UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARING

DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIA, GENTICA E BIOLOGIA

CELULAR
PROVA ONLINE DO CURSO DE ESPECIALIZAO EM BIOTECNOLOGIA
MODALIDADE DISTNCIA
MDULO II TURMA 5
30/05/2015

Diego Igor Alves Fernandes de Arajo

Mat. Pg69769

Gentica Aplicada Biotecnologia.

1- Na ervilha-de-cheiro, a sntese do pigmento prpura antocianina
nas ptalas controlada por dois genes, B e D. A via biossinttica
que leva formao deste pigmento a seguinte:

intermedirio

incolor

enzima B

intermedirio

enzima D

azul

antocianina

prpura

a) Qual a cor das ptalas que voc espera em uma planta pura
incapaz de catalisar a primeira reao?
Se a planta incapaz de catalisar a reao 1, ou seja, no apresenta
enzima B eficaz, teremos as ptalas incolores.
b) Qual a cor das ptalas que voc espera em uma planta pura
incapaz de calalisar a segunda reao?

Se a planta incapaz de catalisar a reao 2, ou seja, no apresenta

enzima D eficaz, teremos as ptalas azuis.

c) Se as plantas do tens a e b anteriores forem cruzadas, qual a cor

esperada das ptalas para as plantas F1?
Ptalas prpuras.
d) Qual a proporo esperada de plantas prpuras: azuis: brancas
que voc espera na F2?

Este exemplo trata-se de um caso de epistasia recessiva, dessa

forma aps os cruzamentos, teremos a proporo: 9 prpuras: 3 azuis
: 4 incolores.

Ferramentas de Biologia Molecular Aplicada Biotecnologia.

1- Descreva ou esquematize um mtodo de clonagem gnica

A clonagem gnica consiste na insero de um segmento
selecionado de DNA em um plasmdeo ou no cromossomo de um
bacterifago, que atuam como vetores de clonagem, e posterior
replicao desse DNA recombinante em um hospedeiro apropriado,
como uma bactria ou levedura. Essa replicao ocorre quando o
sistema de sntese do DNA do hospedeiro replica o DNA inserido na
clula hospedeira. Sendo assim, a partir de uma clula transformada,
so obtidos uma grande quantidade de clulas idnticas (clones), cada
uma dotada de vrias cpias de DNA recombinante.
Inicialmente, ocorre a obteno e o preparo de DNA em dupla fita
ou fragmentos de cDNA contendo extremidades 5 ou compatveis com
os stios criados no interior do vetor de clonagem. Em seguida, ocorre a
insero de fragmentos de DNA em um vetor de clonagem, visto que a
etapa anterior promoveu a adequao dos stios de ligao entre os
materiais que sero utilizados.
O prximo passo consiste na introduo do vetor recombinante
recm formado em uma clula hospedeira. A escolha desta clula est,
relacionada ao objetivo da clonagem. Se a inteno promover uma
anlise estrutural do gene isolado, deve-se, utilizar um sistema simples
que seja de fcil uso. Se o objetivo expressar as informaes

genticas em grandes eucariotos, sero necessrios sistemas mais

especficos.
Ocorre ento, a replicao do vetor recombinante no interior das
clulas hospedeiras transformadas, num processo chamado de
amplificao. Seguido pela diviso da clula hospedeira e consequente
passagem para a prole, de cpias da molcula de DNA recombinante.
As vias etapas de diviso resultam nos clones.
Dentre as colnias transformadas com o vetor recombinado
necessrio selecionar aquelas que contm, de fato, o gene de interesse,
excluindo aquelas que no possuem o vetor ou contm o vetor vazio.
Essa seleo feita por genes marcadores contidos no vetor.
E por fim, ocorre o isolamento e anlise dos insertos de DNA e/ou
seus produtos proteicos expressos.

Biotecnologia Vegetal.

1- Os meios de cultura usados para cultivar tecidos vegetais in vitro

contm
macronutrientes,
micronutrientes,
e
podem
ser
suplementados com vitaminas, aminocidos e fontes de carbono
(sacarose, glicose, maltose, frutose...). Se esses meios de cultura
so idealizados para suprir os requerimentos nutricionais dos
tecidos in vitro, por que os reguladores de crescimento so
frequentemente adicionados nos meios de cultura?
Os meios de cultura devem reproduzir ao mximo as condies
necessrias para o desenvolvimento da planta. Normalmente, alm dos
macro e micronutrientes como sais minerais e compostos orgnicos
como fontes de carbono e nitrognio, as plantas produzem uma srie de
hormnios que so necessrios ao seu desenvolvimento e diferenciao
celular. Entre estes podemos citar as auxinas e as citocininas que so
produzidas no metabolismo do vegetal e que promovem o crescimento
da mesma.
Estudos foram realizados em busca de substncias sintticas que
pudessem suprir esta necessidade natural do vegetal, bem como
descobrir as propores que estas substncias pudessem contribuir para
o desenvolvimento da planta. So chamados de reguladores de
crescimento, pois so substncias que tm ao similar aos hormnios,
porm, tm origem sinttica. Hoje, temos disposio o cido

indolbutrico, cido naftalenoactico, zeatina, picloran, cinetina, entre

outros.
Dessa forma, estes reguladores so utilizados para controlar o
desenvolvimento do vegetal em estudo. De acordo com a proporo e
do tipo de regulador utilizado, possvel induzir o desenvolvimento de
calos, brotos ou razes
2- A soja RR criada pela Monsanto e foi liberada pelo CTNBio em 1998.
O gene que foi inserido na soja foi retirado do genoma bacteriano.
Explique de que maneira a sequncia gnica bacteriana expressou
suas atividades nas clulas de soja.
As ervas daninhas constituem um dos principais fatores limitantes
na produo agrcola da soja. Normalmente, so controladas por
prticas culturais (arao e gradagem) e mtodos qumicos. A soja RR
desenvolvida pela Monsanto para ser tolerante ao herbicida glifosato
com objetivo de controlar as ervas daninhas. Este herbicida atua
bloqueando a enzima EPSP sintase responsvel pela produo de
aminocidos essenciais sobrevivncia e crescimento da maior parte
das plantas.
Para promover

resistncia

da

soja

foi

inserido,

por

bombardeamento de microprojteis, em clulas matrizes, um gene da

Agrobacterium tumefaciens estirpe CP4 que codifica a EPSPS
modificada. Dessa forma, a soja possui dupla expresso da enzima
EPSPS sendo que a original produzida pela planta ser desativada pela
ao do herbicida, mas a oriunda do A. tumefaciens no ser afetada e
funcionar normalmente. Alm disso, a nova soja contm pores
genticas de petnia (CTP), do vrus do mosaico da couve flor (P-E35S)
e da bactria A. tumefaciens (NOS 3) utilizados como elementos para
regular a integrao e o funcionamento do gene EPSPS bacteriano no
genoma da soja.

Biotecnologia Ambiental.

1- Em Dezembro de 2006, foi detectado por apicultores americanos um

fenmeno relacionado com as abelhas polinizadoras. Este fenmeno
caracterizado por colmias vazias, ainda no totalmente
esclarecidos, pode estar relacionado pesticidas agrcolas, vrus,

caros. Este fenmeno tambm surgiu na Austrlia, Brasil, Europa e

outras regies e ficou conhecido como:
a) Colapso dos vrus em abelhas (CVA)
b) Abelhas extintas por caros (AEA)
c) Morte natural das Abelhas (MNA)
d) Distrbio do Colapso das Colnias (DCC)
d) Colapso do Distrbio das Rainhas (CDR)
A letra D a alternativa correta.