Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
c
c
c
c c
cc
c c
cc
cc
c
c
c
c
c
!
"#$%&'(!
m
c)%*(+,--&.)!
La cromatografía es una técnica de separación de solutos de una mezcla, que se
basa en la diferente velocidad con que se mueve cada uno de los solutos a través
de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento. A este
disolvente se le llama V y el medio poroso puede ser la V
, o bien servir de soporte a esta fase. Se habla de cromatografía en
columna cuando la fase estacionaria o su soporte están contenidos en una
columna.
m
V
Está basada en la separación o reparto de una mezcla de solutos entre la fase
(disolvente) y la fase
soportada sobre un sólido adecuado, de
acuerdo a las distintas solubilidades de estos solutos en ambas fases. Si el
disolvente es un líquido se denomina cromatografía líquida. Son cromatografía de
reparto la cromatografía en papel y la cromatografía en capa fina (TLC).
Se calcula la razón de migración del soluto con respecto a la fase móvil (Ô ) que se
compara con la de los patrones (Ec. 2.1).
YY
YY
YYYY
YYY´YYY
YYY
YYY
YY
YYYY YY YYY
r m
V
m
V
r
La fase estacionaria es una matriz polimérica porosa que posee grupos iónicos
unidos covalentemente y contraiones móviles que pueden ser intercambiados por
iones arrastrados por la fase móvil (líquido).
m
V
Las moléculas pueden ser separadas también sobre la base de sus diferentes
tamaños al pasar a través de una columna que contiene partículas hidratadas de
geles porosos. Se encuentra en el mercado un buen número de materiales para
estos fines, cuya composición y porosidad son controladas cuidadosamente, de
modo que moléculas de tamaño relativamente parecido puedan ser separadas
mediante la adecuada selección del tamaño del poro gel (tabla 1). El Sephadex
consta de partículas pequeñas de dextrano formadas por una red tridimensional
de cadenas de polisacáridos ramificados. Es altamente polar debido a su alto
contenido de grupos hidroxilos, por ello se hincha considerablemente cuando se
coloca en agua. La mezcla de moléculas grandes y pequeñas se colocan sobre la
superficie libre superior del gel. A medida que la muestra desciende por la
columna, las moléculas pequeñas difunden dentro del gel teniendo que recorrer un
camino más largo, mientras que las moléculas grandes pueden ser
completamente excluidas de los poros del gel. Eventualmente se obtiene una
separación completa en la que las moléculas grandes salen primero de la columna
y por último las más pequeñas.
m °
&
'(m
)
'(*m
)
'(?m$
$
'(m & (*m
$
$
"
$
*
# ?
(?m
"
m °
?
" '
'
"
" + $
+
,-
$ "
?
"
$"
"
.
/ #
?
?
'
$
$-
?
00
"
&
$
*(/&$+0+$1+$2(1$0-%&'(1
1
"
*
)
1
"
1
" : &
m
<
';m ';m
?
"
$1,2%0+(1
YY
YY
YYYY
YYY´YYY
YYY
YYY
YY
YYYY YY YYY
&1-,1&.)+$*$1,2%0+(1
& "
$
#
m
$
$ "
$
&
$
"$
)32&1&1
?
$ !
44
$
$
$
)
%
44
$ "
"
)
44! "
,$1%&()0*&(
! c)+&-0*4,5/*$-0,-&()$11$+$"$)%$)$*02$6/0-0*,)0-(2,6)0+$
-*(60%(7*0890!
!
)
44
=
"
"$
)(+$#0*20192&-0:7$21&)+&1(2'$)%$
=
"53
"
! c)+&-0*4,58*0--&()$11$1$/0*0*()/(*-*(60%(7*0890$)-(2,6)0;+$2(1
$<%*0-%(1+$$1/&)0-0;#&%(60%$=-.6(1$&+$)%&8&-0*()!
+ #
"
$
$ $
%
$ "
"
$
"
$
! 1-*&"0>4,5-()-2,1&()$11$("%&$)$)+$20-*(60%(7*0890$)-0/08&)0=+$20
-*(60%(7*0890$)-(2,6)0?
&
" '
"
%
$
"
$
"
! $8&)&*2(11&7,&$)%$1%5*6&)(1
*
?
?
"
&
&
$
&
$ # $
&
$
&
$
$
$ 9
'
/
" ?
" #
m °
Y&
"
'
':DE
°
:
?
°*
""
"
°
F&
Y
" G
à ° /
"
&
$
"
$
"
8
?
" #
* "
*
"
?
"
&
"
"
"
?"
$
"
° &
#
$
$-
$
&
-
Ô 1
&
"
, '
"*
?
&
)
$
"$
?
$ "
$
$
m
$
$
$
"
A!:1%0"2$-$*,)0+&1%&)-&.)-20*0$)%*$-*(60%(7*0890$)-(2,6)0=-0/08&)0$&)+&-0*
$)4,$-01(1$1/*$8$*&"2$027,)(+$2(165%(+(1
()-2,1&()$1
?
$
$
$
?
$
$
$
$
$
"
&"2&(7*0890
8
+"
:
&
1" $ 4@@4
<*HA26@44A4@3mAm
4C@