeta determinarea i rezultatul se
va nmuli cu 10.

0.18 mmol/L

OBSERVAIE:

2. Reactiv (R2)
NADH

A/min x 4921
A/min x 5016
A/min x 9118

LINEARITATE:

1. Reactiv (R1)
Tampon fosfat, pH=75
L- cetobutirat

3 mL
100 L

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25C


(30,37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
340 nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de aer.
Se va urmri variaia absorbanei pe minut (A/min)
timp de 3 minute.
Metoda de msurare: cinetic (descresctor).

LITERATUR:

25C
Aduli 55-145U/L

2 zile
1 spt.

Hemoliza perturb determinarea .


Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm obinut din snge
recoltat pe EDTA.

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3ml
Nr. cod:

41101

15x20ml
41121

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

ALT ( GPT)

9x50ml
41131

20x100ml
41162

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Substraturile participante la reacia catalizat de


alanin- aminotransferaz (ALAT/ALT) sunt: Lalanina i 2-cetoglutaratul. Piruvatul format n prima
reacie, n prezena LDH va reaciona cu NADH
ducnd la formarea de NAD+ i L-lactat . Variaia
absorbanei msurat la 340nm este proporional
cu activitatea ALAT.

Pregtirea reactivului de lucru: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv (R2) n cantitatea
corespunztoare de reactiv (R1).

L-alanina+ 2-cetoglutarat GPT L-glutamat + piruvat


Piruvat + NADH+H+ LDH L-lactat + NAD+

METODA DE LUCRU:

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2-8 C

Amestec de reactivi
Proba

LITERATUR:

VALORI DE REFERIN:
30 C
<35 U/L

37 C
<49 U/L

CALCUL:
304nm:
334nm:
365nm:

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH=75
L- alanin

A/min x 1750
A/min x 1750
A/min x 3240

=U/L
=U/L
=U/L

LINEARITATE:

110mmol/L
550mmol/L

Dac variaia absorbanei pe minut la 340 nm


depete 0.17 respectiv la 365nm 0.095, proba se
va dilua cu soluie fiziologic de NaCl n proporie
de 1:10, dup care se va repeta determinarea i
rezultatul se va nmuli cu 10.

2. Reactiv (R2)
NADH
LDH
- cetoglutarat

1 mL
100 L

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 30 C


(37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la 340
nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de apa
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.
Metoda de msurare: cinetic (descresctor).

Bergmeyer et all. Clin. Chem. 24,58- 73 (1978)


Bergemeyer et all. Clin. Chem. Acta 105,147F (1980)
Expert Panel on enzyme of the IFCC, Clin. Chem. Acta, 70, f19 (1976)

25 C
<21 U/L

5 zile
28 zile

0.2mmol/L
1200 U/L
16 mmol/L

OBSERVAIE:

PROBA:

Testul nu conine fosfat de piridoxal.


Hemoliza i lipemia perturb determinarea .
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

Ser nehemolizat sau plazm obinut din snge


recoltat pe heparin.

10

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

ALT (GPT)

Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
46361

Reactiv lichid n doi componeni

1x600ml
46362

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Determinarea cinetic a activitii alanin- aminotransferazei:
L-alanin + 2- cetoglutarat ALT piruvat +
L-glutamat
Piruvat + NADH+H+ LDH L-lactat + NAD+

EFECTUAREA ANALIZEI:

Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva dou pri din reactivul R1
ntr-o parte din reactivul R2.
Stabilitate:
20-25C
5 zile
2-8C.
4 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata de
folosire.

LDH= dehidrogenaza acidului lactic


LITERATURA:
Expert Panel on enzyme of the IFCC, Clin. Chim. Acta.
1976,70:F19

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur component:

DOMENIUL DE REFERIN:
25C
21 U/L

30C
35 U/L

Amestec de reactivi
Proba

37C
49 U/L

Se amestec i dup o incubare de 1 minut la 37C


se va citi valoarea absorbanei pe minut la 340 nm
(334-365 nm), timp de 3 minute, n cuve de 1 cm,
fat de ap distilat.
Metoda de lucru cu doi componeni:

REACTIVI:
1..Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH=7,50
L-alanin
LDH

110 mmol/L
600 mmol/L
1500 U/L

Reactiv R1
1 mL
Proba
150 L
Se amestec i dup o incubare de 1 minut se mai
adaug:

2.Reactiv (R2)
- cetoglutarat
NADH

1 mL
100 L

Reactiv R2
500 L
Se amestec i dup o incubare de 1 minut la 37C
se va citi valoarea absorbanei pe minut la 340
nm(334-365 nm), n cuve de 1 cm, fat de ap
distilat, timp de 3 minute.

16 mmol/L
240 mol/L

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.


STABILITATEA REACTIVILOR:

CALCUL:

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii


sunt stabili pn la data menionat pe ambalaj.

340 nm:
334 nm:
365 nm:

PROBA:
Ser nehemolizat, plasm obinut din snge
recoltat pe EDTA sau heparin.

U/L=A/min. x 1750
U/L=A/min. x 1750
U/L=A/min. x 3240

LINEARITATE:
Dac valoarea absorbanei pe minut la 340 nm
depete 0,15, proba se va dilua cu ser fiziologic
de NaCl n proporie de 1:10, dup care se va repeta
determinarea.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

11

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

AMILAZ PANCREATIC

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid cu un singur component


Coninut: 1 x 120 ml
Nr. cod: 47861
Reactiv folosit pentru determinarea cantitativ a amilazei
pancreatice n ser uman folosind ca substrat Gal-G2-CNP.

PROB:
Ser nehemolitic, plasm heparinizat, lichid duodenal.

Msurarea amilazei este folosit primordial n diagnosticarea


i tratarea bolilor pancreasului.

Urina: se va colecta ntr-un recipient curat i uscat. Se va


pstra la 2-8C, pn la efectuarea determinrii.

Amilaza se gsete n primul rnd n pancreas i glandele


salivare. n momentul eliberrii sale n tractul digestiv
ncepe hidrolizarea enzimei. Determinarea amilazei este
util n diagnosticarea afeciunilor pancreasului i
parotidelor. Nivelul ridicat al alfa-amilazei indic
pancreatit acut sau alte afeciuni ale pancreasului, i alte
afec iuni ca: oreionul, parotidite bacteriene. Izoenzima
salivar este neutralizat de ctre anticorpi monoclonali.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea reactivului: reactivul nu necesit o pregtire
prealabil. A nu se reintroduce n sticl cantitatea rmas
dup determinare!
A se pstra reactivul la 2-8C

PRINCIPIUL DETERMINRII:
METODA DE LUCRU:
Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:
Lungimea de und: 405 nm
Temperatur: 37C
Cuve: 1 cm
Mod de msurare: cinetic, cresctor

Amilaza pancreatic hidrolizeaz legturile 1-4 glicozidice


din amidon i alte polizaharide, cu formarea unor lanuri
scurte de oligozaharide. Reactivul utilizeaz ca substrat 2clor-4-nitrofenIL-?-galactosilmaltosida (Gal-G2-CNP). Rata
de formare a p-nitrofenolului este direct proporional cu
activitatea amilazei din prob. Creterea absorbanei poate
fi msurat fotometric la 405 nm.

Determinarea
Reactiv

3 mL

LITERATUR:

Prob

50 L

Street, H.V. and Close, J.R.: Clin.Chem.Acta 1: 256 (1956)


Henry, R.J. and Chiamori,N.: Clin.Chem. 6 : 434 (1960)
David,H., Clin. Chem. 28 : 1485,1985
McCroskey R., Chang,T., David,H. and Winn,E.,:
Clin.Chem. 28:1787,1982
Young,D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests,
third edition, AACC Press, Washington, D.C. 1990

Se amestec i se incubeaz timp de 1 minut la 37C.


Variaia absorbanei se va citi la 405 nm, n cuve de 1 cm,
timp de 2 minute, din 30 n 30 de secunde. Se va determina
variaia de absorban pe minut.
CALCUL:
A/min X 2292 = U/L (CFAS liquid)
A/min = variatia de absorbie pe 1 minut

DOMENIUL DE REFERIN:
Calibrat la nivelul lichidului Boehringer CFAS: 8-53 U/L.

LINEARITATE:

Domeniul de referin difer n funcie de vrst, sex, condiii


de trai, aria geografic. Se recomand ca fiecare laborator si fixeze propriul su domeniu de referin.

Pn la 3000 U/L.
OBSERVAIE:
Compuii care formeaz chelai, pot tulbura mersul reaciei.
A nu se utiliza anticoagulani ca EDTA, citrat sau oxalat.
Reactivul conine calciu, care poate cauza precipitarea
fibrinogenului din plasm.

REACTIVI:
Gal-G2-CNP 4,55 mmol/L
Acetat de calciu 5,0 mmol/L
Natriu-clorid 51,5 mmol/L
Tampon, pH=6,0
Conservani
Anticorpi monoclonali

A se utiliza numai n diagnosticri in vitro.


12

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

AMILAZ PANCREATIC (EPS)

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1 x 100ml + 1 x 20 ml
Nr. cod: 47961
PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:
Prepararea reactivului cu un singur component: se
amestec 5 volume de R1 cu un volum de R2.

Reactiv folosit pentru determinarea amilazei


pancreatice cu metoda cinetic in IFCC, cu blocarea
monoclonar a amilazei n saliv.
5-etiliden-G7-pNP+5H2O

Stabilitatea la:

5 zile
la 20-25C
4 zile
2-8C
Prepararea reactivului cu doi componeni: reactivii
sunt gata pentru folosire.

Amilaz pancreatic

>2 etiliden-G5

+2G2-pNP+2 etiliden-G4
2 G3-pNP+etiliden-G3+G4-pNP

2 G2-pNP+2G3-pNP+G4-pNP+14H2O

- glucosidase >

METODA DE LUCRU:
Lungimea de und:
405 nm (400-420)
Temperatur:
37C
Cuve:
1 cm
Citirea n comparaie cu ap distilat.
Reactiv R1
500L
Proba
8L
Se amestec i se incubeaz 3 minute.
Reactiv R2
100L
Se amestec i se incubeaz 3 minute, dup care
se citete variaia absorbanei n fiecare minut (A/
minut), timp de 3 minute.

5pNP + 14 G

G = glucoz, pNP = p-nitrophenol


LITERATURA:
A.Kurrie-Weittenhiller,W.Hlzel, D.Engel,J.Finke,G.Klein:Clin.Chem.
42,598 (1996)

VALORI DE REFERIN:
La o temperatur de 37C:
- cu lichid calibrator Boehringer CFAS: 53 U/L
- cu calibrator Boehringer CFAS EPS : 115 U/L
- factor conversie: lichid x 2,3 = EPS
REACTIVI:
1. reactiv (R1):
tampon HEPES, pH 7.15
NaCl
MgCl2
anticorp monoclonal
- glucozidaz
2.

CALCUL:
405 nm:activitate (U/L)
50 mmol/L
70 mmol/L
10 mmol/L
4 kU/L

= A/minut x 3858
(CFAS lichid)
= A/minut x 8874
(CFAS EPS)

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la concentraia de 1800
U/L. Dac A/minut ajunge la 0,15, repetai testul
folosind soluie fiziologic de NaCl n proporie
de 1/5 sau 1/10.
La calcularea rezultatului luai n considerare
proporia de diluare.

reactiv (R2)
4,6-etiliden-G7-pNP (EPS) 3 mmol/L
tampon HEPES, pH 7,15
50 mmol/L

Concentraia se ntelege la reactivul-lucru.

OBSERVAIE:
Folosirea reactivului tulbure este strict interzis.
Pentru obinerea rezultatelor bune, se folosesc
numai instrumente de laborator curate.
Reactivii conin 0,1% azotat de amoniu.

PROB:
Urin, serum nehemolitic.
STABILITATEA REACTIVILOR:
n ntuneric, la o temperatur de 2-8C, reactivii
sunt stabile pna la data menionat pe ambalaj.

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.


13

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 50 teste
Nr. cod:
1200101

100 teste
1200102

ASLO LATEX

Kitul servete la punerea n eviden pe lam a


anticorpilor antistreptolizin-O (ASLO) din ser nediluat,
la determinarea semicantitativ a acestora. Reactivul
ASO-Latex este o suspensie de particule uniforme de
latex, sensibilizate n prealabil cu streptolizina-O
stabilizat. n cazul infeciilor cu streptococ hemolitic,
se elibereaz din bacterii streptolizina-O, care induce o
producie de anticorpi antistreptolizin-O. La populaia
adult sntoas valoarea seric ASLO este de 166-250
UI/mL, n medie 200 UI/mL. Valorile de peste 200 UI/
mL indic o infecie cu streptococi. Pentru un diagnostic mai precis este indicat ca n general la probele
serologice repetarea examinrii serurilor recoltate n
diferite zile de dup infecie.

Materiale necesare, neincluse n kit:


Centrifug, pipete serologice sau automate, cronometru,
baghete de sticl, eprubete, ser fiziologic, surs de
lumin de intensitate mare.

PROBA:
Ser centrifugat. S nu se foloseasc seruri hemolizate,
lipemice sau infectate. S nu se foloseasc plasm.

METODOLOGIE:
-

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Dac serul de cercetat conine anticorpi antistreptolizinO n cantitate suficient, acetia formeaz puni antigen-anticorp ntre particulele latex sensibilizate cu
streptolizina-O, suspensia i pierde aspectul omogen,
aglutinarea devenind observabil i cu ochiul liber.

LITERATUR:
Badin, J. and Harillac, A: J.L. ab. Clin. Med, 75, (1970)

CONINUTUL KITULUI:

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Prealabil efecturii analizei, substanele se las la


temperatura camerei s se nclzeasc
reactivul se omogenizeaz prin agitare
se efectueaz de fiecare dat i controlul pozitiv
negativ
n cercul trasat pe lam se pune o pictur din serul
de cercetat nediluat. Pipeta se pstreaz pentru
amestecare
se adaug o pictur de reactiv
se amestec cele dou picturi cu partea plat a
pipetei, astfel ca s acopere toat suprafaa cercului
se rotete lama exact 2 minute
se observ apariia sau absena aglutinrii
Evaluarea dup uscarea picturii d rezultate eronate
se spal lama pentru examinarea urmtoare.

INTERPRETARE:
O granulaie, care depete pe cea a controlului negativ,
indic prezena de cel puin 200UI/mL ASO. Lipsa
aglutinrii indic un coninut ASO sub 200 UI/mL. Dac
controlul pozitiv i negativ nu dau rezultatul ateptat,
examenul nu se poate interpreta, iar kit-ul trebuie
schimbat.
n cazul infeciilor cu streptococ hemolitic de grupa
A, n primele 4 sptmni dup infecie crete titrul
ASO. Dup vindecare, valoarea revine la cea normal
n decurs de 6 luni. Valori foarte sczute apar n
sindromul nefrotic i deficiene de anticorpi.

Suspensie de latex sensibilizat cu streptolizina-O


Control pozitiv: soluie de gamaglobulin uman cu
titru ASLO peste 200 UI/mL
Control negativ: soluie de gamaglobulin uman
cu titru ASLO sub 200 UI/mL
Plci de unic folosin

MOD DE PSTRARE, STABILITATE:


Congelarea este strict interzis. Kitul i pstreaz
stabilitatea la temperatura 2-8C, pn la data indicat
pe etichet. Sedimentarea este posibil, dar dup agitare
obinem o suspensie omogen. Dei conine conservant,
pentru evitarea contaminrii se recomand manipularea
cu precauie a produsului.

14

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

AST ( GOT)

Coninut: 1x120ml
Nr. cod:

Reactiv lichid n doi componeni

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

1x600ml

4626146262

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Determinarea activitii aspartataminotransferazei prin metoda cinetic:

Prepararea amestecului de reactivi i stabilitatea


lor:
Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva dou pri din reactivul R1
ntr-o parte din reactivul R2.
Stabilitate:
20 - 25 C
5 zile
2 8 C
4 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata pentru
folosire.

L-aspartat + alfa-cetoglutarat ASAT acetat oxalic +


L glutamat
Acetat oxalic + NADH+H+ MDH L-malat + NAD+
MDH = malat dehidrogeneza
LITERATUR:
Expert Panel on enzyme of the IFCC, Clin. Chim. Acta,
1976, 70:F19

Metoda de lucru cu un singur reactiv:


Amestecul de reactivi
1mL
Proba
100 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25 C
(30,37 C), se va citi valoarea absorbanei pe minut
la 340 nm (334 365) timp de 3 minute, n cuve de
1 cm, fa de apa distilat.

VALORI NORMALE:
25 C
<20 U/L

30 C
<30 U/L

37 C
<46 U/L

REACTIVI:

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
1mL
Proba
150 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25 C
(30,37 C), se va citi valoarea absorbanei pe minut
la 340nm timp de 3 minute, n cuve de 1 cm, fa de
apa distilat.

1. Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH= 7.8
L-aspartat
LDH
MDH
2.

88 mmol/L
260 mmol/L
1500 mmol/L
900 mmol/L

Reactivi (R2)
CALCUL:
340 nm:
334 nm:
365 nm:

- cetoglutarat
12 mmol/L
NADH
240 mmol/L
Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%
PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm obinut din snge
recoltat pe heparin sau EDTA.

U/L= A/min x 1746


U/L= A/min x 1780
U/L= A/min x 3236

LINEARITATE:
Dac valoarea absorbanei pe minut la 340 nm
depete 0.15, proba se va dilua cu ser fiziologic
de NaCl n proporie de 1:10, dup care se va repeta
determinarea.

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2- 8 C, reactivii
sunt stabili pn la data indicat pe ambalaj.

15

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
41001

15x20ml
41021

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

AST (GOT)

9x50ml
41031

90x50ml
41032

20x100ml
41062

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANAILZEI:

La reacia catalizat de aspartat amino - transferaz


(ASAT/AST) particip dou substraturi: aspartatul i oxoglutaratul. Oxalacetatul rezultat din
prima reacie n prezena malatdehidrogenazei, va
reaciona cu NADH ducnd la formarea NAD+ i L
malat. Variaia absorbanei msurat la 340 nm
este proporional cu activitatea ASAT.

Pregtirea reactivului de lucru: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv (R2) n cantitatea
corespunztoare de reactiv (R1).
Stabilitatea soluiei:
20 25 C
5 zile
2 8 C
28 zile
Amestec de reactivi
Proba

L-glutamat +
L-aspartat + -cetoglutarat
acetat oxalic
Acetat oxalic + NADH+H+ MDH L-malat + NAD+
ASAT

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 30 C


(37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la 340
nm (334 365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.
Metoda de msurare: cinetic (descresctor)

LITERATUR:
Bergmeyer et ell. Clin. Chim. Acta70,F19-42(1976), F2122(1978)
Bergmeyer et all. Clin. Chem. 24,58 73 (1978)
Expert panep on enzyme of the IFCC,Clin Chem. Acta,
70,F-19 (1976)

VALORI DE REFERIN:
25 C
30 C
<20 U/L
<30 U/L

CALCUL:
340 nm:
334 nm:
365 nm:

37 C
<46 U/L

2.

88 mmol/L
260 mmol/L

OBSERVAIE:

Reactiv (R2)

NADH
LDH
MDH
- cetoglutarat

=U/L
=U/L
=U/L

Dac variaia absorbanei pe minut la 340 nm


depete 0.15 se va repeta determinarea cu serul
diluat cu soluie fiziologic de NaCl n proporie
de 1:10, i rezultatul se va nmuli cu 10.

Reactiv (R1)

Tampon TRIS, pH=7,8


L alanin

A/min x 1746
A/min x 1780
A/min x 3235

LINEARITATE:

REACTIVI:
1.

1 mL
100 L

Testul nu conine fosfat de piridoxal.


Hemoliza i lipemia perturb determinarea.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

0.22 mmol/L
900 U/L
600 U/L
12 mmol/L

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm obinut din snge
recoltat pe heparin sau EDTA.

16

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

BILIRUBINA
Total i direct

Continut: 2x125ml
Nr. cod:

42741

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:
Proporia de amestecare a reactivilor:
A. Bilirubina total: RT1+R2=125ml/20ml
B. Bilirubina direct: RD1+R2=125ml/20ml
Stabilitatea soluiei: la 2-8 C
5 zile
METODA DE LUCRU:
A. Bilirubina total:

Acidul sulfanilic mpreun cu azotitul de sodiu


formeaz acidul sulfanilic diazotat. In prezena
dimetilsulfoxidului, acidul sulfanilic diazotat
reacioneaz cu toate bilirubinele, formnd
azobilirubina. In lipsa dimetilsulfoxidului, numai
bilirubina direct formeaz azobilirubina.
Intensitatea coloraiei msurat la 550 nm este direct proporional cu concentraia bilirubinei.
LITERATURA:
Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P.:Biochem ,77;90,
(1916)
Walters M.I., Gerarde R.W: Microchem,15;231(1970)

<10 mg/L <17 mol/L


< 3 mg/L <5,1 mol/L

REACTIVI:
Pentru bilirubina total:
1. Reactiv (RT1)
acid sulfanilic
acid clorhidric
dimetilsulfoxid
2. Reactiv (R2)
azotit de sodiu

Proba

Martor
calibr.

Proba
calibr.

RT2 RT1 1.0 ml


Proba 75l
Ser
contr. -

1.0 ml
75l

1.0 ml
-

1.0 ml
-

75l

75l

B. Bilirubina direct:

VALORI DE REFERIN:
Ser:
Bilirubina total
Bilirubina direct

Martor

Martor

Proba

Martor
calibr.

Proba
calibr.

RD2 RD1 1.0 ml


Proba 75l
Ser
contr. -

1.0 ml
75l

1.0 ml
-

1.0 ml
-

75l

75l

Dup amestecare i o incubare de exact 5 minute la


37 oC, se va citi valoarea absorbanei fa de apa
distilat, la 555 nm. Stabilitatea coloraiei, ferit de
lumin, este de 1 or.
Mod de msurare: cu punct final ( fa de martor).

3,2 mmol/L
165 mmol/L
7 mmol/L

CALCUL:
8,6 mmol/L

[(Aproba A martor )/(Apr.calib. Amartor calib. )] x Ccalib.

C= concentraie

Pentru bilirubina direct:


1. Reactiv (RD1)
acid sulfanilic
3,2 mmol/L
acid clorhidric
165 mmol/L
2. Reactiv (R2)
azotit de sodiu
8,6 mmol/L
Pachetul de reactivi nu conine standard.

LINEARITATE:
Intensitatea coloraiei pn la 200 mg/L (340 mol/
L) este direct proporional cu concentraia
bilirubinei. Peste aceast valoare se va dilua proba
cu ser fiziologic. La calcule se va lua n considerare
factorul de diluie.

CALIBRARE: ser de control cu coninut


cunoscut de bilirubin.

OBSERVAIE:
Reactivii se vor folosi in vitro.

PROBA:
Ser nehemolizat.
17

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CALCIU

Coninut: 2x125ml
Nr. cod:
41541

Calciul se gsete n organismul uman n proporie


de 98-99%, n dini i os. n snge, 50% din calciu
circul sub form ionizat, iar restul legat de
proteine. Concentraia ionilor de calciu este
influenat de mediul acido-alcalic; n mediul acid
nivelul de Ca este mai mare, iar n mediul alcalin
mai mic.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi: se va
amesteca o parte din reactivul R1 cu o parte din
reactivul R2.
Stabilitatea soluiei:
20-25C
4 ore
2-8C
20 ore

PRINCIPIUL DETERMINRII:
METODA DE LUCRU:

Ionii de Ca2+ cu ortocrezoftalein n mediul bazic


formeaz un complex de culoare roie. Intensitatea
coloraiei este direct proporional cu concentraia
calciului din prob.

Apa distil.
Standard
Proba
Reactiv R1

LITERATUR:
Stern J.,Lewis W.P.:Clin. Chem. Acta 2, 576 (1957)

Ser
2,3-2,5 mmol/L
2,5-3,0 mmol/L
2,25-2,75 mmol/L
3,0 mg/kg/24h

Proba
10L
1mL

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

REACTIVI:

A= absorbana
C= concentraia

1.Reactiv (R1)
Dietilamin

Standard
10L
1mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 2025C, se va citi absorbana probei i a martorului


la 570 nm (550-590 nm), n cuve de 1 cm, fa de
martor.
Modul de msurare: cu punct final

VALORI DE REFERIN:
Noi nscui
Copii
Aduli
Urin

Martor
10L
1mL

500 mmol/L

LINEARITATE:

2.Reactiv (R2)

Standard de calciu

Pn la valoarea de 3,4 mmol/L absorbana este


direct proporional cu concentraia calciului. Peste
aceast valoare proba se va dilua cu soluie
fiziologic. La calcule se va lua n considerare
factorul de diluie.

PROBA:

OBSERVAIE:

o-crezoftalein
8-hidroxichinolin

0,62 mmol/L
69 mmol/L

3. Reactiv (R3)

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

Ser nehemolitic sau plasm heparinizat. Urin


diluat cu ap distilat n proporie de 1:3, i cu pH
adus la valoarea de 3-4 cu HCl 0,1 N.

18

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 2 x 125 ml
Nr. cod: 43941

CALCIU-ARZENAZA III

Reactiv folosit pentru determinarea calciului n ser uman,


plasm i urin.

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Determinarea:

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Ionii de Ca++ ntr-un mediu cu pH neutru formeaz
mpreun cu arsenaza III un complex colorat. Intensitatea
culorii acestuia este direct proporional cu concentraia
calciului din prob.
LITERATUR:
Baver P.J.: Anal.Biochem. 110;61, (1981)

Martor

Standard

Prob

Ap distilat

150L

Standard

150L

Prob

150L

Reactiv

1 mL

1 mL

1 mL

Dup amestecare i incubare de 1 minut se va citi absorbana


probei i a standardului fa de martor. Culoarea obinut prin
determinare este stabil timp de 1 or.

VALORI DE REFERIN:
Ser, plasm
2,2-2,55 mmol/L
88-102 mg/L
Urin
2,5-10 mmol/24h
100-400 mg/24h

CALCUL:
( A prob/ A standard) x C standard = C prob
A= absorbana
C= concentraia

REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
Arzenazo III 200 mol/L
MES pH 6,50 mmol/L
Standard

LINEARITATE:
Pn la valoarea de 4 mmol/L (160mg/L) intensitatea culorii
este direct proporional cu concentraia de calciu. n cazul
folosirii urinei valorea obinut se nmulete cu factorul de
diluie.

PROB:
Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.
Urin diluat cu ap distilat n proporie de 1: 3, i cu pH
adus la valoarea de 3-4 cu HCl 0,1 N.

OBSERVAIE:
Metoda se folosete doar n cazul diagnosticrii in vitro.

EFECTUAREA ANALIZEI:
A se folosi unelte din material plastic de unic folosin.
Pregtirea reactivului:
Nu necesit o pregtire prealabil, sunt gata pentru utilizare.
Stabilitatea soluiei:
La 2-25C, ferit de lumin se poate folosi pn la data de
expirare menionat pe cutie.
METODA DE LUCRU:
Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:
Lungimea de und: 650 nm (600 nm)
Temperatur: 25, 30, 37C
Cuve: 1 cm
Mod de msurare: cu punct final

19

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CALCIU OCPC/AMP

Coninut: 1 x 125 ml + 1 x 125 ml


Nr. cod:
45241

Reactiv folosit pentru determinarea concentraiei de calciu n


ser uman, plasm i urin. Este o metod colorimetric, bazat
pe un complex de ortocrezolftalein.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea reactivului: se amestec o parte din reactivul R1
cu o parte din reactivul R2
Stabilitatea soluiei:
20-25C 24 ore
2-8C
4 zile

Calciul se gsete n organismul uman n proporie de 98-99%,


n dini i os. n snge, 50% din calciu circul sub form
ionizat, iar restul legat de proteine. Concentraia ionilor de
calciu este influenat de mediul acido-alcalic; n mediul acid
nivelul de calciu este mai mare, n mediul alcalin este mai
mic.

METODA DE LUCRU:

n cazul unor boli ca hyperparatiroidism primar, cancer mamar,


cancer bronhial, cancer al pancreasului, osteoporoz, maladiile
Paget i Addison, supradoz de vitamina A i D, hipertiroidism,
nivelul calciului este ridicat.

Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:


Lungimea de und: 570 (550-590) nm
Temperatur: 25, 30, 37C
Cuve: 1 cm
Mod de msurare: cu punct final

Nivel sczut al calciului se msoar n cazul


hypoparatiroidismului, perturbaii ale absorbiei, insuficien
renal acut, sindrom nefrotic, ciroz hepatic, pancreatit
acut.

Determinarea:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Ap distilat
Standard
Prob
Reactiv R1

Ionii de Ca cu ortocrezolftalein n mediu bazic formeaz


un complex de culoare roie. Intensitatea coloraiei este direct proporional cu concentraia calciului din prob.
2+

Martor

Standard

Prob

10L
1 mL

10L
1 mL

10L
1 mL

Dup amestecare i incubare de 5 minute la temperatura


camerei, se va citi absorbana probei i al martorului la 570
nm (550-590 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor. Culoarea
aprut la determinare este stabil o or.

Literatur:
SternJ.,Lewis W.P.: Clin.Chim.Actab 2,576 (1957)
VALORI DE REFERIN:
Ser
Noi nscui 2,3-2,5 mmol/L
Copii 2,5-3,0 mmol/L
Aduli 2,25-2,75 mmol/L

CALCUL:
( A prob/ A standard) x C standard = C prob
A= absorbana
C= concentraia

Urin 3,0 mg/kg/24h

LINEARITATE:
Pn la valoarea de 3,4 mmol/L absorbana este direct
proporional cu concentraia calciului. Peste aceast valoare
proba se va dilua cu soluie fiziologic. La calcule se va lua n
considerare factorul de diluie.

REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
Tampon AMP 400 mmol/L
2.Reactiv (R2)
o-crezoftalein 0,62 mmol/L
8-hidroxichinolon 69 mmol/L
3.Reactiv (R3)
Standard de calciu

OBSERVAIE:
Reactivii pot fi utilizai i fr o amestecare prealabil. n cazul
acesta n condiiile meninerii proporiilor iniiale, se adaug
0,5 mL R1 i 0,5 mL R2 la prob.
EDTA i alte compui care formeaz chelai pot turba mersul
reaciei.
A se avea grij ca la determinare s se foloseasc vase curate,
fr urme de calciu.

PROB:
Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.
Urin diluat cu ap distilat n proporie de 1: 3, i cu pH
adus la valoarea de 3-4 cu HCl 0,1 N.

Metoda se folosete doar n cazul diagnosticrii in vitro.


20

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CAPACITATEA DE LEGARE A FIERULUI


Coninut: 1x50 mL
Nr. cod:
42351
Set de reactivi utilizat la determinarea capacitii
de legare a fierului din ser.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivii sunt gata pentru folosire.

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Stabilitate:

Etapele determinrii capacitii de legare a fierului:


la prob se adaug o cantitate cunoscut de fier
pentru saturarea transferinei. Surplusul de fier se
adsoarbe cu carbonat de magneziu, dup care se
centrifugheaz, iar cantitatea de fier din supernatant
se determin cu metoda de determinare a fierului
cu cromazurol B.

Reactivii pstrai la 2-8C sunt stabili pn la data


indicat pe etichet.
Se va feri de impuriti!
Apa distilat i vasele folosite trebuie ferite de
impuriti cu coninut de fier. Vasele i materialele
contaminate cu fier vor afecta bunul mers al
analizei.

LITERATUR:

METODA DE LUCRU:

Ramsay, W.N.M.: Clin. Chim. Acta, 2; 221 (1957)

Analiza se efectueaz n eprubete de centrifug:

VALORI NORMALE:
Brbai
Femei

46,5-68,8 mol/L
37,5-60,9 mol/L

Proba
Reactiv R1

2,6-3,9mg/L
2,1-3,4mg/L

500 L
1 mL

Se amestec i se ateapt 5 minute, dup care se


adaug:

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)

Reactiv R2

Soluia de saturare cu fier 89,5 mol/L (5 mg/L)

1 spatul de msurare

Se scutur de mai multe ori timp de 20 minute, apoi


se centrifugheaz 10 minute la turaia de 3000 rot/
min. Cantitatea de fier din supernatant se va
determina cu metoda de cromazurol B. Deoarece
cu adugarea soluiei de saturare proba se dilueaz
de 3 ori, rezultatul se va nmuli cu 3.

2. Reactiv (R2)
Adsorbant, bicarbonat de magneziu (o spatul
retezat de msurare=aproximativ 100 mg de
bicarbonat de magneziu)
PROBA:

Setul de reactivi se va utiliza in vitro.

Ser nehemolitic sau plasm obinut din snge


recoltat pe heparin.

21

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
42801

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CK-MB

12x10ml
42811

Creatin-chinaza are trei izoenzime. Aceste izoenzime


sunt DIMERII a 2 subuniti: subunitatea M (musclemuchi) i subunitatea B (brain-creier). Se descriu
urmtoarele forme: CK-MM, CK-MB, CK-BB.

PROBA:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Reactivul conine un anticorp policlonal care inhib


activitatea subunitii M din enzima CK-MB i prin
urmare, se va determina numai activitatea subunitii
B. Valoarea acesteia este de 2 ori mai mare dect
activitatea enzimei CK-MB din ser.
Fosfat de creatin + ADP CK creatin + ATP

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv R2 n cantitatea
corespunztoare din reactivul R1.
Stabilitatea soluiei:
2-8C
3 zile
20-25C
24 ore

ATP + D-glucoz HK D-glucoz-6-fosfat +ADP

METODA DE LUCRU:

D-glucoz-6-fosfat + NAD

Ser nehemolitic (serul poate fi pstrat 1 sptmn


la 2-8C).

D-glucoz-6-fosfat
+ NADH + H+

+ G-6-PDH

Amestec de reactivi
Proba

LITERATUR:

Se amestec i se incubeaz timp de 5 minute la


37C. Variaia absorbanei se va citi la 340 nm, n
cuve de 1 cm, timp de 3 minute, fa de ap distilat.
Se va determina variaia absorbanei pe minut(A/
min).
Mod de msurare: cinetic, cresctor.

Morisok I.M.,Clayson J.: Clin. Chem., 34 (1988), 535


Morin L.: Clin. Chem., 2314, (1977), 646

DOMENIUL DE REFERIN:
37C
30C
% CK-MB

0-24 U/L
0-14 U/L
<5%

CALCUL:
1. Activitatea CK-B: A/min. x 3367=U/L
2. Activitatea CK-MB: CK-B x 2 =U/L
3. CK-MB %:
Act. CK-MB/Act. CK total x 100

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Anticorpi policlonali anti-umani pentru inhibarea a
2000 U/L de subuniti M.
Azotit de sodiu 0,1%.

LINEARITATE:
Dac activitatea CK total depete 1200 U/L, proba
se va dilua cu soluia fiziologic de NaCl. La calcul se
va lua n considerare diluia.

2. Reactiv (R2)
Tampon imidazol, pH=6,7
Acetat de magneziu
N-acetil-cistein
ADP
AMP
NAD
D-glucoz
Pentafosfat de diadenozin
EDTA
Hexochinaz
6-fosfat dehidrogenaz de glucoz
fosfat de creatin

1 mL
50 L

100 mmol/L
10 mmol/L
20 mmol/L
2 mmol/L
5 mmol/L
2 mmol/L
20 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
3500 U/L
2000 U/L
30 U/L

OBSERVAIE:

A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.


Metoda determin i activitatea izoenzimei CK-BB.
Aceast activitate fiind neglijabil, rezultatul reprezint
activitatea CK-MB. Dac activitatea CK-MB%
depete cu mai mult de 20% activitatea CK, acest fapt
poate semnala prezena macro-BB.

22

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CLORURA

Coninut: 2x125ml
Nr. cod:
41641
PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

n mediu alcalin, ionii de clor formeaz un complex colorat cu tiocianitul (II) de mercur, n prezena
azotatului de fier (III). Intensitatea coloraiei este
proporional cu concentraia ionilor de clor.

Reactivul este gata pentru folosire.


Stabilitatea soluiei: la 20-25C pn la data
indicat pe etichet.

2Cl- + Hg(SCN)2 HgCl2 + 2SCN-

METODA DE LUCRU:

SCN- + Fe+++ Fe(SCN) ++

Apa distil.
Standard
Proba
Reactiv

LITERATUR:
Schoenfeld, R. G., et. al.: Clin. Chem. 10; 533, (1964).

98-107 mmol/L
119-131 mmol/L

REACTIVI:

Proba
10L
1 mL

CALCUL:

1.Reactiv (R1)
tiocianat de mercur (II)
azotat de fier (III)
acid azotic

Standard
10L
1 mL

Dup amestecare, la 20-25C se va citi absorbana


probei i a martorului la 480 nm, n cuve de 1 cm,
fa de martor.
Modul de msurare: cu punct final

VALORI DE REFERIN:
Ser, plasm
Liquor (LCR)

Martor
10L
1 mL

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
A= absorbana
C= concentraia

2 mmol/L
200 mmol/L
29 mmol/L

LINEARITATE:

2.Reactiv (R2)
soluie standard (clorur)

Intensitatea culorii este direct proporional cu


concentraia clorurii pn la 130 mmol/L.

PROBA:

OBSERVAIE:

Ser nehemolitic sau plasm heparinizat, urin,


liquor (LCR).

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

23

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

COLESTEROL

Coninut: 15x20ml

9x50ml

20x250ml

Nr. cod:

40131

40152

40121

Biosinteza colesterolului are loc n primul rnd n ficat


i n mucoasa intestinel, dar este sintetizat de aproape
toate celulele. Este elementul component a mai multor
membrane a bilei, a hormonilor steroide. n snge, circul
sub form de esteri legai de betalipoproteine.

PROBA:
Ser sau plasm heparinizat.
EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva
coninutul unui flacon de reactivi R2 n cantitatea
corespunztoare de reactiv R1.

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Din esterii de colesterol hidrolizai de colesterol esteraz
(ChEH) rezult colesterol, care este transformat de
colesterol-oxidaz (ChOD) n colestenon. H 2 O 2
rezultat, n prezena de fenol i 4-amino-antipirin, la
adugarea peroxidazei (POD), d un produs, numit rou
de chinon.
Ester de colesterol +H2O
Colesterol + O2

ChOD

ChEH

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
15 zile
2-8 C
4 luni
METODA DE LUCRU:

colesterol + acizi grai

delta-4-colestenon + H2O2

2H2O2 + fenol+4-amino-antipirin
chinon + 4H2O

POD

Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv

rou de

LITERATUR:

VALORI DE REFERIN:
3,87-6,71 mmol/L

2.

3.

A= absorbana
C= concentraia

90 mmol/L
26 mmol/L

LINEARITATE:

Reactiv (R2)

Colesterol esteraz
Colesterol oxidaz
Peroxidaz
4-aminoantipirina

Proba
10L
1 mL

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Reactiv (R1)

Tampon PIPES, pH=6,9


Fenol

Standard
10L
1 mL

CALCUL:

1,5-2,6 g/L

REACTIVI:
1.

Martor
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 37C,


se va citi absorbana probei i a standardului la 505 nm
(500 -550 nm) sau n cazul unei lmpi de vaporizare de
Hg la 546 nm, n cuve de 1 cm, fa de martor.
Metoda de msurare: cinetic (cu punct final).

Trinder P.Ann. Clin. Biochem 5, 24 (1969)


Richmond Clin. Chem.19, 1350 (1973)
Fasce CF. Clin. Chem. 18, 901 (1982)

Ser

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Absorbana este direct proporional cu concentraia


pn la 20 mmol/L (7,8 g/L). Dac se depete
aceast valoare, proba se va dilua cu soluie
fiziologic de NaCl, se repet determinarea iar
rezultatul se va nmuli cu valoarea diluiei.

300 U/L
300 U/L
1250 U/L
0,4 mmol/L

Reactiv (R3)

OBSERVAIE:

Standard de colesterol

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

24

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

COLESTEROL
Reactiv lichid cu un component
Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

47062

47061

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Din esterii de colesterol hidrolizai de colesterolesteraz (ChEH) rezult colesterol, care este
transformat de colesterol-oxidaz (ChOD) n
colestenon, din care rezult H2O2. H 2O2, sub
activarea peroxidazei (POD), la adugarea fenolului
i 4-amino-antipirinei, rezult un produs numit rou
de chinon.

Reactivii sunt gata pentru folosire.


METODA DE LUCRU:
Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv

Ester de colesterol +H2O ChEH colesterol + acizi grai


Colesterol + O2

ChOD

POD

rou de

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Allain C.C and al., Clin. Chem., 20, (1974), 470.

A= absorbana
C= concentraia

VALORI DE REFERIN:
3,87-6,71 mmol/L 1,5-2,6 g/L

LINEARITATE:
REACTIVI:

Metoda este linear pn la 15,5 mmol/L.

1. Reactiv (R1)
Tampon PIPES, pH=6,7
Fenol
Colesterol esteraz
Colesterol oxidaz
Peroxidaz
4-amino-antipirin

Proba
10L
1 mL

CALCUL:

LITERATUR:

Ser

Standard
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C,


se va citi absorbana probei la 500 nm (492 -550
nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

delta-4-colestenon + H2O2

2H2O2 + fenol+4-amino-antipirin
chinon + 4H2O

Martor
10L
1 mL

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

50 mmol/L
24 mmol/L
180 U/L
200 U/L
1000 U/L
0,5 mmol/L

Standard de colesterol
PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat.
STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferii de lumin i pstrai la 2-8C, reactivii sunt
stabili pn la data indicat pe ambalaj.

25

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

COLESTEROL ADPS

Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

46062

46061

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Din esterii de colesterol hidrolizai de colesterol esteraz


(ChEH) rezult colesterol, care este transformat de
colesterol-oxidaz (ChOD) n colestenon, din care
rezult H2O2. H2O2 cu ajutorul peroxidazei (POD), a
fenolului i 4-amino-antipirinei d un produs numit rou
de chinon.

Prepararea amestecului de reactivi i stabilitatea lor:


Pregtirea reactivului cu un singur component:
se vor dizolva dou pri din reactivul R1 ntr-o parte
din reactivul R2.
Stabilitate:
20 - 25 C
2 spt.
2-8C
2 luni
Reactivii cu doi componeni sunt gata pentru
folosire.

Ester de colesterol +H2O ChEH colesterol + acizi grai


Colesterol + O2

ChOD

delta-4-colestenon + H2O2

2H2O2 + fenol+4-amino-antipirin +ADPS


rou de chinon + 4H2O

POD

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:

LITERATUR:

Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv

Allain C.C and al., Clin. Chem., 20, (1974), 470.

VALORI DE REFERIN:
Ser

3,87-6,71mmol/L

1. Reactiv (R1)
Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv R1

50 mmol/L
1 mmol/L
180 U/L
3000 U/L
1000 U/L

Proba
10L
1 mL

Martor
15L
1 mL

Standard
15L
1 mL

Proba
15L
1 mL

Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai


adaug:
Reactiv R2
500L
500L
500L
Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C
se va citi absorbana probei la 546 nm (50 -570 nm),
n cuve de 1 cm, fa de martor.

2. Reactiv (R2)
4-amino-antipirin
Colesterol oxidaz
Standard de colesterol

Standard
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C


se va citi absorbana probei la 546 nm (50 -570 nm),
n cuve de 1 cm, fa de martor.
Metoda de lucru cu doi componeni:

1,5-2,6 g/L

REACTIVI:
Tampon PIPES, pH=6,7
ADPS
Colesterol esteraz
Ascorbat oxidaz
Peroxidaz

Martor
10L
1 mL

0,9 mmol/L
200 U/L

CALCUL:

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat.

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
A= absorbana
C= concentraia

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferii de lumin i pstrai la 2-8C, reactivii sunt
stabili pn la data indicat pe ambalaj.

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 15,5 mmol/L.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.
26

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

CHOLESTEROL HDL

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid n doi componeni


Coninut: 1 x 45ml + 1 x 15 ml
Nr. cod:
47661
Metod direct pentru determinarea cantitativ a lipoprotein-cholesterolului cu densitate mare (HDL-C) n ser.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea soluiei:
Reagentul 1 si 2 este gata pentru preparare. Soluia rmne
stabil 8 sptmni dup desfacerea sticlei, dac este inut
ntre 2-10C.

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Anticorpi anti -lipoproteinici umani din Reactivul 1 leag
toate lipoproteinele din ser (LDL, VLDL i chilomicronii)
cu excepia HDL C. Complexul Ag-Ac format nu
reacioneaz cu enzimele cnd Reactivul 2 este adugat.
Cholesterol esteraza (CHE) i Cholesterol oxidaza (CO) din
Reactivul 2 reacioneaz numai cu HDL C. Hidrogen
peroxidaza rezultat din reacia enzimelor cu HDL C, produce un complex colorat albastru dup reducere oxidativ cu
N-etil-n-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5-dimetoxi-4fluoroanilin sare Na (F-DAOS) i 4-aminoantipirin (4AA)
n prezena de peroxidaz. Msurnd absorbana complexului
colorat albastru, la 593 nm, se poate calcula concentraia HDL
C din prob prin comparare cu absorbana Calibratorului
pentru HDL C.

Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:


Filtru primar: 600 nm
Filtru secundar: 700 nm
Temperatur: 37C
Cuve: 1 cm
METODA DE LUCRU:

Martor

Standard

Proba

Reagent R1

270L

270L

270L

Standard

LITERATURA:

Proba

3L

1.Rifai N, Warnick G.R. (eds.) Laboratory Measurement of Lipids,


Lipoproteins and Apolipoproteins. AACC Press,Washington D.C.,
USA,1994.

Apa distilata

Se amestec i se incubeaz 5 minute.

2. Burtis C.A., Ashwood E.R. (eds.) Tiets Textbook of Clinical Chemistry.


2nd ed. Saunders, Philadelphia, 1994.

Reagent R2

3. Gordon T., Castelli W.P., Hjortland M.C., et.al., Am.J.Med. 62,707-714


(1977).

90L

90L

90L

Se amestec i se incubeaz 5 minute i se citete absorbana


probei fa de martor.

VALORI DE REFERINTA:
brbai:

35,3 - 79,5 mg/dL

(0,92 - 2,07 mmol/L)

femei:

42,0 - 88,0 mg/dL

(1,09 - 2,29 mmol/L)

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard = Cproba
A= absorbana
C= concentraia

REACTIVI:
1. Reactiv 1: se pstreaz ntre 2-10C. Nu congelai.
30 mmol/L Good-Puffer, (pH 7,0), care conine: 0,9 mmol/L
4-AA, 2.400 U/L POD, 2.700 U/L oxidaza ascorbatic i antihuman -lipoprotein anticorp.
2. Reactiv 2: se pstreaz ntre 2-10C. Nu congelai.
30 mmol/L Good-Puffer, (pH 7,0), care conine: 4.000 U/L
CHE, 20.000 U/L Co si 0,8 mmol/L F-DAOS.

OBSERVAIE:
Nu folosii reactiv, care n prealabil a fost congelat.
Dac concentraia trigliceridelor din prob depete 1200
mg/dL (13,4 mmol/L), proba se va dilua cu soluie fiziologic
de NaCl, dup care se va repeta determinarea, iar rezultatul
se va nmuli cu factorul de diluie.

PROB:
Folosii ser pentru prob. Se recomand msurarea imediat
a HDL-C-ului dup preluarea probei. Acidul ascorbic,
bilirubina i hemoglobina nu influeneaz msurtorile.

Metoda este folosit doar n cazul diagnosticrii in vitro.

27

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

COLESTEROL HDL

Coninut: 3x10ml
Nr. cod:
41411

1x100ml
41461

Lipoproteina High Density (HDL) are un rol important n studierea metabolismului lipidelor, fiind
considerat colesterolul bun.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivul de precipitare este gata pentru folosire.
Stabilitatea soluiei: la 2-25C pn la data indicat
pe etichet.

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Acidul fosfowolframic precipit din ser
lipoproteinele de densitate foarte mic (VLDL) i
lipoproteinele de densitate mic (LDL), n prezena
ionilor de magneziu. Lipoproteinele de densitate
mare (HDL) rmn n supernatant.

METODA DE LUCRU:
Separarea fraciilor de lipoproteine
(precipitarea):
Ser
Reactiv de precipitare R1

LITERATUR:

Reacia propriu-zis:
Martor
Standard
Proba
Reactiv R2
1 mL

VALORI DE REFERIN:
La o valoare normal de colesterol total(5,18 mmol/
L) sau uor mrit(5,18-6,22 mmol/L) avem:

Femei

Risc sczut
> 1.4
> 0.55
> 1.7
> 0.65

Normal
0.9-1.4
0.35-0.55
1.2-1.7
0.45-0.65

500L
50L

Amestecul se va incuba timp de 10 minute la


temperatura camerei, apoi se va centrifuga la 4000
rpm timp de 20 minute.

Burstein M.,Selvenick H.R.:Lipid Res. 11,583(1970)


Lopez-Virella,M..: Clin. Chem.23,882(1977)
Friendewald, W.T.: Clin. Chem. 14,449(1972)

Brbai

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Mrit
< 0.9 mmol/L
<0.35 g/L
<1.2 mmol/L
<0.45 g/L

Standard
20L
1 mL

Proba
20L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C


sau 10 minute la temperatura camerei se va citi
absorbana probei i a standardului la 505 nm (500550nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.
Mod de msurare: cu punct final.

REACTIVI:
CALCUL:

1.Reactiv (R1): reactiv de precipitare


acid fosfowolframic
clorur de magneziu

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

14 mmol/L
2 mmol/L

A= absorbana
C= concentraia

2.Reactiv (R2)
Trus de reactivi pentru determinarea enzimatic,
colorimetric a colesterolului.

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la o concentraie de 7,15
mmol/L(2750mg/L).
LDL colesterolul se poate calcula conform
formulei Friedewald:

3.Reactiv (R3)
Standard
PROBA:

LDL=Colesterol total-(Triglicerid/5)-HDL Colesterol

Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.

28

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

CHOLESTEROL LDL

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid cu doi componeni


Coninut: 1 x 45 ml + 1 x 15 ml
Nr. cod:
47761
Metod direct de imunoinhibiie, dup protecie selectiv,
pentru determinarea lipoprotein-cholesterolului cu densitate
mic (LDL C) n ser i plasm.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivii sunt gata de folosire. Fr desfacere, la o temperatur
de 2-10C se poate ine pn la expirarea termenului nscris
pe cutie. Stabilitatea soluiei dup deschiderea sticlei la 210C, este de 1 lun.

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:


Filtru primar: 600 nm
Filtru secundar: 700 nm
Temperatur: 37C
Cuve: 1 cm

Cnd proba este amestecat cu Reactivul 1, reactivul de protecie


leag LDL-ul i l protejeaz de aciunea enzimelor. Cholesterol
esteraza (CHE) i Cholesterol oxidaza (CO) reacioneaz cu nonLDL cholesterol: Chylomicroni (CM), VLDL, HDL. Hidrogen
peroxidaza rezultat din reacia enzimatic cu non-LDL
cholesterolul este descompus da catalaza din Reactivul 1. Cnd
Reactivul 2 este adugat, se elibereaz LDL i catalaza este inactivat
de azida de Na (NaN3). n acest proces secundar, CHE i CO
reacioneaz numai cu LDL Cholesterolul. Hidrogen peroxidaza,
rezultat din reacia enzimatic cu LDL-C, produce un complex
colorat dup reducerea oxidativ cu N-(2-hidroxi-3-sulfopropil 03,5-dimetoxianilin (HDAOS) i 4-aminoantipirin (4AA) n
prezena peroxidazei (POD). Msurnd absorbana complexului
colorat albastru, la 600 nm, se poate determina concentraia LDL
C n prob prin comparaie cu absorbana Calibratorului pentru LDL
C.

METODA DE LUCRU:
Martor

Standard

Proba

Reactiv R1

270 mL

270 mL

270 mL

Standard

3 mL

Proba

3 mL

Ap dist.

3 mL

Se amestec i dup o incubare de 5 minute se mai adaug:

LITERATURA:

Reactiv R2

<3,36 mmol/L

Risc crescut

130-159 mg/dl

3,36-4,1 mmol/l

Risc mare

160 mg/dl

4,13 mmol/L

90 mL

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
A= absorbana
C= concentraia
LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 400 mg/dl. Peste aceast valoare
proba se va dilua cu soluie fiziologic de NaCl n raport de 1
: 1, iar calculul se repet. Rezultatul se va nmuli cu 2.

VALORI DE REFERIN:

<130 mg/dl

90 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute se va citi


absorbana probei i a standardului.

Burtis C.A, Ashwood E.R: Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. Saunders, Philadelphia, 1994
Rifai,N.,Warnick,G.R.,Dominiczak,M.H.: Handbook of Lipoprotein Testing,AACC
Press,Washington, D.C, USA, 1997
Friedewald,W.T., Levy R.I., Fredericson D.S.: Estimation of the concentration of low
density lipoprotein cholesterol in plasma without use of the ultrecentrifuge.
Clin.Chem 18,449-502 (1972).
The Expert Panel. Raport of the National Cholesterol Education Program Expert panel
on Detection, Evaluation and treatment of High Blood Cholesterol in Adults.
Arch.Intern.Med. 148,36-69 (1988).
The Expert Panel on Detection, Evaluation and treatment of High Blood Cholesterol
in Adults. Summary of the Second Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment
of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel II). Jama, 269,30153023 (1993).

Valori normale

90 mL

OBESERVAIE:
Nu folosii reactivul dup expirarea termenului.

REACTIVI:
Reactiv 1:
25 mmol/L tamponGood, pH6,8, care conine 5000 U/L
ChE; 5000 U/L ChO; 0,64 mmol/L HDAOS; 1000000 U/L
catalaza. Se va pstra la 2-10C. A nu se congela.
Reactiv 2:
25 mmol/L tampon-Good, pH7,0, care conine 3,4
mmol/L 4AA; 20000 U/L POD; 0,1 % NaN3. Se va pstra
la 2-10C. A nu se congela.

Produsele, soluiile de test i reactivii se folosesc numai la


efectuarea testelor de mai sus.
Dup folosire, cltii bine chiuvetele.
A se ntrebuina numai la diagnosticri in vitro.

29

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3 mL 2x100 mL


Nr. cod:

COLINESTERAZA

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

1001100 1001109

Set de reactivi utilizat la determinarea cinetic a


activitii colinesterazei din ser:

LITERATUR:

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi:
Soluia 1 (S1): se va dizolva coninutul flaconului
R1 n cantitatea corespunztoare de ap distilat.
Soluia 2 (S2): se va dizolva coninutul flaconului
R2 n cantitatea corespunztoare de ap distilat.
Stabilitatea soluiei: (ferit de lumin)
2-8 C
6 sptmni

Knedel, M.: Klin. Wschr (1967)

METODA DE LUCRU:

PRINCIPIUL DETERMINRII:
butil-tiocolina + H2O colinesteraz tiocolina + butirat
tiocolina + DTNB nitro-2-mercapto-5-benzoat

37C
Reactiv R1
1,5 mL
Proba
5 L
Reactiv R2
50 L
Observaie: la determinri n serie, reactivii R1 i
R2 se pot amesteca n proporie de 30:1. Reacia va
porni n momentul adugrii probei.
Stabilitatea amestecului:
15-25C
1 or

VALORI DE REFERIN:
25C
30C
Copii, brbai, femei > 40 ani:

37C

3500-8500U/L

4300-10500U/L

5400-13200U/L

3500-9200U/L

4300-11500U/L

3000-7400U/L

3700-9300U/L

Femei*:
2800-7400U/L

Femei**:
2400-6000U/L

Dup amestecare, se va citi valoarea absorbanei


(A) amestecului la 405 nm (400 -440 nm), n cuve
de 1 cm, fa de aer, n momentul amestecrii, iar
dup 30, 60, 90 secunde din nou. Se va calcula
variaia absorbanei pe minut (A/min).
Metoda de msurare: cinetic (cu factor).

* femei 16-39 ani, nu sunt gravide, nu folosesc


anticoncepionale.
** femei gravide sau care folosesc anticoncepionale

REACTIVI:
1.
Reactiv (R1)
Tampon fosfat, pH=7,7
DTNB

50 mmol/L
0,25 mmol/L

CALCUL:

2.
Reactiv (R2)
Soluie substrat
8-butirilcolin-iodur

6 mmol/L

LINEARITATE:

25C:
37C:

A/min x 11730 =U/L


A/min x 23460 =U/L

Dac n 90 sec. variaia absorbanei pe minut la 405


nm depete 0,400 proba se va dilua 1:5 cu soluie
fiziologic de NaCl, se va repeta determinarea i
rezultatul se va nmuli cu 5.

PROBA:
Ser nehemolizat.
Plasm obinut din snge recoltat pe EDTA sau
heparin.

30

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

CREATININA ENZIMATIC
Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
46161

Reactiv lichid n doi componeni

1x600ml
46162

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Creatinin + H2O creatininaz creatin


Creatin + H2O creatinaz sarcozin + carbamid
Sarcozin +O2 sarcozinoxidaz glicin + HCHO + H2O2
H2O2 + EHSPT + 4-aminoantipirin H2O2 chinon roie
+ 4H2O
EHSPT= N-etil N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)n- toluidin

Reactivii sunt gata pentru folosire.


METODA DE LUCRU:
Reactiv R1
Ap distil.
Standard
Proba

LITERATUR:
Artiss J.D., Zak B.,: Clin. Chem. 30; 1389, (1984)

53-115 mol/L
7-16 mmol/24h

Reactiv R2
REACTIVI:
1.

>20 kU/L
>6 kU/L
>2 kU/L
>100 kU/L
>0,40 mmol/L

2. Reactiv (R2)
4-aminoantipirin
creatininaz
peroxidaz

>2,5 mmol/L
>250 kU/L
>50 kU/L

Standard
1 mL
15 L
-

Proba
1 mL
15 L

330 L

330 L

330 L

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C


se citete absorbana (A2) probei i a standardului
la 555 nm, n cuve de 1 cm, fa de martor.

Reactiv (R1)

creatinaz
sarcozinoxidaz
ascorbatoxidaz
catalaz
EHSPT

Martor
1 mL
15 L
-

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C


se va citi absorbana (A1) probei i a standardului
la 555 nm, n cuve de 1 cm, fa de martor. Dup
aceasta se mai adaug:

VALORI DE REFERIN:
Ser sau plasm
Urin

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CALCUL:
(A2 A1)proba /(A2 A1)standard x Cstandard =Cproba

LINEARITATE:
Pn la concentraia de 1770 mol/L, variaia
absorbanei este direct proporional cu concentraia
creatininei. Peste aceast valoare, proba se va dilua
cu soluie fiziologic de NaCl. Se va repeta
determinarea i la calcul se va lua n considerare
raportul de diluie.

Standard:
Standard de creatinin
PROBA:
Ser nehemolitic, plasm obinut din snge recoltat
pe heparin. Urin diluat cu ap distilat n
proporie de 1:100.

A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii
sunt stabili pn la data indicat pe ambalaj.

31

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 10x12 mL
Nr. cod: 44111

CREATININA ENZIMATIC

Creatinina se elibereaz n urma metabolizrii


fosfatului de creatin din esutul muscular.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi:

Soluia 1 (S1): se va dizolva coninutul unui flacon de


reactiv (R1) n cantitatea corespunztoare de reactiv
(R3).
Soluia 2 (S2): se va dizolva coninutul unui flacon de
reactiv (R2) n cantitatea corespunztoare de reactiv
(R3).

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Creatinin + H2O creatininaz creatin
Creatin + H2O creatinaz sarcozin + carbamid
Sarcozin +O2 sarcozinoxidaz glicin + HCHO + H2O2
H2O2 + EHSPT + 4-aminoantipirin H2O2 chinon
roie + 4H2O
EHSPT= N-etil N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)ntoluidin

Stabilitate:
20-25C
2-8C

1 spt.
4 spt.

METODA DE LUCRU:

LITERATUR:

Martor
Standard Proba
Soluia S1
1 mL
1 mL
1 mL
Proba
50 L
Standard
50 L
Ap distil.
50 L
Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 25C
sau 37C se mai adaug:
Soluia S2
200 L
200L
200L

Artiss J.D., Zak B.,: Clin. Chem. 30; 1389, (1984)

VALORI DE REFERIN:
Ser sau plasm
Urin

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

53-115 mol/L
7-16 mmol/24h

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
creatinaz
sarcozinoxidaz
peroxidaz

12000 U/L
6000 U/L
12000 U/L

2. Reactiv (R2)
4-aminoantipirin
creatininaz

2 mmol/L
180000 U/L

3. Reactiv (R3)
tampon fosfat, pH=8,1
EHSPT

50 mmol/L
0,78 mmol/L

Citirea absorbanei se va efectua la 555 nm, n cuve


de 1 cm prin dou metode:
a.
Metoda cu punct final:
Dup prima amestecare i incubare se va citi
absorbana (A1) probei i a standardului fa de
martor. Se va aduga soluia (S2) i se va incuba 15
minute la 25C sau 10 minute la 37C, dup care se
va citi absorbana (A2) probei i a standardului fa
de martor.
CALCUL:

Standard:
Standard de creatinin

(A2 A1)proba /(A2 A1)standard x Cstandard =Cproba

b.
Metoda cinetic:
Dup amestecare i incubare se va urmri variaia
absorbanei probei i a standardului n minutele 2
i 4 (A).

PROBA:
Ser nehemolitic, plasm heparinic.
Urin diluat cu ap distilat n proporie de 1:100.

CALCUL:
Aprob /Astandard x Cstandard = Cproba
Metoda este linear pn la 1770 mol/L.

32

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CREATIN CHINAZA
(CK-NAC)
Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
40401

12x10ml
40411

15x20ml
40421

60x20ml
40422

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Fosfat de creatin + ADP CK creatin + ATP

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv R2 n cantitatea
corespunztoare din reactivul R1.
Stabilitatea soluiei:
2-8C
2 spt.
20-25C
2 zile

ATP + D-glucoz HK D-glucoz-6-fosfat +ADP


D-glucoz-6-fosfat + NADP G-6-PDH D-glucoz-6fosfat + NADPH + H+

LITERATUR:

METODA DE LUCRU:

Ann. Boil. Clin.: 40, 99, (1982)

Amestec de reactivi
Proba

DOMENIUL DE REFERIN:
Femei
Brbai

25C
10-70 U/L
10-80 U/L

30C
15-110U/L
15-130U/L

37C
24-170U/L
24-195U/L

Se amestec i se incubeaz timp de 2 minute la


37C. Variaia absorbanei se va citi la 340 nm, n
cuve de 1 cm, timp de 3 minute, fa de ap distilat.
Se va determina variaia absorbanei pe minut(A/
min).
Mod de msurare: cinetic (cu factor).

REACTIVI:
1.

Reactiv (R1)

Tampon imidazol, pH=6,7


Acetat de magneziu
2.

100 mmol/L
10 mmol/L

CALCUL:
334 nm: U/L= A/min. x 8252
340 nm: U/L= A/min. x 8095
365 nm: U/L= A/min. x 14571

Reactiv (R2)

N-acetil cistein
ADP
AMP
NADP
D-glucoz
Pentafosfat de diadenozin
EDTA
Hexochinaz
6-fosfat dehidrogenaz de glucoz
fosfat de creatin

1 mL
20 L

20 mmol/L
2 mmol/L
5 mmol/L
2 mmol/L
20 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
3500 U/L
2000 U/L
30 U/L

LINEARITATE:
Dac variaia absorbanei pe minut depete 0,250,
proba se va dilua cu soluia fiziologic de NaCl n
propoie de 1:10. Se va repeta determinarea i la
calcul se va lua n considerare diluia.
OBSERVAIE:
A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.

PROBA:
Ser nehemolitic.

33

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

CREATIN CHINAZA

Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
46961

Reactiv lichid n doi componeni

1x600ml
46962

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:
Prepararea amestecului de reactivi i stabilitatea lor:
Pregtirea reactivului de lucru cu un
singur component: se vor dizolva patru pri
din reactivul R1 ntr-o parte din reactivul R2.
Stabilitate:
20 - 25 C
2 zile
2-8C
1 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata
pentru folosin.

Fosfat de creatin + ADP CK creatin + ATP


ATP + D-glucoz HK D-glucoz-6-fosfat +ADP
D-glucoz-6-fosfat + NADP+ G-6-PDH glucoz-6-fosfat
+ NADPH + H+

LITERATURA:
Mathieu M. Ann. Biol. Clin., 40,87, 1987

DOMENIUL DE REFERIN:
Femei
Brbai

25C
10-70 U/L
10-80 U/L

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

30C
15-110U/L
15-130U/L

37C
24-170U/L
24-195U/L

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:
Amestecul de reactivi
1mL
Proba
40 L
Dup amestecare i o incubare de 3 minute la
30C(37C) se va citi valoarea absorbanei pe minut
la 340 nm timp de 3 minute, n cuve de 1 cm, fa
de apa distilat.

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Tampon imidazol, pH=6,7
Acetat de magneziu
N-acetil cistein
D-glucoz
EDTA
AMP
NADP
Pentafosfat de diadenozin
Hexochinaz

125 mmol/L
11 mmol/L
25 mmol/L
25 mmol/L
2 mmol/L
6,26 mmol/L
2,5 mmol/L
13 mmol/L
6800 U/L

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
1mL
Proba
50 L
Dup amestecare i incubare de 3 minute se mai
adaug:
Reactiv R2

250 L

Dup amestecare i o incubare de 2 minute la 30


C (37C), se va citi valoarea absorbanei pe minut
la 340 nm, timp de 3 minute, n cuve de 1 cm, fa
de apa distilat.

2. Reactiv (R2)
fosfat de creatin
166 mmol/L
ADP
15 mmol/L
6-fosfat dehidrogenaz de glucoz 8800 U/L

CALCUL:
30C

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

U/L= A/min x 4127

LINEARITATE:
Dac variaia absorbanei pe minut depete 0,250
la 340 nm, proba se va dilua cu soluia fiziologic
de NaCl n propoie de 1:10. Se va repeta
determinarea i la calcul se va lua n considerare
diluia.
A se ntrebuina numai la diagnostizri in
vitro.

PROBA:
Ser nehemolitic, plasm obinut din snge recoltat
pe EDTA sau heparin.
STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii
sunt stabili pn la data indicat pe ambalaj.
34

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CREATININA

Coninut: 2x125mL 20x250mL 2x250 mL


Nr. cod:
41741
41752
41751

Creatinina se elibereaz n urma metabolizrii


fosfatului de creatin din esutul muscular.

Stabilitate:
20-25C

PRINCIPIUL DETERMINRII:

METODA DE LUCRU:

Creatinina cu picratul alcalic formeaz un complex colorat. Viteza de formare a complecilor este
direct proporional cu coninutul n creatinin a
probei. Metoda cinetic diminueaz interferena
produs de alte substane.

Am. de reactiv
Standard
Proba

Standard
1 mL
100 L
-

Proba
1 mL
100 L

Dup amestecare i o incubare de 30 secunde la


25C (30-37C), se va citi absorbana (A1) probei
i a standardului la 492 nm (480-520 nm), n cuve
de 1 cm, fa de ap distilat. A doua citire se va
efectua dup exact 2 minute (A2).
Modul de msurare: cu punct final

LITERATUR:
Bartel S.H.: Clin. Chem. Acta 37, 193, (1972)

VALORI DE REFERIN:
Ser
53-115 mol/L
Urin 7-16 mmol/24h

1 lun

6-13 mg/L
0,8-1,8 g/24h

CALCUL:
(A2 A1)proba /(A2 A1)standard x Cstandard =Cproba

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Acid picric

A= absorbana
C= concentraia

8,73 mmol/L

ATENIE! Reactivul are efect iritant!

LINEARITATE:

2. Reactiv (R2)
Hidroxid de sodiu
Fosfat disodic

Intensitatea culorii este direct proporional cu


concentraia creatininei pn la 1326 mol/L (150
mg/L). Peste aceast valoare, proba se va dilua, iar
la calcul se va lua n considerare factorul de diluie.

300 mmol/L
25 mmol/L

Standard:
Standard de creatinin

OBSERVAIE:

PROBA:

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.


n cazul concentraiilor mari, prezena cetonilor,
acidului ascorbic, glucozei, carbamidei, albuminei
perturb rezultatul. Vitezele de reacie sunt diferite,
de aceea se recomand ca prima citire s se efectueze
imediat dup adugarea probelor (s nu depeasc
10 secunde).

Ser nehemolitic, plasm.


Urin de 12 sau 24 ore, diluat cu ap distilat n
proporie de 1:100.
EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi: se va
amesteca un volum de reactiv R1 cu un volum de
reactiv R2.

35

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 50 teste
Nr. cod:
1200301

100 teste
1200302

CRP LATEX

Kitul se utilizeaz la punerea n eviden pe lam a


proteinei C-reactive (PCR). Reactivul este o
suspensie uniform de particule latex sensibilizate
cu anticorpi antiprotein-C-reactiv uman. n serul
adulilor sntoi concentraia de PCR este sub 12
mg/L. Aceast concentraie crete n faza acut a
multor procese inflamatorii, n cele mai multe
infecii bacteriene, unele virale, n febra acut
reumatic, artrita reumatoid, n general n
majoritatea bolilor de colagen. PCR-ul crescut se
poate pune n eviden n infarctul miocardic acut
i n numeroase boli maligne, mai ales n faza de
metastaz. Dintre metodele imunologice care
servesc la evidenierea PCR, sensibilitatea testului
latex depete pe cea a precipitrii n gel sau
precipitrii capilare, rezultatele pozitive fiind mai
frecvente. Avantajul metodei latex const n
rapiditate: n decurs de 2 minute se poate interpreta.
Se utilizeaz numai ser. Serurile puternic lipemice
pot da rezultate fals pozitive.

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

PROBA:
Ser obinut dup coagularea complet a sngelui
venos. Se poate pstra 24 ore la temperatura de 28C, sau timp mai ndelungat, congelat la 20C .
S nu se foloseasc ser hemolizat, lipemic sau
infectat.
Alte materiale necesare, neincluse n kit:
Centrifug, pipete serologice sau automate,
cronometru, eprubete, ser fiziologic, surs de
lumin de intensitate mare.

METODOLOGIE:
- reactivii se las la temperatura camerei s se
nclzeasc
- reactivul PCR se omogenizeaz prin agitare
- se efectueaz de fiecare dat i controlul pozitiv
negativ
- n cercul de pe lam se pune o pictur din serul
de cercetat nediluat. Pipeta se pstreaz pentru
amestecare
- se adaug o pictur de reactiv PCR
- se amestec cele dou picturi cu partea plat a
pipetei, astfel ca s acopere toat suprafaa
cercului
- se rotete lama exact 2 minute
- se observ apariia sau absena aglutinrii
- Evaluarea de dup uscarea picturii d rezultate
eronate, fals pozitive
- se spal lama pentru examinarea urmtoare

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Dac n produsul examinat cantitatea de protein
C-reactiv atinge nivelul suficient de nalt, ntre
particulele sensibilizate de latex se formeaz puni
antigen-anticorp, suspensia i pierde aspectul
omogen, aglutinarea devenind observabil i cu
ochiul liber.
LITERATUR:
Tillet, W.S.,Francis T.: J. Exper. Med. 52; 561, (1930)
Singer, J.M., Plotz,C.M.: Amer. J.Med. 21;888, (1956)

INTERPRETARE:

CONINUTUL KITULUI:
- reactiv PCR-latex 2,5 ml
- tampon glicin-NaCl, pH8,6; concentrat 10 ml
- control pozitiv 1 ml
- control negativ 1 ml
- plac mprit n 6 cmpuri
- pipete de singur folosin, 50 buci
Serurile de control conin stabilizator.

Reacia pozitiv este semnalat de apariia


aglutinrii, care apare n general ntr-un minut.
Absena aglutinrii indic valori sub prag al
concentraiei de PCR, (rezultat negativ). La
interpretarea reaciei trebuie avut n vedere
omogenitatea suspensiei cu controlul negativ.
Serurile lipemice sau infectate pot da rezultate
fals pozitive.

PSTRARE I STABILITATE:
Reactivii se pstreaz la o temperatur de 2-8C
pn la data indicat pe etichet. Nu se vor congela.
36

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Continut: 5x10ml
Nr. cod:
44311

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CUPRU

Reactiv folosit pentru determinarea cantitativ a cuprului fr


deproteinizare n ser uman i plasm.

METODA DE LUCRU:
Determinrile se fac la urmtoarele parametrii:
Lungimea de und: 570-590 nm
Temperatur: 37C
Cuve: 1 cm
Mod de msurare: cu punct final

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Cuprul legat n ceruloplasmin se elibereaz ntr-un sistem
tampon cu pH=4,7. Ionii de Cu n prezena 3,5-dibrom-PAESA
formeaz un complex colorat, iar intensitatea coloraiei este
direct proporional cu coninutul de cupru din prob.

Determinare cu un reactiv

WR2
Ap distilat
Standard
Proba

LITERATURA:
Abe, Yamashit S., et.al.: Clin. Chem., 522;35 (1989)

VALORI DE REFERIN:
Femei
12,6-24,4 mmol/L
800-1550 mg/L
Brbai
11,0-22,0 mmol/L
700-1400 mg/L

Martor
1 mL
50L
-

Standard
1 mL
50L
-

Proba
1 mL
50L

Amestecai i citii absorbana (A) dup 5 minute de incubare


la 37C. Culoarea este stabil timp de 1 or.
Determinare cu 2 reactivi:

Ap distilat
Standard
Proba

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
tampon, pH=4,7
2. Reactiv (R2)
3,5-dibrom-PAESA
3. Reactiv (R3)
Catalizator
(Setul conine o spatul de dozare.)
Standard

Martor
50L
-

Standard
50L
-

Proba
50L

Amestecai i citii absorbana (A1)


Reactiv 2

50L

50L

50L

Amestecai i citii absorbana (A2) dup 5 minute de incubare


la 37C. Culoarea este stabil timp de 1 or.

PROB:
Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.

CALCUL:
Metoda cu un reactiv:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

ATENIE!
Se vor folosi eprubete de unic folosin sau eprubete din sticl
splate cu HCl 1N i ap distilat.

Metoda cu 2 reactivi
[(A2-A1proba )/( A2-A1standard ) ] x Cstandard=Cproba

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi:

A= absorbana
C= concentraia

WR1: Se va dizolva o lingur msurtoare de


reactiv R3 n coninutul unui flacon de reactiv R1.
Stabilitatea soluiei: 2-8C
15 zile

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 78.65 mol/L (5 mg/L)
OBSERVATIE:
Metoda este recomandata diagnosticarii in vitro.

WR2 (Soluia cromogen) : se vor amesteca 10 volume din


soluia WR1 cu 0,5 volume din reactivul R2. ( metoda cu un
reactiv).
Stabilitatea soluiei:
la temp. camerei: 3-4 ore
-20C: 3 sptmni
37

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

DIA QUICK PANOPTIC


Set de soluii pentru colorarea panoptic a preparatelor hematologice (frotiu periferic, punctate de
MO, sedimente din punctat articular, pleural, LCR) i histologice.
Reactivi:
1. DIA FIX PANOPTIC soluie de fixare i precolorare
2. DIA RED PANOPTIC soluie eozinofil
3. DIA BLUE PANOPTIC soluie bazofil
Metoda de lucru:
1. Executarea frotiurilor n mod obinuit
2. Reactivii se repartizeaz separat, n vase de sticl cu capac
3. Frotiul uscat este introdus n soluia de fixare timp de 1 secund, de 5-10 ori
4. Frotiul fixat este introdus n soluia DIA RED timp de 1 secund, de 3-13 ori
5. Frotiul este introdus n soluia DIA BLUE timp de 1 secund, de 3-15 ori
Intensitatea coloraiei se controleaz prin numrul introducerilor n soluii.
6. Splare cu ap distilat (nu este nevoie de splare ntre fazele coloraiei)
7. Uscare
n momentul apariiei precipitaiilor n soluii, sau a nuanelor de coloraie soluiile respective trebuiesc
schimbate.

Termen de valabilitate: 12 luni.

38

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 9x50 ml
Nr. cod:
45631

FIER (FERROZIN)

PRINCIPIUL DETERMINRII:

METODA DE LUCRU:

Fierul trivalent de pe transferin, este redus la fier


bivalent la un pH=4,8 de ctre ferozin, dnd un
complex colorat n rou. Absorbana msurat la
560 nm este direct proporional cu concentraia n
fier a probei.

Reactiv R1
Ap distil.
Standard
Proba

Martor
1 mL
200 L
-

Standard
1 mL
200 L
-

Proba
1 mL
200 L

Se amestec i se msoar absorbana pentru:


A1standard i A1proba .
Dup aceasta, se adaug la fiecare eprubet:

LITERATURA:
Williams et al.: Clin. Chem. 23; 237, (1977)
Stoockey L.: Anal. Chem., 42, 779 (1970)
Persijn et al.: Clin. Chem. Acta, 35, 91 (1971)

Reactiv R3

40 L 40 L

40 L

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 37C


se citete absorbana (A2) probei i a standardului
la 560 nm (550-570 nm), n cuve de 1 cm, fa de
martor.

VALORI DE REFERIN:
Fier total din ser:
Femei:
Brbai:

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

8,8-27 mol/L
9,0-30 mol/L

CALCUL:
REACTIVI:

(A2 A1)proba /(A2 A1)standard x Cstandard =Cproba

1. Reactiv (R1)
Acetat tampon pH=4,8
Guanidin
Tiouree

100 mmol/L
6 mmol/L
52,5 mmol/L

2. Reactiv (R2)
Acid ascorbic

150 mg/fiol

3.Reactiv (R3)
Ferrozin

40 mmol/L

LINEARITATE:
Pn la concentraia de 179 mol/L, variaia
absorbanei este direct proporional cu concentraia
fierului. Peste aceast valoare, proba se va dilua cu
soluie fiziologic de NaCl. Se va repeta
determinarea i la calcul se va lua n considerare
gradul de diluie.

Standard
OBSERVAIE:
PROBA:

Hemoliza perturb determinarea.


Reactivii R1, R2, R3 se pot amesteca nainte de a fi
dozai. Se adaug 1 fiol de R2 la 50 ml de R1, apoi
2 ml de R3. Se amestec atent.

Ser nehemolitic, plasm obinut din snge recoltat


pe heparin.
EFECTUAREA ANALIZEI:

A se ntrebuina numai la diagnosticri in vitro.

Prepararea reactivilor: se amestec o fiol de acid


ascorbic (R2) cu un flacon de reactiv R1 de 50 ml.
Stabilitate:

20-25C
3 zile
2-8C
2 spt.
Reactivul R3 este gata preparat i este stabil pn
la data de pe etichet.
39

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3ml
Nr. cod: 42401

12x10ml
42411

FOSFATAZA ACID

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Fosfatazele acide sunt izoenzime. Activitatea


catalitic, specificitatea substratului i sensibilitatea
fa de inhibitori, difer. n mediu alcalin majoritatea
izoenzimelor este labil. Important este izoenzima
de origine prostatic.

EFECTUAREA ANALIZEI:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Stabilitatea soluiei: (ferit de lumin)


20-25 C
6 ore
2-8 C
2 zile

Pregtirea reactivului de lucru: se dizolv


coninutul unui flacon de reactiv (R2) n cantitatea
corespunztoare de tampon (R1).

Fosfataza acid din ser catalizeaz transformarea


alfa-naftilfosfatului n 1-naftol i fosfat anorganic.
1-naftolul rezultat din reacie, cu Fast Red TR
formeaz un compus azo. Fracia de origine
prostatic se blochez cu tartrat.

METODA DE LUCRU:
Total
Soluia de lucru 1 mL
Tartrat (R3)
Proba/ser contr. 100L

LITERATUR:
Hillmann,G.J.:Clin.Chem.Clin.Biochem.9, 273, (1971)

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37


C se va citi valoarea absorbanei fa de aer la
405nm, n cuve de 1cm, timp de 3 minute. Se va
calcula variaia absorbanei pe minut (A/min.).
Metoda de msurare: cinetic.

VALORI DE REFERIN:
Fosfataz
acid total
Brbai
Femei
Fosfataz
acid prostatic

30C
max 8,0 U/L
max 5,7 U/L

37C
max 10 U/L
max 7,8U/L

CALCUL:
max 3,8 U/L

max 4,3U/L

Fosfataza acid total:


A/min x 750 = U/L
Fosfataza acid prostatic:
(A/min)total -(A/min)rez. la tartrat x 750=U/L

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
tampon citrat, pH=5,2

150 mmol/L

LINEARITATE:

2. Reactiv (R2)
alfa naftil-fosfat
Fast Red TR

Metoda este linear pn la o concentraie de 150


U/L. Dac variaia absorbanei pe minut depete
0,25, proba se va dilua cu soluie fiziologic de NaCl
n proporie de 1:10.

10 mmol/L
6 mmol/L

3. Reactiv (R3)
tartrat de sodiu

Rezis.la tartrat
1 mL
80 L
100L

400 mmol/L

OBSERVAIE:
Substratul este toxic, pipetarea cu gura este
interzis! Determinarea se va efectua imediat dup
recoltare. Substanele formatoare de chelai (EDTA)
deranjeaz determinarea.

PROBA:
Ser nehemolizat. NU se va lucra cu plasm.

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

40

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

FOSFATAZA ALCALIN

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

(A.L.P)
Coninut: 20x3ml

15x20ml

20x1000ml

Nr. cod:

40221

40262

40201

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Enzima catalizeaz hidroliza monofosfailor in


mediu alcalin. Prin metoda cinetic, fosfataza
alcalin din snge catalizeaz hidroliza substratului
fosfat de p-nitrofenil. n urma reaciei rezult pnitrofenolat i fosfat anorganic. Ionii de Mg++
mresc activitatea enzimei.

Pregtirea reactivului de lucru: se dizolv


coninutul unui flacon de reactiv (R2) n cantitatea
corespunztoare de tampon (R1).
Stabilitatea soluiei: (ferit de lumin)
20-25 C
48 ore
2-8 C
14 zile

fosfat de p-nitrofenil + H2Ofosfataza alcalina


Mg++
p-nitrofenolat + ortofosfat

METODA DE LUCRU:
Amestec de reacivi
Proba

LITERATUR:
Haussment T.U. et al.: Clin.Chim. Act. 35, 271-273, (1977)

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25 C


(30,37 C) se va msura valoarea absorbanei fa
de aer sau ap distilat la 405-410 nm, n cuve de
1cm. Se va calcula variaia absorbanei pe minut
(A/min.).
Metoda de msurare: cinetic.

VALORI DE REFERIN:
Copii
Aduli

25 C
30 C
37 C
110-720 145-950 180-1200 U/L
60-170 73-207 98-279 U/L

CALCUL:

REACTIVI:

A/min x 3000 = U/L

1. Reactiv (R1)

405nm:

sol. tampon
dietanolamina, pH= 9.8
Clorur de magneziu

LINEARITATE:
1 mol/L
0.6 mmol/L

Dac variaia absorbanei pe minut depete 0,25,


proba se va dilua cu soluie fiziologic de NaCl n
proporie de 1:10.

2. Reactiv (R2)
fosfat de p-nitrofenil (soluie)

1 mL
20 L

OBSERVAIE:

10 mmol/L

Substratul ALP este toxic, pipetarea cu gura este


interzis!
Determinarea se va efectua imediat dup recoltare.
Substanele formatoare de chelai (EDTA)
deranjeaz determinarea.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm obinut din snge
recoltat pe heparin.

41

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

FOSFOR

Coninut: 2x125ml
Nr. cod:
41341
PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

n mediu alcalin, fosforul mpreun cu molibdatul


de amoniu formeaz un complex anorganic de
fosfomolibdat. Determinarea pseudocinetic a
fosforului anorganic se efectueaz la 340 nm.

Reactivul este gata pentru folosire.


Stabilitatea soluiei: la 2-25C pn la data indicat
pe etichet.
METODA DE LUCRU:

Fosfor anorganic + molibdat de amoniuacid sulfuric


complex anorganic de fosfomolibdat

Apa distil.
Standard
Proba
Reactiv R1

LITERATUR:
Daly J., Erthingshausen G.: Clin. Chem. 18, 263 (1972)

0.87-1.45 mmol/L
10.4-28.8 mmol/24h

REACTIVI:

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
210 mmol/L
650 mol/L

A= absorbana
C= concentraia

2.Reactiv (R2)
soluie standard (fosfor)

Proba
10L
1 mL

CALCUL:

1.Reactiv (R1)
acid sulfuric
molibdat de amoniu

Standard
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 2025C, se va citi absorbana probei i a martorului


la 340 nm, n cuve de 1 cm, fa de martor.
Modul de msurare: cu punct final

VALORI DE REFERIN:
Ser, plasm
Urin

Martor
10L
1 mL

1,62 mmol/L

LINEARITATE:

PROBA:

Intensitatea culorii este direct proporional cu


concentraia, pn la 6.46 mmol/L.

Ser nehemolitic sau plasm heparinizat. Urin


diluat cu ap distilat n proporie de 1:10.

OBSERVAIE:
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.
Dac serul este lipemic, se va prepara o soluie
blanc: 10 L ser se vor dilua cu soluie fiziologic
de NaCl i se va citi absorbana la 340 nm.

42

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 50 teste
Nr. cod:
1200201

100 teste
1200202

FR LATEX

Kitul servete la evidenierea factorului reumatoid


(FR) din ser. Reactivul FR-Latex este o suspensie
de particule uniforme de latex, sensibilizate cu
imunoglobulin uman. Factorii reumatoizi sunt
autoanticorpi anti-fragment ai imunoglobulinelor G.
Majoritatea lor aparin clasei IgM, restul sunt de
tip IgG, respectiv IgA. n 70-80% a bolnavilor
suferinzi de artrit reumatoid FR este prezent n
titrii nalte. n osteoartrite i febra reumatic, numai
2-3% a cazurilor sunt pozitive.

PROBA:
Ser obinut dup coagularea complet a sngelui recoltat
din ven. Serul poate fi meninut 24 ore la 2-8C sau
timp mai ndelungat congelat la 20C. Nu se vor folosi
seruri hemolizate, lipemice sau infectate.

METODOLOGIE:
-

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Dac sunt prezente factorii reumatoizi, anticorpii


antiimunoglobulinici realizeaz puni ntre particulele
latex, suspensia i pierde caracterul omogen, aglutinarea
particulelor devine observabil i cu ochiul liber.

LITERATUR:
Waaler, E.:Acta Path Microb. Scand.17,182 (1940)
Hannestad, K.: Clin. Exp. Immunol. 3,671, (1968)
Lane, J.J.Jr.,Decker,J.L.: JAMA 173, 982, (1960)
Singer, J.M.Am.J. Med., 31, 706-779 (1961)

CONINUTUL KITULUI:

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

substanele se las s se nclzeasc la temperatura


camerei
reactivul se omogenizeaz prin agitare
se efectueaz de fiecare dat i controlul pozitiv
negativ
n cercul trasat pe lam se pune o pictur din serul
de cercetat nediluat. Pipeta se pstreaz pentru
amestecare.
se adaug o pictur de reactiv
se amestec cele dou picturi cu partea plat a
pipetei, astfel ca s acopere toat suprafaa cercului
se rotete lama exact 2 minute
se observ apariia sau absena aglutinrii
Evaluarea de dup uscarea picturii d rezultate
eronate
se spal lama pentru examinarea urmtoare.

INTERPRETARE:
Reacia POZITIV este semnalat de apariia
aglutinrii. Absena aglutinrii indic o concentraie sub
prag al FR (reacie NEGATIV.) La interpretarea
rezultatelor se ia n considerare omogenitatea suspensiei
cu controlul negativ. Dac controlul pozitiv i negativ
nu dau rezultatul adecvat, kit-ul trebuie schimbat.
Determinarea FR ajut la diferenierea artritei
reumatoide de febra reumatic: n primul caz obinem
rezultat pozitiv n 80%, n cazul din urm de obicei nu
se poate evidenia FR. FR mai poate fi pus n eviden
n aprox. 6% din cazurile de poliartrit nodoas, lupus
eritematos, unele inflamaii cronice ca lepra, TBC, sifilis,
endocardita bacterian.

Suspensie de latex sensibilizat cu IgG uman, n tampon glicin-NaCl, cu pH=8,6


Control pozitiv
Control negativ
Plci de unic folosin, mprite n 6 cmpuri
Pipete de o singur folosin

Serurile de control conin stabilizator. Reactivii conin


azotit de sodiu n concentraie de 1 mg/mL .

MOD DE PSTRARE, STABILITATE:


Nu se congeleaz. inut la temperatura de 2-8C , kitul

este stabil pn la data indicat pe etichet.


Utilizabilitatea reactivului este confirmat de reacia
adecvat a controalelor.

Alte materiale necesare neincluse n kit:


Centrifug, pipete serologice sau automate,
cronometru, baghete de sticl, eprubete, ser fiziologic,
surs de lumin de intensitate mare.

43

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
40501

9x50ml
40531

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

GAMMA GT

20x100ml
40562

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

-GT catalizeaz transferul - glutamilului de pe


substratul L - - glutamil - 3carboxi - 4-nitroanilida
pe glicilglicina. Creterea valorii absorbanei
msurat la 405 nm este n corelaie cu formarea 4nitroanilidei i este direct proporional cu
activitatea gamma-GT.

Pregtirea reactivului de lucru: se va dizolva


prin agitare coninutul unui flacon de reactiv (R2)
n cantitatea corespunztoare de reactiv (R1).
Stabilitatea soluiei:
20 25 C
7 zile
2 8 C
10 zile
Dac extincia reactivului de lucru la 405 nm fa
de apa distilat este mai mare de 0,8 acesta NU se
va folosi.

L--glutamil-3L--glutamil- GT
carboxi-4+ glicilglicina
- glicilglicina +
nitroanilida
+ 3-carboxi-4 - nitroanilina

METODA DE LUCRU:

LITERATUR:

Amestec de reactivi
Proba

Szasz G.: Clin. Chem. 15,124.(1969)


Lum G. et all. Clin. Chem. 18,358. (1972)

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25C


(30C,37C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
405 nm (410 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat sau aer. Se va urmri variaia absorbanei
pe minut (A/min) timp de 3 minute.
Metoda de msurare: cinetic

VALORI DE REFERIN:
Brbai
Femei

25C
6-28 U/L
6-18 U/L

30C
8-38 U/L
5-25 U/L

1 mL
100 L

37C
11-50 U/L
7-32 U/L

REACTIVI:
CALCUL:
1. Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH =8,1
Glicilglicin

405 nm:
410 nm:

100 mmol/L
100 mmol/L

=U/L
=U/L

LINEARITATE:

2. Reactiv (R2)
L - - glutamil
3-carboxi -4-nitroanilid

A/min x 1190
A/min x 1339

Dac variaia absorbanei pe minut la 405 nm


depete 232 U/L, se va repeta determinarea cu
serul diluat cu soluie fiziologic de NaCl n
proporie de 1:10, i rezultatul se va nmuli cu 10.

4 mmol/L

PROBA:

OBSERVAIE:

Ser nehemolizat.

Este interzis pipetarea cu gura!


Anticoagulanii, ca citratul, oxalatul, EDTA perturb
determinarea (nu este indicat utilizarea plasmei).
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

44

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

- GT
Reactiv lichid cu doi componeni

Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

47262

47261

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Determinarea cinetic a activitii - glutamiltransferazei:

Prepararea amestecului de reactivi i stabilitatea lor:


Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva patru pri din reactivul
R1 ntr-o parte din reactivul R2.
Stabilitate:
20 - 25 C
5 zile
4C
3 spt.
Reactivii cu doi componeni sunt gata
pentru folosire.

GLUPA-C + glicilglicin -GT L-- glutamilglicilglicin + 5- amino-2- acid


nitrobenzoic

GLUPA-C= L-- glutamil-3-carboxi-p- nitroanilida


LITERATUR:

Metoda de lucru cu un singur reactiv:

Szasz G., Clin. Chem., 22, 2051. 1976;

Amestecul de reactivi
Proba

VALORI NORMALE:
Femei
Brbai

30C
4-25 U/L
7-34 U/L

37C
5-32 U/L
10-45 U/L

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la


30C(37C) se va citi valoarea absorbanei pe minut
la 405 nm timp de 3 minute, n cuve de 1 cm, fa
de apa distilat.

REACTIVI:

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
1mL
Proba
100 L

1. Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH=8,25
Glicilglicin

125 mmol/L
140 mmol/L

Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai


adaug:

2. Reactivi (R2)
GLUPA-C

1mL
100 L

Reactiv R2
22 mmol/L

250 L

Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 30 C,


se va citi valoarea absorbanei pe minut la 405 nm,
timp de 3 minute, n cuve de 1 cm, fa de apa
distilat.

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.


PROBA:
Ser nehemolizat.

CALCUL:
Cu un singur component:
U/L= A/min x 1158
Cu doi componeni:
U/L= A/min x 1421

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2- 8 C, reactivii sunt
stabili pn la data indicat pe ambalaj.

LINEARITATE:
Dac valoarea absorbanei pe minut la 405 nm depete
0.20, proba se va dilua cu ser fiziologic de NaCl n
proporie de 1:10, dup care se va repeta determinarea.
45

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

GLUCOZA GOD/PAP

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid cu un component


Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
46861

1x600ml
46862

PRINCIPIUL DETERMINRII:

METODA DE LUCRU:

Determinarea enzimatic-colorimetric a
glucozei.
Glucoza+O2

glucoz-oxidaz

Reactiv
Ap distil.
Standard
Proba

acid gluconic + H2O2

2H2O2 +4 amino-antipirin + fenol peroxidaz


chinonimina + 4H2O

Martor
1 mL
10 L
-

Standard
1 mL
10 L
-

Proba
1 mL
10 L

Se amestec i se incubeaz timp de 5 minute la


37C. Variaia absorbanei se va citi la 500 nm(492520 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

LITERATURA:
Trinder P.,: Ann. Clin. Biochem., 6,(1969), 24.

CALCUL:
VALORILE DE REFERIN:
Ser
Liquor

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

3.89-5.84 mmol/l 0.70-1.05 g/l


2.78-3.89 mmol/l 0.50-0.70 g/l

A= absorbana
C= concentraia

REACTIVI:
Tampon TRIS, pH=7,40
Fenol
4-amino antipirin
Peroxidaz
Glucoz-oxidaz

LINEARITATE:

100 mmol/L
10 mmol/L
0,3 mmol/L
700 U/L
10000 U/L

Metoda este linear pn la 40 mmol/L( 7,2 g/L).


OBSERVAIE:
A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.

Standard
Glucoz standard
Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.
PROBA:
Ser nehemolitic, plasm heparinizat.
Liquor (LCR).
STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt
stabili pn la data indicat pe ambalaj.

46

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

GLUCOZA
GOD/PAP
Coninut: 2x125ml
Nr. cod:
40841

4x250ml
40851

40x500mL
40882

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Glucoz-oxidaza transform glucoza n acid gluconic. Peroxidaza descompune H2O2 rezultat din
prima reacie. n final rezult un complex colorat.

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de R2 n cantitatea
corespunztoare de R1.

Glucoza+O2 glucoz-oxidaz acid gluconic + H2O2

Stabilitatea soluiei (n sticl brun):


20-25C
14 zile
2-8C
90 zile

2H2O2 +4 amino-antipirin + fenol peroxidaz


chinonimina + 4H2O

METODA DE LUCRU:
LITERATURA:
Trinder P.,: Ann. Clin. Biochem., 6, 24(1969)
Dingeon B. Ann. Biol. Clin. 33, 3 (1975)
Lott J. A. Clin. Chem. 21, 1754 (1975)

Reactiv
Ap distil.
Standard
Proba

VALORI NORMALE:
Ser sau plasm 3,9-5,8 mmol/L
Liquor (LCR) 2,8-3,9 mmol/L

1.Reactiv (R1)
90 mmol/L
0.5 mmol/L

CALCUL:

2.Reactiv (R2)
Glucoz-oxidaz
Peroxidaz
4-amino-antipirin

Standard Proba
1 mL
1 mL
10 L
10 L

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 37C


sau 30 minute la 20-25C, se va citi absorbana
probei i a standardului fa de martor la 505
nm(490-550 nm), n cuve de 1 cm. Culoarea probei
rmne stabil timp de 30 minute.
Mod de msurare: cu punct final.

0,7-1,05 g/L
0,5-0,7 g/L

REACTIVI:
Tampon TRIS, pH=7.5
Fenol

Martor
1 mL
10 L
-

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

10000 U/L
1000 U/L
2.6 mmol/L

A= absorbana
C= concentraia

Standard
Glucoz standard

LINEARITATE:

PROBA:

Pn la 40 mmol/L( 7,2 g/L) valoarea absorbanei


este direct proporional cu concentraia glucozei.
Peste aceast valoare proba se va dilua.

Ser nehemolitic, plasm heparinizat, snge


deproteinizat.
Liquor.

OBSERVAIE:
Metoda nu este recomandat pentru determinarea
glucozei din urin. La probele deproteinizate,
glutationul de origine eritrocitar poate influena
rezultatul.
A se ntrebuina numai la diagnosticri in vitro.
47

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

GLUCOZA - HK

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reactiv lichid n doi componeni


Coninut: 1x120ml
Nr. cod:
47361

1x600ml
47362

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Glucoza+ATP

HK

G-6-P + NAD

G-6-PDH

EFECTUAREA ANALIZEI:

G-6-P + ADP
gluconat-6-fosfat + NADH +
H+

Stabilitatea soluiei:
20-25C
14 zile
2-8C
2 luni

HK= hexochinaza
G-6-P= glucoz-6-fosfat
G-6-PDH= glucoz-6-fosfat-dehidrogenaza

LITERATURA:
Peterson,J.L.,Young,D.S.,Anal Biochem.,23,301(1968)
Bondar, R.J.L.,Mead,D.C., Clin. Chem. 20, 586 (1974)

0,65-1,10 g/L
0,50-0,70 g/L

REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
Tampon Pipes, pH=7.6
NAD
ATP

80 mmol/L
3 mmol/L
1.7 mmol/L

2.Reactiv (R2)
Sare de magneziu
HK
G-6-PDH
Standard
Glucoza

Reactivii cu doi componeni sunt gata pentru


folosire.

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:
Martor
Standard Proba
Reactiv
1 mL
1 mL
1 mL
Ap distil.
10 L
Standard
10 L
Proba
10 L
Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C,
se va citi valoarea absorbanei fa de martor la 340
nm(334-365 nm), n cuve de 1 cm.
Metoda de lucru cu doi componeni:
Martor
Standard Proba
Reactiv R1
1 mL
1 mL
1 mL
Ap distil.
10 L
Standard
10 L
Proba
10 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
250L
250L
250L

VALORI NORMALE:
Ser
3,61-6,11 mmol/L
Liquor 2,78-3,89 mmol/L

Pregtirea reactivului cu un singur component: se vor dizolva patru pri din reactivul
R1 ntr-o parte din reactivul R2.

4 mmol/L
1700 U/L
1700 U/L
5.56 mmol/L

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la


37C se va citi valoarea absorbanei fa de martor
la 340 nm(334-365 nm), n cuve de 1 cm.

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.


PROBA:

CALCUL:

Ser nehemolitic, plasm obinut din snge recoltat


pe heparin. LCR.

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

STABILITATEA REACTIVILOR:

A= absorbana
C= concentraia

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt


stabili pn la data indicat pe ambalaj.

A se ntrebuina numai la diagnosticri in


vitro.
48

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 50 teste
Nr. cod:
1200601

HCG LATEX

Testul HCG Latex pune n eviden prin aglutinare


direct, HCG din urin

METODOLOGIE:
-

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Hormonul gonadotrop uman de origine placentar


HCG apare dup fecundaie n urin. Punerea n
eviden a HCG din urin pledeaz n general pentru
graviditate. La baza reaciei st un fenomen de aglutinare
rapid tip latex ntre cele dou componente: produsul
de cercetat care conine HCG i anti-HCG adsorbite pe
particulele de latex. Dup amestecarea celor dou
componente cnd anticorpii anti-HCG adsorbite pe
particulele de latex sunt puse n contact cu produsul de
cercetat care conine o cantitate suficient de HCG - ,
apare o aglutinare evident. n cazul coninutului sub
prag suspensia de latex rmne omogen.

Reactivii se las la temperatura camerei prealabil


efecturii analizei
Se folosesc plci curate, splate n ap fierbinte i
pipete de unic folosin
Dispozitivul de distribuie se introduce n produsul
patologic, apsnd cu degetele. ncetnd presiunea,
produsul umpl dispozitivul. innd dispozitivul
perpendicular pe lam, se elibereaz o pictur n
cerc.
Se adaug o pictur de reactiv latex-anti-HCG, se
ntinde pe toat suprafaa cercului.
Se rotete lama timp de 2 minute, imediat se citete
reacia, de preferabil la lumina intensiv sau lamp
fluorescent
La fiecare serie s se foloseasc controlul pozitiv.

ATENIE:

SENSIBILITATEA TESTULUI:

1. Urina control pozitiv este iniial steril. Pentru


evitarea contaminrii, dup folosire se nchide
imediat i se pune la 2-8C.
2. Reactivul latex-HCG se usuc rapid la aer la gura
flaconului apare latexul. Dup folosin se nchide
imediat flaconul.

Sensibilitatea reaciei este calibrat pentru evidenierea


unei valori minime de 300 UI/ml HCG nivel care apare
n general la 2 sptmni dup fecundaie.

LITERATUR:
Batzer, F.R.: Fertility and Sterility, 34, 1, (1980)

EVALUARE:

CONINUTUL KITULUI:
-

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Reacia este POZITIV dac dup 2 minute apare


aglutinarea amestecului. Pe baza coninutului de HCG
a urinei sarcina este probabil.
Reacia este NEGATIV dac dup 2 minute
suspensia rmne omogen. n acest caz nivelul HCG
este sub prag. Dac exist suspiciul sarcinii, se repet
reacia cu urina recoltat dup cteva zile.

suspensie latex sensibilizat cu anticorpi anti-HCG


control pozitiv HCG
picurtor, amestector
lam special cu 3 lcauri

PSTRARE I STABILITATE:
Reactivii se pstreaz la o temperatur de 2-8C pn la
data indicat pe etichet. Nu se vor congela.

Substane care interfereaz cu reacia:

Anumite medicamente pot cauza reacii fals pozitive sau


negative. Se recomand o pauz n administrarea
acestora naintea recoltrii urinii. Coninutul foarte nalt
de proteine poate inhiba n mod nespecific reacia, deci
poate da rezultat fals pozitiv. De asemenea un fals pozitiv
poate cauza i coninutul nalt de hormon luteinizant a
urinei n menopauz.

PROBA:
Se folosete urin recoltat ntr-un vas curat. Nivelul
HCG este cel mai ridicat n prima urin de diminea,
deci acesta este cel mai indicat pentru analiz.
Centrifugarea urinii este necesar numai n caz de
turbiditate excesiv. Se recomand efectuarea reaciei
cu urina proaspt recoltat, dar urina se poate pstra la
2-8C timp de 72 ore. nainte de efectuarea analizei urina
se las la temperatura camerei.

49

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

DEHIDROGENAZA ACIDULUI LACTIC (LDH)


Coninut: 20x3ml
Nr. cod:
42101

15x20ml
42111

60x20ml
42112

Dehidrogenaza acidului lactic este o enzim


prezent n aproape toate celulele. Este o enzim
tetramer. Se cunosc 5 tipuri de izoenzime: LDH-1;
LDH-2; LDH-3; LDH-4; LDH-5, n proporie de
20:34:23:12:11. Activitatea LDH din ser este
definit n mare parte de LDH-1 i LDH-2 sunt
specifice miocardului i globulelor roii; LDH-5
este specific ficatului. Activitatea izoenzimelor
difer n funcie de substraturi. n cazurile de infarct miocardic activitatea enzimei dup 8-12 ore
crete considerabil, iar dup 4-5 zile scade.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva
coninutul unui flacon de reactiv R2 n cantitatea
corespunztoare de reactiv R1.
Stabilitatea soluiei:
2-8C
6 zile
20-25C
48 ore
METODA DE LUCRU:
Amestec de reactivi
Proba

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Se amestec i se incubeaz timp de 1 minut la


25C( 30-37C). Variaia absorbanei se va citi la
340 nm (334-365 nm), n cuve de 1 cm, timp de 3
minute, fa de ap distilat. Se va determina variaia
absorbanei pe minut(A/min).
Mod de msurare: cinetic (cu factor).

Enzima LDH mpreun cu coenzima NADH


catalizeaz transformarea piruvatului n lactat.
Piruvat + NADH + H+ LDH lactat + NAD+
LITERATURA:
Bergmeyer, H.U.J.. Clin. Biochem 13,507, (1975)
Howell B.F. et all. Clin. Chem. 25, 269 (1979)

CALCUL:

DOMENIUL DE REFERIN:

334 nm:
340 nm:
365 nm:

25C
120-240 U/L

30C
160-320 U/L

37C
230-460 U/L

= U/L
= U/L
= U/L

Dac variaia absorbanei pe minut depete 0,22


la 334, 340 nm sau 0,12 la 365 nm, proba se va
dilua cu soluia fiziologic de NaCl n propoie de
1:10. Se va repeta determinarea i la calcul se va
lua n considerare diluia.

1. Reactiv (R1)
50 mmol/L
0,6 mmol/L

2. Reactiv (R2)
NADH

A/min. x 8095
A/min. x 8252
A/min. x 15000

LINEARITATE:

REACTIVI:

Tampon TRIS, pH=7,5


Piruvat

1 mL
20 L

OBSERVAIE:
0,18 mmol/L

A se ntrebuina numai la diagnostizri in vitro.

PROBA:
Ser nehemolitic sau plasm obinut din snge
recoltat pe heparin.

50

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

LDH

Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1x100ml

1x600ml

Nr. cod:

46462

46461

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
1 spt.
2-8 C
4 spt
Reactivii cu doi componeni sunt gata
pentru folosire.

Determinarea cinetic a activitii LDH:


Piruvat + NADH + H+ LDH lactat + NAD+
LITERATUR:

METODA DE LUCRU:

Ann. Biol. Clin. 1982, 40:123

Metoda de lucru cu un singur reactiv:


Amestec de reactivi
1 mL
Proba
25 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25C
(30,37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
340 nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.

VALORI DE REFERIN:
30C
161-322 U/L

37C
240-480 U/L

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)

PROBA:

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
1 mL
Proba
50 L
Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
1 mL
Se amestec i dup o incubare de 1 minut la 25C
(30,37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
340 nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.

Ser nehemolizat.

CALCUL:

STABILITATEA REACTIVILOR:

340nm:
334nm:
365nm:

Tampon fosfat, pH=7,5


Piruvat

56 mmol/L
1,6 mmol/L

2. Reactiv (R2)
NADH

240 mol/L

Hemoliza deranjeaz determinrile.


Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt


stabili pn la data indicat pe ambalaj.

A/min x 8095
A/min x 8252
A/min x 15000

=U/L
=U/L
=U/L

LINEARITATE:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Dac variaia absorbanei pe minut la 340 nm


depete 0.15, proba se va dilua cu soluie
fiziologic de NaCl n proporie de 1:10, dup
care se va repeta determinarea i rezultatul se va
nmuli cu 10.

Pregtirea reactivului cu un singur component: se va dizolva coninutul reactivului R1 n


coninutul corespunztor de reactiv R2.

51

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

ALFA-HBDH
Reactiv lichid n doi componeni
Coninut: 1x100ml

1x600ml

Nr. cod:

45962

45961

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
1 spt.
2-8 C
4 spt
Reactivii cu doi componeni sunt gata
pentru folosire.

Determinarea cinetic a activitii hidroxibutirat-dehidrogenazei:


-cetobutirat + NADH + H+ -HBDH - hidroxibutirat
+ NAD

METODA DE LUCRU:
LITERATUR:

Metoda de lucru cu un singur reactiv:


Amestec de reactivi
1 mL
Proba
25 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut la 25C
(30,37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
340 nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.

Deutsche Gesellschaft fur Klinische Chemie, Z. Klin. Chem.


U. Klin. Biochem. 1972,10:182

VALORI DE REFERIN:
25C
55-145U/L

30C
70-190U/L

37C
80-220U/L

Metoda de lucru cu doi componeni:


Reactiv R1
1 mL
Proba
50 L
Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
1 mL
Se amestec i dup o incubare de 1 minut la 25C
(30,37 C) se va citi valoarea absorbanei (A) la
340 nm (334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap
distilat. Se va urmri variaia absorbanei pe minut
(A/min) timp de 3 minute.

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Tampon fosfat, pH=7,5
L- cetobutirat

62 mmol/L
6,2 mmol/L

2. Reactiv (R2)
NADH

240 mol/L

Hemoliza deranjeaz determinrile.


Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

CALCUL:
PROBA:

340nm:
334nm:
365nm:

Ser nehemolizat.

A/min x 8095
A/min x 8252
A/min x 15000

=U/L
=U/L
=U/L

STABILITATEA REACTIVILOR:
LINEARITATE:

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt


stabili pn la data indicat pe ambalaj.

Dac variaia absorbanei pe minut la 340 nm


depete 0.15, proba se va dilua cu soluie
fiziologic de NaCl n proporie de 1:10, dup care
se va repeta determinarea i rezultatul se va nmuli
cu 10.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Pregtirea reactivului cu un singur component:
se va dizolva coninutul reactivului R1 n coninutul
corespunztor de reactiv R2.

52

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

MAGNEZIU

Coninut: 1x250ml
Nr. cod:
45751

Magneziul este un cofactor necesar al activitii mai


multor enzime participante la metabolismul
hidrailor de carbon, sinteza proteinelor, contracia
esutului muscular. Joac rol important n
transmiterea excitaiei neuromusculare i n
mehanismul funcionrii pompei de calciu.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivii sunt gata pentru utilizare i au o stabilitate
pn la data menionat pe ambalaj.
METODA DE LUCRU:

PRINCIPIUL DETERMINRII:

Martor
1 mL

Standard
Proba
Reactiv

Ionii de magneziu cu albastrul de xilidin, n mediu


alcalin formeaz un complex colorat. Intensitatea
coloraiei este proporional cu concentraia ionilor
de magneziu.

Standard
10L
1 mL

Proba
10L
1 mL

Mg++ + albastru de xilidin OH- complex albastru de


xilidin - Mg

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 2537C, se va citi absorbana probei i a standardului


la 520 nm, n cuve de 1 cm, fa de martor.
Modul de msurare: cu punct final

LITERATUR:

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Bohuon C.:Clin. Chim. Acta, 7, 811 (1962)


Mann C.K., Zoe J.H.: Anal. Chim. Acta, 16 (1957)
Mann C.K., Zoe J.H.: Anal. Chim. 28 (1956)
Rice E.W., Lapra C.Z.:Clin.Chim.Acta,10, 360 (1964)

A= absorbana
C= concentraia
n cazul urinei, rezultatele se nmulesc cu factorul
de diluie.

VALORI DE REFERIN:
Ser, plasm

0,65-1,03
16-25

mmol/L
mg/L

LINEARITATE:
Intensitatea culorii este direct proporional cu
concentraia, pn la 2,06 mmol/L (50 mg/L).

REACTIVI:
1.Reactiv (R1)
tampon TRIS, pH=11,3
albastru de xilidin
detergeni

OBSERVAIE:

250 mmol/L
1 mmol/L

Se vor utiliza numai instrumente din material


plastic.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

2.Reactiv (R2)
Standard de magneziu
PROBA:
Ser nehemolitic sau plasm heparinizat.
Urin diluat cu ap distilat 1:10 cu pH-ul corectat
la 3,0-4,0 cu HCl 0,1N.

53

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

PROTEINA TOTAL
Metoda ultrasenzitiv

Coninut: 250ml
Nr. cod:
42051

METODA DE LUCRU:

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Proteinele din urin i lichid cefalo-rahidian n
prezena molibdatului de pirogalol formeaz un
complex de culoare roie. Absorbana maxim a
culorii complexului se va deplasa de la lungimea
de und de 467 nm la 598 nm.

Reactiv
Ap distil.
Standard
Proba

Watanabe N., Kamei S., Okubo A., Yamanak M., Osawa S.,
Makino K.: The Japanese Journal of Clinical Pathology 32
suppl; 227 (1984)

VALORI DE REFERIN:
< 200 mg/24h
150-450 mg/L

Proba
2,5 mL
50 L

CALCUL:

REACTIVI:

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Reactivi de culoare:
Rou de pirogalol
Molibdat de sodiu

Standard
2,5 mL
50 L
-

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 25C,


se va citi valoarea absorbanei la 600 nm, n cuve
de 1 cm, fa de martor. Citirea se va efectua ntrun interval maxim de 60 minute. n cazul n care
valoarea obinut depete valoarea 0,500,
determinarea se va efectua cu 20 L de prob, sau
cu prob diluat.
Modul de msurare: cu punct final.

LITERATUR:

Urin
Liquor (LCR)

Martor
2,5 mL
50 L
-

A= absorbana
C= concentraia

0,015 g/L
0,06 g/L

Dac se utilizeaz un volum de 20 L de prob,


rezultatul obinut se nmulete cu 2,5. Dac din
cauza coninutului ridicat de protein, proba trebuie
diluat, rezultatul se nmulete cu diluia.

Standard:
Standard de albumin/globulin
PROBA:

LINEARITATE:

Urin sau lichid cefalo-rahidian (LCR).


Urina sau LCR se folosete ca atare, nu necesit
prelucrare anterioar. Dac proba conine hematii
sau alte celule se va centrifuga, iar determinarea se
efectueaz din supernatant. n cazul n care
coninutul de protein a probei depete domeniul
de linearitate, proba se dilueaz cu ser fiziologic n
proporie adecvat. Rezultatul obinut se nmulete
cu diluia.

Valoarea absorbanei este direct proporional cu


concentraia n protein - n cazul unui volum de
50 L de prob - pn la 1500 mg/L iar n cazul
unui volum de 20 L de prob, pn la 4000 mg/L.
OBSERVAIE:
Fa de alte metode, exist o legtur ntre
concentraie i valoarea absorbanei. Dup
determinare, cuvele se cur bine prin cltire.
Rezultatul determinrii poate fi influenat de
prezena hemoglobinei sau a ionilor de fier sau
cupru.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivii sunt gata pentru folosire.
Stabilitatea soluiei:
ferit de lumin, la 2-8C, pn la data indicat pe
etichet.
54

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

PROTEINE (BIURET)

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Coninut: 1x250mL 1x1000mL


Nr. cod:
41951
41991
Proteinele sunt polimeri genetic codificai ai
aminoacizilor. Ele pot fi grupate n funcie de
structura lor molecular i proprietile fizicochimice. Rolul lor n organism este multiplu:
proteine de structur, enzime, hormoni, toxine,
proteine de transport. Unele fracii de proteine pot
fi separate i identificate prin electroforez i reacii
chimice respectiv imunologice specifice.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivul este gata preparat i se poate folosi pn
la data indicat pe flacon.
METODA DE LUCRU:

Reactiv
Ap distil.
Standard
Proba

PRINCIPIUL DETERMINRII:
Proteinele, n mediu bazic, n prezena srurilor
de cupru, formeaz complexe colorate (reacia
Biuret). Intensitatea culorii este proporional cu
concentraia proteinei din prob.

Martor
1 mL
10 L
-

Standard
1 mL
10 L
-

Proba
1 mL
10 L

Cu++ + Protein OH- complex Cu-Protein

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 25C


(30-37C), se va citi absorbana probei i a
standardului la 546 nm (530-580 nm), n cuve de 1
cm, fa de martor.
Modul de msurare: cu punct final

LITERATUR:

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Gornall, A. et al.: J. Biol. Chem., 117, 751 (1949)


Weichselbaum P.E.: Am. J. Path. 16, 40 (1946)

A= absorbana
C= concentraia

VALORI DE REFERIN:
Ser :

62-80 g/L

LINEARITATE:
Intensitatea culorii este direct proporional cu
concentraia proteinei pn la 100 g/L. Peste aceast
valoare, proba se va dilua cu soluie fiziologic de
NaCl , iar la calcul se va lua n considerare factorul
de diluie.

REACTIVI:
Reactiv colorant:
Iodur de potasiu
Tartrat de sodiu-potasiu
Sulfat de cupru
Hidroxid de sodiu

30 mmol/L
100 mmol/L
30 mmol/L
3.8 mol/L

OBSERVAIE:

Standard:
Standard de albumin bovin

n cazul serurilor lipemice se va utiliza corecia cu


blanc.
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

PROBA:
Ser nehemolitic.

55

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

RETI COUNT
Colorant pentru determinarea reticulocitelor din snge

n urma colorrii supravitale, moleculele colorantului se leag de resturile de reticulendoplasmatic


reticulocitar.
Prin determinarea numrului de reticulocite, se pot trage concluzii asupra activitii eritropoetice
regenerative.

Metoda de lucru:
1. Se vor amesteca 50 L snge total cu 50 L soluie colorant, dup care amestecul se va incuba
la temperatura camerei.
2. Dup aproximativ 20 de minute se va efectue frotiul.
3. Uscarea cel puin 20 minute a lamei la aer.
4. Se vor numra reticulocitele pe 1000 de eritrocite, proporia lor se va obine n .

Valori normale:
8 - 20 reticulocite

Stabilitate: 12 luni

56

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

SLE LATEX
Este un test latex rapid pentru punerea n eviden,
respectiv determinarea cantitativ a anticorpilor
antinucleoproteinici serici caracteristici lupusului
eritematos sistemic (LES). Aceti anticorpi sunt
considerai a fi responsabili pentru fenomenul LE
observat in vitro la 75-80% dintre bolnavii cu SLE.

Alte materiale necesare, neincluse n kit:


Ser fiziologic izotonic, eprubete, cronometru, pipete
diluante
PROBA:
Ser neinactivat. Serul poate fi meninut 48 ore la 28C sau timp mai ndelungat congelat la 20C. Nu
se vor folosi seruri hemolizate, lipemice sau
infectate.

PRINCIPIUL DETERMINRII:
n prezena anticorpilor anti - DNP, se realizeaz
puni ntre particulele latex sensibilizate, suspensia
i pierde aspectul omogen, aglutinarea devenind
observabil i cu ochiul liber.

METODOLOGIE:
- reactivii se las s se nclzeasc la temperatura
camerei
- reactivul SLE se omogenizeaz prin agitare
- se efectueaz de fiecare dat i controlul pozitiv
negativ
- n cercul trasat pe lam se pune o pictur din
serul de cercetat nediluat. Pipeta se pstreaz
pentru amestecare
- se adaug o pictur de reactiv SLE
- se amestec cele dou picturi cu partea plat a
pipetei, astfel ca s acopere toat suprafaa
cercului
- se rotete lama exact 2 minute
- se observ apariia sau absena aglutinrii
- Evaluarea de dup uscarea picturii d rezultate
eronate
- se spal lama pentru examinarea urmtoare.

LITERATUR:
Holman, H.R.,Kunkel, H.G.:Science, 126; 163 (1957)
Miescher,P.A., Strassel,R.: Vax Sang, 2;283 (1957)
Chapman,J.C.: Am. J. Med. Tech., 42; 154, (1976)
Tuffanelli, D. L.: Arch. Derm., 106; 553, (1972)

CONINUTUL KITULUI:

Suspensie de particule latex sensibilizate cu


DNP obinut din timus de viel
Control pozitiv
Control negativ
Plci
Pipete de o singur folosin

INTERPRETARE:

MOD DE PSTRARE, STABILITATE:

Aglutinarea indic prezena anticorpilor anti DNP


lupus specifice.
Rezultat pozitiv poate s apar i n caz de
sclerodermie, artrit reumatoid, dermatomiozit
precum i n alte boli ale esutului conjunctiv.

Nu se congeleaz. La temperatura de 2-8C kitul


este stabil pn la data indicat pe etichet.
Utilizabilitatea reactivului este confirmat de
reacia adecvat a celor dou seruri de control.

57

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

Syphilis RPR Newmarket


DETERMINAREA CALITATIV:

Set utilizat pentru determinarea calitativ rapid a


sifilisului din ser sau plasm.

1. Plasai 50 L de ser pe una din cercurile plcii de


reacie.
2. ntindei proba cu vrful pipetei ca s acopere uniform toat suprafaa cercului.
3. Omogenizai prin scuturare coninutul flaconului cu
antigen RPR.
4. Ataai acul la captul dozatorului i aspirai
coninutul flaconului cu antigen n dozator.
5. ntoarcei dozatorul n jos i eliminai aerul din interior prin strngerea uoar a pereilor flaconului.
6. innd dozatorul n poziie vertical, picurai peste
proba din cercul de reacie o singur pictur de
reactiv.
7. Se va ine placa de reacie cu primele dou degete
de la ambele mini i se va balansa-nclina uor timp
de 8 minute pentru a omogeniza reactanii.
8. Interpretai vizual reacia.
9. Se recomand efectuarea de probe cu serurile
pozitive respectiv negative din kit, pentru a controla
reacia serului bolnav.
10. Antigenul neconsumat se va reintroduce n flaconul
cu antigen RPR.
11. Dozatorul i acul se vor spla i usca dup fiecare
utilizare.

PRINCIPIUL DETERMINRII:

RPR utilizeaz particule de carbon nvelite cu antigen


cardiolipinic pentru detectarea anticorpilor prezeni n
ser sau plasm, provenite de la persoanele infectate cu
spirocheta Trepanoma pallidum.
Probele ce conin aceti anticorpi dau o reacie de
aglutinare a particulelor de carbon, care apar ca nite
aglomerri negricioase pe un fond alb. Rezultatul se
poate interpreta i cu ochiul liber.
Probele care nu conin anticorpi, prezint o suprafa
de reacie uniform, eventual cu un depozit punctiform
n mijlocul suprafeei de reacie.

ATENIE!
Numai pentru diagnostizri in vitro!
Toate serurile de control au fost gsite negative la
testarea AgHBs, HIV. Totui, se va lucra cu ele ca i
cum ar prezenta pericol de transmitere al acestor ageni
patogeni.

CONINUTUL KITULUI:

Antigen RPR
5x2 mL
Control pozitiv
Control negativ
Flacon de dozare
Ac pentru flaconul de dozare
Plci de reacie (10 sau 50 buc.)

Interpretarea rezultatelor:
Intens pozitiv: se observ aglomerri mari de particule.
Pozitiv: se observ aglomerri de particule mai puin
dispersate ca n primul caz.
Slab pozitiv: se observ aglomerri mai mici de particule
pe un fond cenuiu deschis.

DEPOZITARE:

Toi reactivii se vor pstra la temperatura de 4 C.


Termenul de valabilitate este cel de pe etichet.

Urm de reactivitate: se observ urme de aglomerri


de particule, care apar sub form de cerc n mijlocul
zonei de reacie sau dispuse la marginea cercului de
reacie.

METODA DE LUCRU:

Negativ: se formeaz o suprafa neted, uniform, de


culoare gri, sau un cerc de particule ne-agregate n
interiorul zonei de testare.

naintea nceperii examinrii, reactivii se vor lsa la


temperatura camerei. A nu se utiliza probe lipemice,
hemolizate sau cu turbiditate crescut.

58

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

TRIGLICERIDE ADPS

Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

46562

46561

PRINCIPIUL DETERMINRII:

STABILITATEA REACTIVILOR:

Lipoprotein-lipaza descompune trigliceridele n glicerin


i acizi grai. Glicerina este fosforilat de glicerinchinaz
n prezena ATP i a ionilor de magneziu. 3-fosfatul de
glicerin rezultat este oxidat de 3-fosfat-glicerin-oxidaza
n prezena oxigenului molecular. H2O2 mpreun cu
peroxidaza, fenolul i 4-aminoantipirina formeaz un
derivat rou de chinon, care poate fi msurat la 505
nm.

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt


stabili pn la data indicat pe ambalaj.

EFECTUAREA ANALIZEI:
Prepararea amestecului de reactivi i stabilitatea lor:
Pregtirea reactivului cu un singur component:
se vor dizolva dou pri din reactivul R1 ntr-o parte
din reactivul R2.
Stabilitate:
20 - 25 C
2 spt.
2 - 8C
2 luni
Reactivii cu doi componeni sunt gata pentru
folosire.

Trigliceride + H2O lipoprotein-lipaz glicerin + acizi grai


Glicerin + ATP glicerinchinaz 3-fosfat de glicerin + ADP
3-fosfat de glicerin+O2 3-fosfat - glicerin-oxidaz H2O2 + fosfat
de hidroxi-aceton
2 H2O2 + 4-aminoantipirin + p-clorfenol peroxidaz
derivat rou de chinon + 4 H2O

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:

LITERATUR:

Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv

Buccolo G.,David M., Clin. Chem. 19, 476 (1973)


Annoni G., Bottasso B.M., Ciaci D.,: lab J.J.Res. Lab.
Med., 9, 115,(1982).

VALORI DE REFERIN:
Brbai
Femei

0,68-1,88 mmol/L
0,45-1,60 mmol/L

Proba
10L
1 mL

Metoda de lucru cu doi componeni:


Martor
Standard Proba
Ap distil.
15L
Standard
15L
Proba
15L
Reactiv R1
1 mL
1 mL
1 mL
Dup amestecare i incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
500L
500L
500L

50 mmol/L
15 mmol/L
1 mmol/L
1,5 mmol/L
1800 U/L
450 U/L
1500 U/L

2. Reactiv (R2)
Standard de triglicerid

Standard
10L
1 mL

1. Reactiv (R1)
Tampon PIPES, pH=7,0
Magneziu
ADPS
ATP
Lipoproteinlipaz
Glicerinchinaz
3-fosfat-glicerin-oxidaz

Martor
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la


37C se va citi absorbana probei la 546 nm (520
-570 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

0,6-1,6 g/l
0,40-1,4g/l

REACTIVI:

4-amino-antipirin
peroxidaz

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

0,9 mmol/L
500 U/L

Dup amestecare i o incubare de 5 minute la 37C


se va citi absorbana probei la 546 nm (520 -570
nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat.

CALCUL:
(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

LINEARITATE:
59

Metoda este linear pn la 11,4 mmol/L (10 g/l).

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

TRIGLICERIDE PAP
Reactiv lichid cu un component
Coninut: 1x120ml

1x600ml

Nr. cod:

47162

47161

PRINCIPIUL DETERMINRII:

STABILITATEA REACTIVILOR:

Lipoprotein-lipaza descompune trigliceridele n


glicerin i acizi grai. Glicerina este fosforilat de
glicerinchinaz n prezena ATP i a ionilor de
magneziu. 3-fosfatul de glicerin rezultat este oxidat
de 3-fosfat - glicerin-oxidaza n prezena oxigenului
molecular. H2O2 mpreun cu peroxidaza, fenolul
i 4-aminoantipirina formeaz un derivat rou de
chinon, care poate fi msurat la 505 nm.

Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt


stabili pn la data indicat pe ambalaj.

Trigliceride + H2O lipoprotein-lipaz glicerin + acizi grai

Ap distil.
Standard
Proba
Reactiv

EFECTUAREA ANALIZEI:
Reactivii sunt gata pentru folosire.
METODA DE LUCRU:

Glicerin + ATP glicerinchinaz 3-fosfat de glicerin + ADP


3-fosfat de glicerin+O2 3-fosfat - glicerin-oxidaz H2O2 + fosfat
de hidroxi-aceton

Standard
10L
1 mL

Proba
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 10 minute la 37C


se va citi absorbana probei la 500 nm sau n cazul
unei lmpi de vaporizare de Hg la 546 nm, n cuve
de 1 cm, fa de martor.
Coloraia probei este stabil timp de o or.

2 H2O2 + 4-aminoantipirin + p-clorfenol peroxidaz


derivat rou de chinon + 4 H2O

LITERATUR:
Buccolo G.,David M., Clin. Chem. 19, 476 (1973)
Annoni G., Bottasso B.M., Ciaci D.,: lab J.J.Res. Lab.
Med., 9, 115,(1982).

CALCULARE:

VALORI DE REFERIN:
0.7 - 1.70 mmol/L

Martor
10L
1 mL

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

(0.60-1.50 g/L)

A= absorbana
C= concentraia

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)

LINEARITATE:

Tampon PIPES, pH=7,20


50 mmol/L
Magneziu
15 mmol/L
p- clorfenol
4 mmol/L
ATP
2,0 mmol/L
Lipoproteinlipaz
2000 U/L
Glicerinchinaz
400 U/L
3-fosfat-glicerin-oxidaz 1500 U/L
peroxidaz
2000 U/L
4-amino-antipirin
0,4 mmol/L

Absorbana este direct proporional cu concentraia


trigliceridelor pn la 11.4 mmol/L (10 g/L). Peste
aceast valoare, proba se va dilua cu soluie
fiziologic de NaCl, iar rezultatul se va nmuli cu
valoarea diluiei.
OBSERVAIE:
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

Standard de triglicerid
PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat.

60

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

Coninut: 12x10ml
Nr. cod:
40711

15x20ml
40721

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

TRIGLICERIDE

20x100ml 9x50ml
40762
40731

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Lipoprotein-lipaza descompune trigliceridele n


glicerin i acizi grai. Glicerina este fosforilat de
glicerinchinaza n prezena ATP i a ionilor de
magneziu. 3-fosfatul de glicerin rezultat este oxidat
de 3-fosfat - glicerin-oxidaza n prezena oxigenului
molecular. H2O2 mpreun cu peroxidaza, fenolul
i 4-aminoantipirina formeaz un derivat rou de
chinon, care poate fi msurat la 505 nm.

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactiv R2 n cantitatea
corespunztoare de reactiv R1.
Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2-8 C
METODA DE LUCRU:

Trigliceride + H2O lipoprotein-lipaz glicerin + acizi grai

Ap distil.
Standard
Proba
Am. reactiv

Glicerin + ATP glicerinchinaz 3-fosfat de glicerin + ADP


3-fosfat de glicerin+O2 3-fosfat - glicerin-oxidaz H2O2 + fosfat
de hidroxi-aceton

LITERATUR:
Young D. et all. Clin. Chem. 21,5 (1975)
Fossati P. et all. Clin. Chem. 28, 2077 (1982)

VALORI DE REFERIN:
0,65-1,85 mmol/L
0,55-1,6 mmol/L

Martor
10L
1 mL

Standard
10L
1 mL

Proba
10L
1 mL

Dup amestecare i o incubare de 6 minute la 37C


sau 20 minute la temperatura camerei se va citi
absorbana probei i a standardului la 505 nm (490
nm - 550 nm), n cuve de 1 cm, fa de martor.
Coloraia probei este stabil timp de 30 minute.
Metoda de msurare: cinetic (cu punct final).

2 H2O2 + 4-aminoantipirin + p-clorfenol peroxidaz


derivat rou de chinon + 4 H2O

Brbai
Femei

7 zile
28 zile

CALCUL:
0,5-1,6 g/l
0,45-1,4g/l

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
A= absorbana
C= concentraia

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)

LINEARITATE:
Tampon PIPES, pH=6,9
p- clorofenol

50 mmol/L
2 mmol/L

Absorbana este direct proporional cu concentraia


trigliceridelor pn la 20 mmol/L (7,8 g/L). Peste
aceast valoare, proba se va dilua cu soluie
fiziologic de NaCl, se repet determinarea, iar
rezultatul se va nmuli cu valoarea diluiei.

2. Reactiv (R2)
Lipoproteinlipaz
Glicerinchinaz
3-fosfat-glicerin-oxidaz
peroxidaz
4-aminoantipirin
ATP

150000 U/L
800 U/L
3000 U/L
350 U/L
0,7 mmol/L
30 mmol/L

OBSERVAIE:
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

Standard de triglicerid

PROBA:
Ser sau plasm heparinizat, nehemolizat.
61

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl

UREE (CARBAMIDA) U.V.


Reactiv lichid n doi componeni

Coninut: 1x120ml

1x500ml

Nr. cod:

46662

46661

str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;


tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

LITERATUR:

Prepararea amestecului de reactivi:


Pregtirea reactivului cu un component: se
vor dizolva trei pri din reactivul R1 ntr-o parte
din reactivul R2.
Stabilitatea soluiei:
20-25 C
1 spt.
2-8 C
4 spt.

Talke H., Schubert G.E. Klin. 1965, 43:174

Carbamida +H2O

ureaza

CO2 + 2NH4 +

2NH4 + + 2-cetoglutarat + 2NADH GLDH


2 L-glutamat + 2NAD+ + 2H2O
GLDH=glutamat dehidrogenaza

VALORI DE REFERIN:
Ser
Urin

2,50-7,49 mmol/L
20-35 g/24h

METODA DE LUCRU:
Metoda de lucru cu un singur reactiv:
Amestec de reactivi 1 mL
Proba
10 L
Dup amestecare i o incubare de 60 secunde la
37C se va citi valoarea absorbanei (A) la 340 nm
(334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap distilat,
timp de 3 minute.
Metoda de lucru cu doi componeni:
Reactiv R1
1.5 mL
Proba
20 L
Dup amestecare i o incubare de 1 minut se mai
adaug:
Reactiv R2
500 L
Dup amestecare i o incubare de 60 secunde la
37C se va citi valoarea absorbanei (A) la 340 nm
(334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de ap distilat,
timp de 3 minute.

0,15-0,4 g/L

REACTIVI:
1. Reactiv (R1)
Tampon TRIS, pH=7,60
-cetoglutarat
ureaz
GLDH

100 mmol/L
9 mmol/L
6500 U/L
1100 U/L

2. Reactiv (R2)
NADH

320 mol/L

3. Reactiv (R3)
Standard de uree

Reactivii cu doi componeni sunt gata


pentru folosire.

8,32 mmol/L

OBSERVAIE:

CALCUL:

Reactivii conin azotit de sodiu 0,1%.

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba
A= absorbana
C= concentraia

PROBA:
Ser nehemolizat sau plasm heparinizat. Nu se va
utiliza anticoagulant cu coninut de fluoruri sau de
ioni de amoniu.

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 66,7 mmol/L (4g/L).
Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

STABILITATEA REACTIVILOR:
Ferite de lumin i pstrate la 2-8C, reactivii sunt
stabili pn la data indicat pe ambalaj.
62

DIAGON ROMANIA
HAEMOLAB srl
str. Ceahlu 11/2, 4300, Tg. Mure;
tel. 065-163268, tel./fax 065-123682;
e-mail: haemolab@fx.ro
website: www.haemolab.ro

CARBAMIDA (UREE)
TEST UV
Coninut: 15x20ml

9x50ml

20x100ml

Nr. cod:

40631

40662

40671

PRINCIPIUL DETERMINRII:

EFECTUAREA ANALIZEI:

Ureaza catalizeaz transformarea carbamidei n


amoniu i CO2. Enzima glutamat-dehirogenaza
(GLDH) transform amoniul n prezena coenzimei
NADH i a 2-oxoglutarat lui n glutamat, n timp
ce NADH se transform n NAD.

Pregtirea amestecului de reactivi: se va dizolva


coninutul unui flacon de reactivi R2 n cantitatea
corespunztoare de reactiv R1.

Carbamida +H2O

ureaza

CO2 + 2NH4

Stabilitatea soluiei:
20-25 C
2-8 C

2NH4 + + 2oxoglutarat + 2NADH GLDH


2 L-glutamat + 2NAD+ + 2H2O

5 zile
28 zile

METODA DE LUCRU:

LITERATUR:

Amestec de reactivi
Standard
Proba

Fawcett, J.K.J.Clin.Path. 13, 15 (1960)


Chaney A.L. Clin. Chem. 8, 130 (1962).

Standard
1 mL
10L
-

Proba
1 mL
10L

REACTIVI:

Dup amestecare i o preincubare de 30 secunde la


37C se va citi valoarea absorbanei (A) la 340 nm
(334 -365 nm), n cuve de 1 cm, fa de aer sau ap
distilat, iar peste 60 secunde din nou. Se va calcula
variaia absorbanei pe minut (A/min).
Metoda de msurare: cinetic (descresctor).

1. Reactiv (R1)

CALCUL:

VALORI DE REFERIN:
Ser
Urin

2,47-7,47 mmol/L
20-35 g/24h

Tampon TRIS, pH=8,0

0,15-0,4 g/L

80 mmol/L

(Aproba/Astandard) x Cstandard=Cproba

2. Reactiv (R2)
Ureaz
GLDH
NADH
2-oxoglutarat

A= absorbana
C= concentraia

10000 U/L
16000 U/L
0.3 mmol/L
6,0 mmol/L

LINEARITATE:
Metoda este linear pn la 65 mmol/L (3,9 g/L).
Peste aceast valoare, proba se va dilua cu o soluie
fiziologic de NaCl, iar rezultatul se va nmuli cu
factorul de diluie.

3. Reactiv (R3)
Standard de uree

8,32 mmol/L

PROBA:

OBSERVAIE:

Ser nehemolizat sau plasm heparinizat. Nu se va


utiliza anticoagulant cu coninut de fluoruri sau de
ioni de amoniu.
Urin diluat cu ap distilat n proporie de 1:100.

Ionii de fluor i amoniu perturb determinarea.


Metoda este recomandat diagnosticrii in vitro.

63

Você também pode gostar