UNIVERSIDAD NACIONAL DE FRONTERA

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

Ao de la Consolidacin del Mar de Grau

Ingeniera de Industrias Alimentarias
DOCENTE:

TATIANA BUSTAMANTE VILCHEZ

INTEGRANTES:

FARFN GIRON LUZ CLARITA

HERRERA GAVILN GRECIA
XIOMARA
SAAVEDRA GUTIERREZ JHOAAM
ALEXIS
VALDIVIEZO MEDINA LIZBETH
MARJORIE
CURSO:
MICROBIOLOGIA DE LOS ALIMENTOS
TEMA:
INFORME DEL LABORATORIO 1

2016

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INFORME DEL LABORATORIO N1

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS,
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD Y TINCION DE GRAM

Materiales
TUBOS DE ENSAYO
Consiste en un pequeo tubo cilndrico de vidrio con
un extremo abierto y el otro cerrado y redondeado,
que se utiliza en los laboratorios para contener
pequeas muestras lquidas o slidas, para realizar
reacciones qumicas en pequea escala

GRADILLA
Una gradilla es una herramienta que forma parte del
material de laboratorio y es utilizada para sostener y
almacenar gran cantidad de tubos de ensayo.

MATRAZ DE ERLENMEYER
Se utiliza para el armado de aparatos de destilacin o
para hacer reaccionar sustancias que necesitan un
largo calentamiento. Tambin sirve para contener
lquidos que deben ser conservados durante mucho
tiempo.

ASA BACTERIOLGICA
Se emplea para transportar pequeo volumen que
contiene microorganismos en suspensin desde la
solucin de trabajo tambin llamada solucin madre al
medio de cultivo (slido o lquido).

PORTAOBJETOS
Lamina de vidrio rectangular de color transparente
utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de
observarlas bajo el microscopio.

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PISETA CON AGUA DESTILADA

La Piseta es un recipiente cilndrico sellado con tapa
rosca, el cual posee un pequeo tubo con una abertura
capaz de entregar agua o cualquier liquido que se
encuentre contenido en su interior, en pequeas
cantidades.

CRISOL DE PORCELANA
El crisol de porcelana es un material de laboratorio
utilizado principalmente para calentar, fundir, quemar, y
calcinar sustancias. La porcelana le permite resistir
altas temperaturas.

VASOS DE PRECIPITADO
Un vaso de precipitado tiene forma cilndrica y posee
un fondo plano. Se encuentran en varias capacidades.
Se encuentran graduados. Pero no calibrados, esto
provoca que la graduacin sea inexacta.
Son de vidrio y de plstico (Cuando estn hechos de
vidrio se utiliza un tipo de material mucho ms
resistente que el convencional denominado pyrex).

GOTERO
El gotero es un instrumento de laboratorio, el cual se
usa para trasvasar pequeas cantidades de lquido
vertindolo gota a gota.
Es un tubo hueco terminado en su parte inferior en
forma cnica y cerrada por la parte superior por una
perilla o dedal de goma.
Se utilizan los goteros para aadir reactivos, lquidos
indicadores o pequeas cantidades de producto de
un recipiente a otro.

SOPORTE UNIVERSAL

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Es un instrumento que se usa en el laboratorio para realizar

montajes con los diversos materiales y obtener sistemas de
medicin o de diversas funciones.
Tambin sirve para fijar los equipos y utensilios mediante
pinzas.
El soporte universal Suele ser de metal, constituido por una
larga varilla enroscada en una base.

Equipos
AUTOCLAVE
Una autoclave es un recipiente de presin metlico de paredes gruesas con un
cierre hermtico que permite trabajar a alta presin para
realizar una reaccin industrial, una coccin o una
esterilizacin con vapor de agua.

INCUBADORA
Una incubadora es un dispositivo que sirve para mantener y
hacer crecer cultivos microbiolgicos o cultivos celulares. La
incubadora mantiene la temperatura, la humedad y otras
condiciones en grado ptimo.

PLANCHA CALENTADORA
Una placa calefactora es un pequeo aparato de sobremesa,
porttil y autnomo, que posee uno o ms elementos de
calefaccin elctrica, y que se emplea para calentar
recipientes con lquidos de forma controlada.

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGA

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Los laboratorios de microbiologa constituyen ambientes de trabajo especiales,

que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para las personas
que se encuentren en o cerca de ellos. El trabajo diario en el laboratorio es un
trabajo de grupo, en donde la actitud de
cada uno de los integrantes ante las
prcticas, as como el entrenamiento que
posean en las tcnicas requeridas para el
manejo
de
material
contaminado,
determinan su propia seguridad, as como la
de sus compaeros y la de la colectividad en
general.
Es por ello que antes de comenzar con las
actividades prcticas, todas las personas
involucradas (estudiantes y profesores)
tenemos la obligacin de conocer cules son
las normas de seguridad a seguir en el laboratorio de manera tal, que el trabajo
se realice con un riesgo mnimo de exposicin, tanto para las personas que lo
ejecutan como para el medio ambiente.

PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD

Bioseguridad

La seguridad biolgica o bioseguridad, es la aplicacin del conocimiento, de las

tcnicas y de los equipos necesarios para prevenir la exposicin del personal,
del rea de laboratorio y del medio ambiente a agentes potencialmente
infecciosos o biopeligrosos.

Agentes Biopeligrosos

Son todos aquellos agentes biolgicos y materiales que son potencialmente

peligrosos para los seres humanos, los animales y las plantas. Entre ellos
podemos citar: bacterias, virus, hongos, parsitos, productos recombinantes,
alrgenos, priones, etc.

Riesgo Microbiolgico

El Riesgo Microbiolgico se encuentra presente cada vez que se realiza una

actividad prctica en el Laboratorio, donde se requiera la manipulacin de
cultivos de microorganismos, los cuales pueden alcanzar concentraciones muy
elevadas y pueden llegar a provocar una infeccin si no son manipulados
adecuadamente.

Vas de Infeccin

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Los microorganismos pueden ingresar al organismo a travs de: la boca, los

pulmones, la piel (intacta o lesionada), la conjuntiva, etc. Las vas de
contaminacin ms frecuentes en el laboratorio se dan a travs de:
La boca
Comer, beber y fumar en el laboratorio.
Realizar transferencias con pipetas sin utilizar ningn tipo de proteccin.
Transferencia indirecta de microorganismos a travs de los dedos o utensilios
contaminados (lpices, bolgrafos, etc.).
La piel
Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica u otros instrumentos
punzantes o de vidrio.
Cortaduras o rasguos.
Los ojos
Salpicaduras de materiales infecciosos. Transferencia
microorganismos a travs de los dedos contaminados.

indirecta

de

Los pulmones
Inhalacin de microorganismos transportados por el aire (aerosoles).
En los Laboratorios de Microbiologa de la Facultad de ingeniera de industrias
alimentarias estamos seguros que comprendiendo y teniendo conocimiento de
todos estos posibles riesgos, aprendiendo y ejecutando las tcnicas adecuadas,
contribuiremos con una parte importante e integral del proceso de educacin, as
como tambin a reducir el nmero de accidentes en el laboratorio y en futuras
actividades fuera de l.

PRINCIPALES NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

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Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros

objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.
Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe
permanecer completamente cerrada.
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar
la sesin prctica.
Lavar las manos con agua y jabn antes de realizar las actividades
programadas, antes de salir del laboratorio y siempre despus de manejar
materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.
Trabajar cerca del mesn, adoptando una buena postura y estando fsicamente
cmodo. Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela
antideslizante en las reas de laboratorio.
Evitar llevar en el laboratorio, accesorios que podran ser fuente de
contaminacin (por ejemplo joyas).
Recoger el cabello largo.
Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar slo lo
indispensable.
No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos personales o utensilios,
aplicarse cosmticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningn rea del
laboratorio.
Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar
las actividades indicadas en la prctica. Si usted tiene alguna duda, dirjase al
profesor.
Mantener el rea de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos
personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la
realizacin del trabajo prctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar
ste desatendido.
Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.),
limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la
actividad. Reporte cualquier dao de los mismos al profesor.
Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos
para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en
las ollas de desecho, etc.
No usar ningn reactivo que no est debidamente identificado, verificar las
etiquetas de los mismos y estar seguro de cmo emplearlo.

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No devolver sustancias a sus envases

originales.
Emplear la propipeta al medir lquidos.
Est rigurosamente prohibido pipetear
con la boca. De igual manera las pipetas
tendrn tapones de algodn para reducir
la contaminacin de estos dispositivos
de pipeteo.
Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a
cabo experimentos no autorizados.
Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material
contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser catalogado como
menor.
Reducir al mnimo la formacin de aerosoles durante la realizacin de cualquier
trabajo prctico.
Extremar las precauciones cuando se utilicen agujas y jeringas para evitar la
inoculacin accidental y la generacin de aerosoles durante su manipulacin y
desecho.
Emplear tcnicas aspticas para el manejo de cultivos de microorganismos.
MEDIDAS EN CASO DE EMERGENCIA
A continuacin mencionaremos los pasos que se deben seguir en caso de que
ocurran los siguientes accidentes:
Derrame de material biolgico sobre el cuerpo:
Remover la ropa inmediatamente. Lavar vigorosamente el rea expuesta con
agua y jabn por un minuto. Reportar el incidente al profesor. Buscar atencin
mdica si es necesario. La ropa contaminada debe ser colocada en una solucin
desinfectante antes de ser lavada.
Salpicaduras en los ojos con materiales biopeligrosos:
Lavar inmediatamente el globo ocular e interior de la superficie del prpado con
abundante agua durante 15 minutos aproximadamente. Abrir el ojo para
asegurar efectivamente el lavado, comenzando por los prpados. Reportar el
incidente al profesor. Buscar atencin mdica inmediatamente.
Cortadas menores y heridas por pinchazo:
Lavar vigorosamente la herida con agua y jabn por varios minutos. Aplicar un
antisptico adecuado Reportar el incidente al profesor. Buscar atencin mdica
inmediatamente.

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En el caso de derrames:
Reportar el incidente al profesor. Colocarse
guantes y cubrir con papel absorbente el
rea del derrame. Verter un desinfectante
adecuado y dejar actuar por el tiempo
necesario. Retirar el material absorbente
junto al material roto y colocarlos en un
recipiente para residuos contaminados o
bolsa de desechos, la cual debe
esterilizarse junto con los guantes utilizados. Limpiar y desinfectar nuevamente
el rea empleando nuevas toallas de papel y desinfectante. Lavarse las manos
con abundante agua y jabn

Tincin Gram
1. Se esteriliza el asa bacteriolgica en el mechero para evitar cualquier tipo
de contaminacin y se extrae un poco de muestra (cultivo de
microorganismos) del tubo de ensayo.
2. La muestra extraida se coloca sobre una lmina y se agrega una gota de
solucin salina o suero fisiolgico.
3. Se vuelve a esterilizar el asa bacteriolgica para mezclar la muestra con
la solucion salina,posteriormente se flamea la lmina con una distancia
prxima al mechero hasta que el contenido este seco.
4. Se agrega el colorante Cristal Violeta por 1 minuto,cuando la muestra este
coloreada se enjuaga con agua destilada.
5. Despues se agrega Lugol por 1 minuto,transcurrido este tiempo se
enjuaga nuevamente con agua destilada.
6. Se agrega Alcohol Cetona para decolorar por un tiempo de 5 segundos y
empleando agua destilada se procede a enjuagar.
7. Por ultimo se agrega Safranina y la muestra queda lista para poder
observarse en el microscopio con el objetivo de 10x, 40x y si se desea
observar con un objetivo de 100x se agrega una gota de Aceite de
Inmersin.

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OBSERVACIN

Salmonella
sp

Bacilus cereus

Vibrio
sp.

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RESULTADOS
Mediante la prctica se logr reconocer los distintos materiales y equipos de
laboratorio asi como su uso y su correcta manipulacin.
A travs de las instrucciones brindadas por nuestra docente del curso de
microbiologa de los alimentos se adquirieron los conocimientos sobre medidas
de bioseguridad, normas en el laboratorio con la finalidad de reducir los
accidentes.
Asimismo se comprendi y practic el procedimiento de la tincin gram en tres
muestras distintas de microorganismos como se detalla a continuacin:

Muestra

Microorganismo

Tincin

Genero

Salmonella sp

Rojo

Gram -

Bacillus cereus

Violeta

Gram +

Vibrio sp

Rojo violceo

No se pudo
identificar

Resultados obtenidos en la primera practica de laboratorio.

Nota: En la tercera muestra no se pudo identificar el gnero del microorganismo

DISCUSIN
De acuerdo con las bibliografas se estudi el tipo de gnero de cada uno
de los microorganismos analizados en la prctica, identificndose que dos
tercios de los resultados coincidieron con las teoras descritas por los autores, en
los casos de salmonella sp (gram- rojo) y bacillus cereus(gram+ violeta).
Sin embargo, la ltima especie analizada Vibrio sp present tincin roja
violcea generando una dificultad en su identificacin de gnero, esto pudo
verse afectado por un exceso del colorante cristal violeta en el procedimiento de
la tincin gram.

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Cuestionario
Cmo limpiar el lente de un microscopio?
La lente de un microscopio es algo muy delicado de limpiar y no es
aconsejable quitarla del microscopio para ser lavada. La lente del microscopio
pertenece a uno de los tres elementos ms importantes que forman los
microscopios y permite un aumento de los objetos que se pretenden observar
mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".
Para limpiar la lente de un microscopio seguiremos los siguientes pasos:

Coge el papel limpia lente que podrs encontrar en tiendas especializadas

o en distribuidores de material de laboratorio

No toques nunca la lente del microscopio con las yemas de los dedos ya
que la huellas digitales puede influir en la visibilidad del microscopio.
Cuando se secan las huellas dactilares en la lente es muy complicado
quitarlas y se debe de hacer con agua destilada.

Con el papel limpia lentes humedece el papel con ter.

Frota el papel limpia lentes, baado en ter sobre la lente del
microscopio haciendo movimientos circulares.

El aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de

inmersin debe quitarse inmediatamente despus de finalizada la
observacin.

Para ello se puede pasar el papel "limpia lente" impregnado con una gota
de xilol (derivado del benceno).

Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento

sobre la platina y bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su
posicin ms baja.

Para evitar que tropiece con alguno de los objetivos. Guarda en lugares
secos, para evitar que la humedad favorezca la formacin de hongos.
Ciertos cidos y otras sustancias qumicas que producen emanaciones
fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.

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Anexos

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BIBLIOGRAFA
Organizacin Mundial de la Salud. Manual de Bioseguridad en el
Laboratorio. Ginebra: OMS; 2005

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Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. CDC/NIH. U.S.

Department of Health and Human Services, Public Health Cervices (4 ed.).

Washington; 1999. Mahon, Conni and Manuselis, George. Textbook of

Diagnostic Microbiology. Second edition. USA: W.B. Saunders Company;
2000.