BACILOSCOPIA

PESQUISA DE BAAR BACILOS ÁLCOOLÁCIDO RESISTENTES

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Método de Ziehl-Nielsen
Baseia-se no fato de que algumas bactérias, como os bacilos da tuberculose e da lepra, quando tratada pela fucsina fenicada à quente, resistem ao descoramento pelo álcool-ácido, daí serem chamados de BACILOS ÁLCOOL-ÁCIDO-RESISTENTES (BAAR). O mecanismo estar ligado à solubilidade maior do complexo carbolfucsina no substrato bacteriano quando em sua constituição existem lipídios 2

São necesários 104 BAAR/mL para que sejam detectados microscopicamente.Coloração de bacilos AlcoolÁcido-Resistentes Devido ao alto conteúdo de lipídios. a parede celular das micobactérias possui a singular capacidade de fixar o corante fucsina de tal modo que não sofre descoloração pelo álcool-ácido. 3 .

a camada deve ser “amaciada” ⇒ calor. o corante que penetra através da camada amaciada se fixa na parede celular. 4 . para que a carbolfucsina aquosa (corante) penetre através das ceras.Técnica de Ziehl-Nielsen a propriedade de ácido-álcool resistência é devida à camada cérea que envolve as micobactérias.

5 .bastão esterilizado ou alça microbiológica (paltina) de 3mm de diâmetro  .lâminas limpas para coloração de ZiehlNielsen ou fluorocrômica. ou ambas.  .Esfregaços  .estender uma porção do sedimento por cerca de uma superfície de 1 x 2cm.

Técnica de Ziehl-Nielsen Procedimento: 1) cobrir o esfregaço. 2) aquecer a lâmina até emissão do vapor. mas sem deixar secar. seco e fixado pelo calor com 5 a 7 gotas do corante carbolfuscina. 3) lavar a lâmina em água suavemente. 6 .

7) obs em objetiva 100x com imersão em óleo. escorrer e secar ao ar (1 a 2 min). 5) realizar coloração de contraste com azul-demetileno (1 a 2 min).Técnica de Ziehl-Nielsen Procedimento: 4) descorar com álcool-ácido até que não apareça mais o corante no lavado (2 min). 7 . 6) enxaguar.

Coloração de Ziehl-Nielsen Fixação 8 .

Coloração de Ziehl-Nielsen Carbol Fucsina 9 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Aquece por 5 minutos •Até emissão contínua de vapores •Não ferver! 10 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Lavar com 11 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Descorar com Álcool-ácido •Até descorar totalmente 12 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Descoloração 13 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Descoloração ideal 14 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Lavar com água •Secar 15 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Azul de metileno – 1 minuto 16 .

Coloração de Ziehl-Nielsen •Lavar com água •Secar 17 .

Coloração de Ziehl-Nielsen 18 .

Técnica de Ziehl-Nielsen Resultados: BAAR = VERMELHAS BNAAR = AZUL 19 .

Coloração de Ziehl-Nielsen 20 .

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