EXTRACCION DE ADN VEGETAL

INTRODUCCIN
La extraccin de ADN tiene como objetivo principal obtener la mayor cantidad
posible del ADN de alto peso molecular, libre de protenas, carbohidratos y
otros
inhibidores
de
enzimas.
Diferentes mtodos de extraccin han sido descritos para el aislamiento de
cidos nucleicos, aqu se trabajara especficamente con la extraccin de AND
vegetal, la presencia de algunos metabolitos secundarios y como interfieren
estos
en
el
aislamiento
del
ADN.
En plantas y hongos la pared celular es la primera barreras para la extraccin,
es necesario degradarla empleando mtodos fsicos o qumicos. Los mtodos
fsicos son los ms empleados, especialmente la congelacin y la maceracin.
Para bacterias y clulas desprovistas de pared, se emplean soluciones ricas
en
detergentes
o
enzimas,
para
destruir
las
membranas
celulares.
Una vez se ha destruido la membrana celular debe emplearse detergentes y
soluciones de alta (o baja) fuerza inica para permitir que el ADN se libere en
el
buffer.
La inhibicin de nucleasas es un factor critico, esta se alcanza empleando
buffer1 con pHs poco ptimos para accin de estas enzimas y adicionando
agentes quelantes de iones como el EDTA (Ethylen diamin tetre acetato).
Posteriormente se utilizan sustancias que desnaturalicen y separen las
protenas del ADN como fenol y cloroformo. Finalmente en ADN es
precipitado con alcohol y centrifugacin. El ADN libre de protenas y otros
compuestos
celulares
se
disuelve
en
un
buffer2
.
Algunos tejidos pueden poseer altas concentraciones de polisacridos, para
separarlos de los cidos nucleicos se puede emplear mayor cantidad de buffer
extraccin o sustancias como CTAB ( cetil trimethyammonium) que colabora
en
la
precipitacin
del
ADN.
El pH durante el proceso de extraccin debe ser ptimo, que evite la accin de
enzimas degradativas del cido nucleico. La mayora de los procedimientos
de extraccin de ADN emplean soluciones taponadas con pH 7.0-9.0.
Para
cuantificacin
del ADN
se hace
uso
de
la
espectrofotometra
(absorbancia a una longitud de honda de 260nm), o la observacin directa con
fluorescencia despus de teir el gel de extraccin con bromuro de
etidio.(mtodo de saram wrap, mtodo del plato de agarosa, mtodo del minigel) o por
fluorometria.
OBJETIVOS
-Comprender los procedimientos necesarios para extraer ADN de buena calidad y alta
pureza.
-Identificar la composicin de los diferentes reactivos usados durante la practica, los
cuales tienen funciones especiales en la extraccin del ADN vegetal.

-Reconocer el ADN extrado luego del procedimiento aplicado a las arvejas.

-Extraer y analizar el ADN de embriones de arvejas.
-Reconocer y comprender la importancia de las membranas que protegen las clulas
eucariontes.
-Observar la estructura fibrilar del ADN.
-Analizar los procesos necesarios para la extraccin del ADN de una arveja logrando as
determinar la importancia de cada proceso.
DATOS
A partir de arvejas se obtiene el ADN vegetal; se observa el ADN el cual presenta las
siguientes caractersticas:
ADN de arvejas
Color
Blanco
Aspecto
Largos hilos que forman una red. Esponjado. El ADN es una
larga y pegajosa molcula a la que le gusta formar grumos.

ANALISIS DE RESULTADOS
As como en cualquier organizacin la clula presenta un lugar de control que coordina las
diversas actividades que se realizan en su interior. En la clula eucarionte este lugar de
control es el ncleo el cual est separado del resto de la clula por una doble membrana;
en el interior del ncleo se encuentra la cromatina que es una masa densa de material,
esta masa
durante
la
divisin
se
condensa
formando
cromosomas.
Estos cromosomas constan de protenas y de una molcula muy importante que controla
la actividad que tiene la clula y contiene el material hereditario, el ADN.
El ADN (cido desoxirribonucleico) es un polmero formado por nucletidos cada
nucletido consta de un azcar de cinco carbonos (desoxirribosa) y una base nitrogenada.
Al unirse los nucletidos mediantes enlaces puentes de hidrgeno forman los cidos
nucleicos.
Este Polmero se encuentra presente en todos los seres vivos, y su funcionalidad en el ser
vivo es de vital importancia ya que de l dependen todas las funciones de nuestro
organismo,
tiene
la
funcin
de
codificar
todo
lo
que
somos.
El ADN no tiene la capacidad de salir a travs de la doble membrana que lo cubre es por
ello que para algunas de sus funciones este debe de transcribirse de una doble cadena a
una cadena ARN (cido ribonucleico), una vez transcrito tiene la capacidad de salir
libremente de esta doble membrana (carioteca) y con ello llevar a cabo sus funciones
entre las cuales destaca la sntesis de protenas.

CONCLUSIONES
-El cido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN, es un tipo de cido
nucleico, una macromolcula que forma parte de todas las clulas. Contiene la
informacin gentica usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos
conocidos y de algunos virus, y es responsable de su transmisin hereditaria.
-Se observa el ADN vegetal obtenido a partir de la alverja, el cual posee ciertas
caractersticas singulares.
-Se conocieron los materiales y reactivos que se necesitan para realizar una extraccin de
ADN, adems se comprendi el procedimiento paso a paso para poder llegar a un buen
resultado.
-Se concluye que para llevar a cabo una extraccin de ADN se puede utilizar cualquier
material (que posea clula) y con los implementos necesarios para cumplir con el
procedimiento.

BIBLIOGRAFA.
-CARLSON, S. (1998). Deshilando el tejido de la vida. Investigacin y Ciencia. 266, 84-85.
-Universidad de Utah. Cmo extraer ADN de cualquier cosa viviente. Disponible en:
http://learn.genetics.utah.edu/es/extraction/
-Extraccion de ADN. Disponible en:
http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_t
u_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm
-Manual de laboratorio de Biotecnologa. Practica N 12. Extraccion de ADN vegetal.