Roteiro de Biologia Celular – Aula Prática

1- Título: Hemograma (esfregaço sanguíneo).

2- Introdução:

Hemograma é um exame realizado que avalia as células sanguíneas

de um paciente, ou seja, as da série branca e vermelha, contagem de
plaquetas, reticulócitos e índices hematológicos. O exame é requerido
pelo médico para diagnosticar ou controlar a evolução de uma doença.
Vale salientar que a expressão "Hemograma Completo" é de certa
maneira redundante, já que todo e qualquer Hemograma (isto é, série
vermelha, branca e plaquetária), exceto por erro do laboratório, é
completo.

3- Objetivos:
• Executar técnica de esfregaço sanguíneo;
• Manipulação de microscópio óptico e focalização em objetivas;
• Diferenciação e identificação de células sanguíneas: leucócitos
(neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos), plaquetas
e hemácias;

4- Materiais e métodos:
• Microscópio de óptico,
• Vacutainer contendo EDTA (anti-coagulante);
• Lâminas de vidro;
• Lâmina extensora;
• Micropipeta graduadas;
• Ponteiras p-200;
• Corantes (panótico rápido) e fixador;
• Óleo de imersão.

• Procedimento:
a) Identificar a lâmina com nome do paciente e data (pincel
permanente), caso a lâmina tenha uma extremidade fosca, pode ser
anotado com lápis.
b) Homogeneizar o sangue do tubo antes de retirá-lo com a pipeta
graduada.
c) Colocar uma gota de sangue sobre uma das extremidades da lâmina
de vidro, a lâmina extensora será colocada em cima da gota num
ângulo de 30° a 40° onde o sangue será estendido (arrastando a gota
de sangue até a outra extremidade da lâmina).
 d) O esfregaço, após secagem, será devidamente corado com giemsa
ou panótico. Seguindo as etapas de fixar com etanol 70% (fixador)
no tempo de 5 segundos, em seguida corar com eosina no tempo de
10 segundos, logo após hematoxilina no tempo de 15 segundos, após
lavar em água corrente. (pouca intensidade da água)

e) Deixar secar a temperatura ambiente (TA) em cima de um pedação

de papel absorvente, em posição vertical.

f) Depois de corada, e seca novamente, será levado ao microscópio

óptico para observação das células – primeiramente na objetiva de
40X e posteriormente na de 100X (com óleo de imersão).

5- Observação:
• As células circulantes no sangue são divididas em três tipos;
células vermelhas (hemácias ou eritrócitos), células brancas (ou
leucócitos) e plaquetas (ou trombócitos)
• As hemácias apresentam-se anucleadas, com um “certo”
vacúolo no centro;
• Os leucócitos podem apresentar-se com duas características
distintas: granulócitos (neutrófilos, eosinófilo e basófilo) e
agranulócitos (linfócitos e monócitos);
• As plaquetas apresentam-se totalmente azuladas e anucleadas,
com tamanho muito menor que as outras células sanguíneas.

6- Conclusão:

A conclusão que os alunos deverão chegar desta prática, pode ser

direcionada da seguinte forma: As práticas sanguíneas serão utilizadas
para visualização de células sanguíneas e quantificação das mesmas, que
podem chegar a diagnósticos clínicos e patológicos, quanto as suas
morfologias e deficiências.

7- Discussão:

Dependem dos resultados das análises microscópicas

8- Bibliografia: