Você está na página 1de 3

Phadebact®

53-1044-03, Mar-06
Pneumococcus Test
Modo de empleo

Bactus AB
Lunastigen 3
SE-141 44 Huddinge
Sweden

Anticuerpos ligados a estafilococos Coaglutinación

Microorganismo con
antígenos correspondientes

USO PROPUESTO
Phadebact® Pneumococcus Test está destinado a la detección de Streptococcus pneumoniae.

RESUMEN Y EXPLICACION DEL ANALISIS


Streptococcus pneumoniae (neumococo) es un habitante común en las vías respiratorias superiores de los seres
humanos y desde allí puede invadir los pulmones y el sistema circulatorio. El neumococo es por consiguiente la
causa más frecuente de neumonía lobular en los adultos. La cuarta parte de estos pacientes presentan cuadros de
bacteriemia, generalmente al comienzo de la enfermedad (1).
Los microorganismos pueden también invadir la cavidad pleural o diseminarse al endocardio, el pericardio, las
meninges, las articulaciones etc con complicaciones subsiguientes (2).
El neumococo ha sido identificado en infecciones del oído medio, mastoides y de la vista y a veces incluso aislado
del líquido peritoneal, orina, secreción vaginal y otros especímenes clínicos. Hay varios métodos conocidos para
la identificación del neumococo. La prueba de sensibilidad a la optoquina (ethylhydrocupreine hydrochloride), el
método más ampliamente usado, diferencia los neumococos más sensibles de la mayoría de los otros estreptococos
alfa hemolíticos típicos más resistentes. Phadebact® Pneumococcus Test, basado en la técnica de coaglutinación,
permite la rápida identificación del neumococo, usando una técnica simple y rápida en porta.

PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO


El test de coaglutinación Phadebact® Pneumococcus Test contiene los siguientes reactivos: Pneumococcal Reagent
y Pneumococcal Control. Pneumococcal Reagent se compone de anticuerpos específicos antineumocócicos,
desarrollados en conejo y acoplados a la proteína A de estafilococos no viables (3, 4). Pneumococcal Control se
compone de gamaglobulina de conejo no inmunizado, acoplada a la proteína A de estafilococos no viables. Cuando
una muestra neumocócica se mezcla con Pneumococcal Reagent, los antígenos específicos en la superficie celular
reaccionan con los anticuerpos específicos del reactivo formando una red de coaglutinación, visible a ojo desnudo.

REACTIVOS
Cada equipo de Phadebact® Pneumococcus Test contiene reactivos en cantidad suficiente para efectuar 50
determinaciones. Los reactivos son de color azul (azul de metileno) para facilitar la interpretación de los resultados.

Composición de los reactivos


• Pneumococcal Reagent 1 vial
Anticuerpos específicos desarrollados en conejo,
acoplados a estafilococos no viables.
• Pneumococcal Control 1 vial
Gamaglobulina de conejo no inmunizado ligada a
estafilococos no viables.
LISTO PARA USAR

Otros componentes
• Goteros
• Portas desechables
• Modo de empleo

Precauciones
Solo para diagnóstico in vitro.
Atención! Los reactivos contienen azida sódica como conservante. La azida sódica puede reaccionar con el plomo
y el cobre de las cañerías, formando azidas metálicas altamente explosivas. Al desechar los residuos use abundante
agua para evitar la formación de estas azidas. Favor de referir al procedimiento de descontaminación recomendado
por CDC.

Preparación de los reactivos


Los reactivos están LISTOS PARA USAR.

Caducidad y almacenamiento
La fecha de caducidad se indica en la etiqueta exterior y en las etiquetas de los viales. Se recomienda almacenar el
kit entre 2-8°C. Los reactivos no deben congelarse.

OBTENCION Y MANIPULACION DE LAS MUESTRAS


Favor de referir a un manual estándar de microbiología concerniente a la colección y preparación de muestras.
Las muestras a investigar pueden tomarse de cualquier parte del cuerpo donde hayan organismos viables. La
torunda deberá sumergirse en un medio de transporte, como por ejemplo Stuart, en caso de ser transportada al
laboratorio. La torunda deberá llegar al laboratorio dentro de 24-48 horas. No se necesitan conservantes ni aditivos
durante el transporte o cultivo. Las muestras de pacientes tratados con antibióticos pueden contener pocas o
ninguna bacteria viable.

PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados
Ver REACTIVOS.
Materiales requeridos pero no suministrados
• Cultivos primarios
• Asas de inoculación desechables o equivalente
• Reloj con lectura fácil de minutos

Parámetros del análisis


Temperatura de la reacción temperatura ambiente
Duración de la reacción 1 minuto
Volumen de Pneumococcal Reagent una gota
Volumen de Pneumococcal Control una gota

Preparación de las muestras


Favor de referir a un manual estándar de microbiología para información sobre la preparación de cultivos primarios.

Procedimiento del ensayo


Nota! Agite bien los reactivos antes de usar.
Marque los óvalos correspondientes al control Ponga una gota del reactivo y una del control en los
y a las muestras. Colecte las colonias de la correspondientes óvalos marcados. Fig.2.
placa con un asa de inoculación o equivalente.
Frote las colonias suave y completamente en
los correspondientes óvalos marcados en el
porta. Fig. 1
Nota! El exceso de colonias o la contaminación
con otras especies puede resultar en una
reacción incompleta.

Fig. 1 Fig. 2

Mezcle las gotas suave y


completamente con un asa de
inoculación o equivalente. Use un asa
nueva para cada reactivo. Fig. 3.

Fig. 4

Fig. 3

Balancee el porta y observe la reacción dentro


de un minuto. Fig.4.

Test directo de líquido cefalorraquídeo (CSF)


Para la identificación de S. pneumoniae en líquido cefalorraquídeo (5) por test directo favor de referir a Phadebact®
CSF Test.

Estabilidad de la reacción final


La reacción de coaglutinación es estable, pero las buenas prácticas de laboratorio señalan que los resultados deben
leerse dentro de 1 minuto. (Observe que la desecación de los reactivos puede ser malinterpretada como reacción
positiva).

Calibración
No es necesario ningún tipo de calibración.

Control de calidad
Control positivo
Cepas conocidas de neumococo deberán usarse como control positivo (p. ej. ATCC 6303). Las cepas deberán
tratarse igual que la bacteria desconocida en el proceso del ensayo.

Control negativo
Cepas conocidas de estreptococo α−hemolítico deberán usarse como control negativo.

Aspecto de la reacción

Ausencia de reacción Reacción positiva


RESULTADOS
Resultado positivo
Una reacción significativamente más intensa con Pneumococcal Reagent comparada con Pneumococcal Control
constituye un resultado positivo.

Resultado negativo
La ausencia de reacción con Pneumococcal Reagent acompañada de una reacción negativa con Pneumococcal
Control es altamente sugestiva que la bacteria ensayada no es un neumococo o que la cantidad de antígeno es
insuficiente, en cuyo caso el ensayo deberá repetirse usando una cantidad mayor de la muestra.
Resultados indeterminados
El resultado es indeterminado si la reacción con Pneumococcal Reagent y con Pneumococcal Control son de igual
intensidad. En este caso el espécimen no podrá ser identificado con Phadebact® Pneumococcus Test. Use un test
diferente.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO


Los métodos inmunológicos como el de coaglutinación, usados en identificación de S. pneumoniae, contiene
anticuerpos dirigidos contra los antígenos capsulares de S. pneumoniae. Por esta razón los neumococos
desposeídos de cápsula no reaccionan en el test inmunológico. Ciertos tipos de S. pneumoniae tienen antígenos
similares al de H. Influenzae tipo b lo cual ocasiona reacción cruzada.

CARACTERISTICAS DEL ENSAYO


Sensibilidad y especificidad
Se analizaron un total de 450 aislamientos y cepas (6); 304 S. pneumoniae y 146 bacterias alfa hemolíticas de otro
tipo, inclusive estreptococos tipo viridans.
303/304 (99.7%) de aislamientos de S. pneumoniae fueron correctamente identificados por Phadebact®
Pneumococcus Test.
12/146 (8.2%) de aislamientos alfa hemolíticos no neumocócicos dieron una reacción positiva con Phadebact®
Pneumococcus Test. Las cepas fueron:

4 cepas alfa hemolíticas no neumocócicas


1 S. viridans grupo K NCTC 5338
1 S. sangius M 371
1 S. mitis (S. mitior) M 524
1 S. salivarius 9332
4 S. milleri OG 7331
H 159
B575
7338

GARANTIA
Los datos presentados se han obtenido utilizando el procedimiento indicado. Cualquier cambio o modificación en el
procedimiento no recomendado por Bactus AB puede afectar los resultados, en cuyo caso Bactus AB declina toda
responsabilidad de garantía expresada, implícita o reglamentada, inclusive la responsabilidad implicita para venta
o condiciones de uso. En dicho caso Bactus AB y sus distribuidores autorizados, no se harán responsables por
cualquier daño directo, indirecto o consecuente.

Referencias:
1. Bailey and Scott´s diagnostic microbiology. Ed. by Finegold S M, Martin W J, Scott E G. The CV Mosby
Company, Saint Louis, 1978.
2. Manual of Clinical Microbiology. Ed. by Lennette E H, Spaulding E H and Traunt J P, Am Soc Microbiol,
Washington DC, 1974.
3. Christensen P, Kahlmeter G, Johnson S and Kronvall G: New method for the serological grouping of
streptococci with specific antibodies adsorbed to protein A-containing staphylococci. Inf Imn 7 (1973) 881-885.
4. Kronvall G: A rapid slide agglutination method for typing pneumococci by means of specific antibodies adsorbed
to protein A-containing staphylococci. J Med Microbiol (1973) 187-190.
5. Olcén P: Serological methods for rapid diagnosis of Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis and
Streptococcus pneumoniae in cerebrospinal fluid: A comparison of Co-agglutination, Immunofluorescence and
Immunoelectroosmophoresis. Scand J Infect Dis 10 (1978) 283-89.
6. Data on file, Bactus AB.

PRODUCTOS
Phadebact® COA System
Phadebact® Streptococcus Tests
Phadebact® Streptococcus Respiratory Test
Phadebact® Strep A Test
Phadebact® Strep B Test
Phadebact® Strep D Tests
Phadebact® Strep F Test
Phadebact® Strep Positive Controls
Phadebact® Pneumococcus Test
Phadebact® Haemophilus Test
Phadebact® GC Positive Controls
Phadebact® CSF Test
Phadebact® CSF Positive Controls
Phadebact® Extraction Solutions
Phadebact® Monoclonal GC Test
Phadebact® ETEC-LT Test
Phadebact® Salmonella Test
Phadebact® Staph Aureus Test

Near Patient Testing


Phadirect® Strep A
Phadirect® Rapid CRP Test

Para otros idiomas: www.bactus.se


For other languages: www.bactus.se
Für andere Sprachen: www.bactus.se
Per altre lingue: www.bactus.se
Pour d'autres langues: www.bactus.se
Andre sprog, se venligst: www.bactus.se
Гια άλλες γλώσσες: www.bactus.se
På andra språk: www.bactus.se