TESTE DE PROGENIE EM Oreoctiromis njloticus (TREWAVAS, 1982) SUBMETIDOS A INVERSAO SEXUAL

RE5UMO

Luiz Carlos Guilherme 1

o presente trabalho toi conduzfdo nas depsndencias da Estacao de Piscicultura da ESAL, com :dura.gao de outubro de 1982 a abril de 1984 e teve por objetlvo baslco a ldentltlcacao do provavsl genetico dos peixes, at raves do sstudo da ralacao macho (M) : femea (F) na progenie de machos eneticamente femeas./,obtidos pelo metoda da lnversao sexual, cruzados com tel11eas normais. ecundariamente verificou-se 0 efeito da amputacao de uma das nadadelras como rnetodo de mareagao sobre a sobrevlvencla dos anlrnais. Concluiu-se ques possfvel identificar os gen6tipos _sexuais dos peixes atravss da proqsn!e, bern como- a tecnlca da Invsrsao permits alterar as frequenclas M:F no plantel; tarrrbsm caracterlzou-se a possibilidade de selecionar linhagens de machos, machos invertidos e Hlmeas, e que a arnputacao da nadadeira dorsal nEIO prejudicou a I>obrevivencia dos peixes.

TERMOS PARA INDEXA<;Ao: Tllapla, reproducao, lnversao sexual, genetica, alevinos, tnversao de sexo, teste de progEinie.

Conslderando-sa as sstudos de AVTAUON & AMMERMAN (1978), as quais propuseram a entre cromossomos autossornlcos e -». ua s para a determinagao do sexo em tlaplas, pode-se asperar que para linhagens puras de Oreochromis nuottous, encontrern-se ascornblnacoes AAXX €I AAXY na producao de 1 : 1 P <;l r a f ~ m ea s (F) e mac h 0 s (M ), respectivamente. No entahdo, com os varies ogramas de cruzamentos interespecfficos para producao de hlbridos e possfvel ocorrerem altercH~6es na trequsncla destes.qenottpos, SHELTON et alii (1983) observaram uma pr opor cao varlavel de 0,45:1 a 3,33:1 M:F rEl:spoectlvamenteem 71 grupos de progenies de 1 F e 12 M de tilapla nil6tlca €I aurea,

HULATA et alii (1983) apllcararn a teste de ie parHnG-o-doa-A-i-bri-daG8o entre ttieroaon-nttoucus e S~ eureus com as ias ccrnblnacoes M e F de cada especle. Ao final dos estudos, conclufrarn que 4 em cada t1 re:!>__Qe~ M ~_uD~_a_ ~ F nllotlca prnduztam. escendentes 100% M °e 0 recfproco (M nil6tica X_F aurea), 3:1 M:F.'

Devldoas facilidades. d~ rnlsclqenacao entre as hfbrldos e as seus ascsndentes '(nilotlca, .aursa, hornorum, et c.), muitas falhas nos

programas de h lb r l d a ca o p od e r iarn ter expllcacoes nesses fatos.

Atualmente, com a adocao das tacnicas de lnversao sexual, que permitem reallzar a troca do sexo fenotfpico do peixe sem alterar 0 gen6tipo, ampliam-se as possibilidades e cruzarnento direcionado dentro do plantel para f o r m a c a o de linhagens, 0 que r ad uz lr a consideravelmente os trabalhos de sexaqern.A d ls c us s a o destas possibilidades, com apre sentacao das sequenclas de inver sao sexual e cruzamentos, foi pro posta por SHELTON et alii (1978) e JENSEN & SHELTON (1979).

No pre sente estudo objetivou-se identifiear os machos -reprodutores com pr ovavst sexo genetieo feminin~ ("Mil). obtldos com lnversao sexual, atraves dos estudos da relacao M:F nos descendentes, a partir das considerac;6es propostas por AVTALlON 8< HAMMERMAN (1978). Secundariamente procurou-se conhecer os efeitos da amputacao de uma das nadadeir_as como mstodo de rnarcacao,

MATERIAL E METODOS

• Animais

Os reprodutores formaram quatro casals: A, S, CeO.

Zootecnista - MS Piscicultura

Cienc. e Prat, Lavras, 16(2):283-287, abrJjun.l992

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a posalbllldade de ter navido. miscigena~ao e.ntre os ascendentes em cruzamentos a.nteriores com Oreochromis horn arum (aaYY M e aaWY F), cujos machos foramintensamente util izados nos programas de hlbrldacao nesta 85ta98.0. Este tato pode ser refoTgado anallsando-ss os cruzarnentos de pelxes Com os genotipos 'su o erto o s par AVTALION & HAMMERMAN (1978), cuja descendencia produz a relacao M:F de 3:1, conforme constarn do Ouadro 1

Os .machos proveniente.s de um.qrupo de 960 peixes, contendo machos normaise machos geneticamente f~meas obtidos pelo tratamento anterior com a andr cqano mesterolona '(17 p-hidroxi- 1a - metil-5 a-androstan-3-ona), toram cruzados com femeas normals.

Os alevinos de cada progenie permaneceram isolados, juntos com os pais. Quando atinqirarn peso rnsdto de 15 9 toram marcados de modo a permitir a identlflcacao dos pais, como segue:

Descendentes dos casais A: fntegr'os; 8-: arnputacao da nadadeira dorsal; C: arnputacao da nadadeira anal e D: arnputacao da nadadaira pslvtca asqusrda. Em seguida toram colocados para crescimento em um unlco tanque par 120 dias.

QU~DRO 1. Possfveis genotipos dos.pelxes para produzirem a rslacao M:F3:1.

M
F AaYY AAWY A.AXY
AAWX 3: 1
aaWY 3:1 3: 1 3:1
AaWW 3:' 3:1
aaXY 3:1 3:1 3: 1
AaWX 3: 1
AaXX 3:1 @ ins't",if'l~6e9

Foram ernpreqados na tass d'S rsproducao e cresciment,o iniciai dos alevinos qu_~tro tanq~es de atvenarta e fundo de terra, medtndo 32m e 1,2m de profundidade media, ssndo um para

cada casal.

Para a fase de crescimento dos a!evinos,ap6s a rnarcacao, foi empregado urn tanque de terra com 800m2 e 1 ,2m de profundidade media.

o Analise Estatfstica

As comparacoes entre as relagoes M:F na p r o q en le de cada casal, b s rn como a sobreviv§ncia ap6s a arnputacao das nadadelras, foram avalladas palo teste de Qui,quadrado definido par KALIL (1977), utilizando-se contrastes pr opo st o s- par U

(1964). .

RESUl TACOS E DiSCUs-sAo

Fonte: AVTALION & HAMMERMAN (1978).

Considerando-se ainda as sugest.6es de AVTAUON & HAMMERMAN (197B), pode-se acompanhar nos quadros sequlntes (2.a 7) 0 processo de mtsclqenacao que provavelmente ocorreu na Estagao da ESAL durante as anos de 19]6 a 1981, coincidindo no final com

r e cl ama c oe.s de prod utores sobr e a aparecimento de F nos lotes de hfbridos comercializados. Os reprodutores de tllaplas nil6tica e homorum toram doados ortqinalmente pela Faculdade de Ciencias Aqrarla e Vetertnarla

- Campus de Jaboticabal - SP e pela Universidade Federal de Vl c o s a - MG.' respeetivamente.

.-Ao-inieiar 0 ano de 1982, ar e cnlca da hlbrtcacao fol abondonada e promoveu-se 0 esvaziamento total de todos os tancues da Est aca o da ESAL, resultando, ao flna], na selscao de urn pequeno grupo de .pelxes para formar um novo plantel de reprodutoras com euminacao de todo 0 restante dos anlmals. As matrizes antigas de hornorurn foram separadas, masmorreram ap6s a intense manejo conduzido naquele perfodo.

Considerando-se 0 fato de. que,

experimental mente, nenhum eruzamento interespecfficb envolveu F de hornorum (aaWY) e que a ocupacao pela especta em todo 0 perlodo foi de apenas urn tanque da Estagao, e,

Observou-se, pelo axarne rnaorcscoptco xia papila genital, conforme SHELTON at alii (1978), que na progenle-do casal Aapareceu apenas um macho em 2622 descendentes. A progenie do cas.:it-C-con'stltuiu-sa de 29 exemplares;-sendo- 100% do sexo feminin~. Os easais B· e D apresentaram 74,5% €I 74,2% de machos com 1037 e 302 sobreviventes, respectivamente.

A ocorrencia de progenies pr6xima ou igual a 100% da ferrieas como 'nos casals A e Cera esperada. Os resultados encontrados demonstram a vlabltldade da Inversao sexual de 1 e me a s em mac has (" M "), bern co m 0 a efetividade destes na pr o ducao de espermatozotdes vlavels a repr oducao. No entanto, a ocorrsncla dos-resurtados de 3:1 M:F em 1339 alevlnos dos casais BeD, ao invas da relacao 1: 1 (P < D, 01), esperada do cruzamento de machos geneticamente puros (AAXY). indica

Cienc. e Prato Lavras, 16(2):283-287, abr./ju.n. 1992

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ao os M 1te sta do os

& :ia 3.m.

QUADRO 2. Obtencao 'dos hfbridos na Estagao de Piscicultura da ESAL (1976 - 1978).

M O. homorum x F 0, niloticus

F/M aaYY

AAXX

AaXY*

• Rela~ao M:F = 1:0,

ira

QUADRO 3, lnlclo da mtsctqenacao na Estacao da ESAL, no perfodo de 1Q7B-19,s1, destacando-se 0 aparecimento de. F com genotipos modificados no plantel de tilapla nil6tica,

M* AaXY x F AAXX
M
F AX AY aX aY
AX AAXX AAXY AaXX AaXY
Padroea *1 *2 *3 *4 • M Hfbridos mist urados ao plantel de nilctica ..

"I F Pura; '2 M Puro; '3 F Modificada; '4 M Hibrido.

se

() Ite de -.

1m

0, as'

QUADRO 4. Hlbrldacoes com utillzacao de F modificadas e puras. Machos hornorum e Ft§mea nil6tica.

'M aaYY x F (AaXX e AAXX)

M

F aY M:F, PopwlaGao
AX AaX'(M 1: 1
aX aaXY F* 3:1
AX AaxVM 1 :0 • Outre padrao de F modificada do padrao nil6tica AAXX. '

e,

ainda, que a' selacao de apenas M rnaduros e a torrnacao de novo ptantal, a partir dos pelxss que estavam no plantel de nilotlca e tarnbern as

- sequanctas dosc::ruzamentos aprasanrados, po d em-s e selecionar do Quadro 1 ~s comblnaeoe.s mats pr ovavais ocorrtdas na EstaQ8.o da ESAL e que -astao contidas no Ouadro 6.

No antantov ao se anaJisar as quadros antertores pode-se inferir que 0 planter- atual esteja formado por grupos de animals corn os sequintesgen6tipos; M (AAXY, AaXY, AaYY e aaYY)e F (aeXY, AaXX, aaXX e AAXX), cujas

QUADHO 5, Cruzamento entre F modificadas do padrao nllottca AAXX (Quadro4) eM com padrao hfbrido alterando 0 plantel de nil6tica.

M sc« x F aaxY
M
F AX. AY ax aY M:F
ax A2:XX F AaYYM aaXXF "1 aaxY F 1:1

aY ABXf M AaVY M '2 aaXY F

aaYV M *3

'1. Aparecimento de outro padrao de F modificada do padrao ni16tica AAXX;

'2, Aparecimento de M com padrao pr6ximo do Super-macho (AAYY) su ge rido por AVTALION & HAMMERMAN (1978).

'3 Aparecimento no plan tel de ni16tica M com padrao hornorum aaYY.

relacoes M:F dos diversos cruzamentos podem ser observados no Ouadro 7.

Com a adocao da tacntca de inversao .sexual em 1982, sendo as machos reprod utores dsste estudo Ei seus lrmaos os primeiros pelxas a sofrerem 0 processo na EstaQao da ESAL, pode-se, portanto, prever a ampllacao dos q e no tl p o s con.stantes do Quadro 7 com possibilidade de Iormacao de linhagens com v a rto s p ad r o es de gen6tipos, conforme apresentado no Quadra 8,

QUADRO 6. Possfvals gen6tipos dos pelxas para produzlrern a .rela<;ao M:F 3:1 na Esta98.0 da ESAL, extrafdas do Quadro 1.

M

F

AaYV

AAXY

aaXY AaXX'

3:1 3:1

3: 1

Fonte: AVTALION & HAMMERMAN (1978).

QUADRO 7. Rela~oes M:F provaveis deocorrerem no plantel de tllapla nllotlca da Estacao da ESAl apes dlversos cruzarnentos.

M
F AAXY AaXY AaYY aaYY (W)?
aaXY 3:1 1;1 3:1 1 :1
AaXX 1:1 -~3:5 3:1 1 : 1
AAxX 1:1 1 : 1 1 :1 LO
aaXX 1: 1 1:3 i:1 0:1 Cienc, e Prat.Lavras, 16(2):283-287, abr ./jun. 1992

,: .

.. '

286

QUADRO 10. Distrtbulcao . das frequencias

observadas (F.O.) e esperada (FE.) para saxo das progenies de 4 casals de tllapla nil6tiea.

QUADRO 8. Relag6es M:F de cruzamentos entre "M" provenientes de F invertidas e F do plantel da Estacao da ESAL.

II Mil
F aaXY fo.aXX AAXX aaXX
aaXY 1 :3 1:3 1: 1 0: 1
AaXX 1 :3 0: t 0:1 0: 1
AAXX 1:1 0: 1 0: 1 0: 1
aaXX 0;1 0: 1 0: 1 0: 1 F.O.

F.E.

F.E.

Casais Machos F&meas Machos Femeas Machos

2.621 1.996.50· 655,.50

o

A

B n2 265 777,75 259.25 0 1.037
C 0 29 21,75 7.25 0 29
D 224 78 226.50 75.50 0 302
Totals 997 2.993 2.992.50 997.50 0 3.900
M:F 1:3 3:1 0:1 As proporcoes M: F obtidas nos eruzamentos experimentais assoeiadas aos dados constantes nos Quadros 7 e 8. p e r m it e rn indicar as p r ov av e ls gen6tipos dos reprodutores envolvidos, a saber:

- Casais 8 e 0; M (AAXY ou AaYY) e F(aaXY ou AaXX) respectjvarnente:

- Casais A e C; todos as genotipos dos peixes reprodutores "M" e F constantes do Quadro 8 poderiam tar produzido as progenies destes casais em algumas das cornblnacoes com 100% de F e ainda na cornbtnacao (aaYY M e aaXX F) do Quadro 7.

As compar aco e s estatfstieas podeiTI ser observadas nos Quadros 9, 10. 11 e 12

QUADRO 11. Contrastes utilizados no teste de X2 para troquenclas do sexo e sobrevlvencla.

Sexo Sobrevlvencia
Y1 (A + C) - (B + -3A + B + C + D
D)
Y2 A-C 2B - (C + D)
Y3 = B - D C-D QUADRO 9. Dlstrfbutcao de trequenclas de sobrevlvsncla na prcqenle de 4 casals de tllapla nilotlca apes amputacao de uma das nadadeiras.

QUADRO 12. Significancia estatlstica dos contrastes de .cornparacoes entre as trequenclas do sexo e tarnbsm para sobrevlvencla,

Quant. Quant Ditererica Sobre-
lruclal final des- obser- vivencia
povoa- pesca vada (%)
menta
2.835 2.622 213 92,49
1.114 1.037 77 93,09
863 29 834 3,36
644 302 342 -46.89-
5.456 3.990 1.466 Casais Arnpu-

tacoes nos descendentes

Contrastes X2 3:1 M:F X2 0: 1 M:F X2 sabrevtvsncta

7.945,27** 740,86**

Y1

7.632,68**

A Integra

8 Dorsal

CAnal

-D- -Pelvica

7.771,00** 0,00038 7.695,90**

0,0766 408,5769** 7.674,66** .

Y2 Y3

Tatal

•• Significativo ao nfve! de 1 %.

·.A r elac ao 1<3M:F obtidada analise em conjunto dos easais A, S, CeO, constantes do Quadro 1 0, retorca a fato da necessidade de se fazer uma selecao dirigida '.1'10 p.lantel atual da e s ta c a o e ao mesmo tempo confirma a potencialidade da uttllzacao do rnet od o da invarsao sexual e do teste de progenie indLvidual na setecac dos anlmatsdestlnados a formacao dos plantets de reprodutores, urna vez que a grande prollteraceo e a rapldo amadurecimento

sexual destes peixes aumentam slgnifieativamente estas possibilidades.

CONCLUSOES

a). Os provavels sexos geneticos dos casals B e D sao M (AAXY.cou AaYY) e F (aaXY ou AaXX) , respectlvarnents. Para os casals A e C: sao "M"

Cienc, e Prat, Lavras, 16(2):28~-287, abr./jun. 1992 .

LS7

REFE·RENCIASSISLIOGRAFICAS

e F (aaXY, AaXX, AAXX e aaXX) ou (aaXY M e

aaXX F); . .

b) A adocao da tecnlca de inversao sexual permite alterar as frequerrclas de M e F no' plantel de tilapla nil6tica consideravelmente tornando viavels os cruzamentos controlados a partir da seqreqacao sexual na progenie dos peixes individ ualrnenta envolvidos;

c) A arnputaca o da nadadeira dorsal nao influiu na sobrevivencla dos peixes, enquanto a arnp uta c ao das nadadeiras anal e pelvlca reduziram-na;

d] A c o n d u c a o de novos ensaios, objetivando-se a se le ca o de linhagens de machos e fameas, deve ser planejada e executada com urgencia pelos avances que poderao proporclonar a piscicultura das tilaplas na regiao de influenc'ia da estacao.

1. AVTALlON, R.R. & HAMMERMAN, I.S. Sex determination in Sarotherodon (tilapia). I. Introduction to theory of autosomal

influence. Bamidgeh, Israel, 30(4):

110-5, 1978. .

2. HULATA, G.; WOHLFARTH, G. &

ROTHBARD, S. Progeny-testing

selection of tilapia braodstocks

producing an-mate hybrid progeniespreliminary. Aquaculture, Amsterdam, 33:263-8, 1983.

3. JENSEN, G.L. & SHELTON, W.L. Effects of estrogens on Tilapia aurea: lmpllcations for production of monosex genetic male tilapia. Aquaculture, Amsterdam, 16:233-42, 1979.

SUMMARY

PROGENY-TEST IN Oreochromis niloticus (TREWAVAS, 1982) SUBMiTTED TO SEXUAL INVERSION

4. KALIL, E.B. Principios de tecnica experimental com animais., Piracicaba, Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", 1977. 210p. (Curso de p6sgraGluagao de nutrlcao animal e pastagem).

5. L1, C. C. Introduction Experimental; experimental statistics. New York, Mac Graw-Hill Book, 1964. 460p.

6. SHELTON, W.l.; K.D. s JENSEN, G.L. Use of hormones to produce monos rnonosex tllapla for aquaculture. In:

SMITHERMAN, R.O.; SHELTON, W.L. & GROVER, S.H.; eds. Symposium on the culture of exotic fishes. Alabama, ,Amerlcan Fisheris Society, 1·978. p,

10-33.

This work was conducted between October, 1982 and April, 1984, in experimental ponds of Escola Superior de Agricultura de Lavras, Lavras - MG. Four til apia nilotlca male with reversal sex and normal female were A, B, C and D pair spawned. The progeny sex ratioos (M:F) in pair spawnings of broodfish (A and C), (8 and D) were3:1 and 0:1 respectively. In fish without the anal and 'pelvic fin, the survivor rates were 46,89% and 3,36% respectively. In normal fishes and without dorsal fin the mean of survival were 92,49% and 93,09% repectively. The sexual inheritance genetics of pair Band D were: male (AAXY or AaYY) and Female. (aaXY or AaXX) respectively and the patr A and C were: "Maie' and Female (aaXY, AaXX, AAXX or .aaXX) .or (aaXY Male and aaXX Female). The results c.o.nf i rrn.ad, t hro u g-h of s exu a I j nve rs to rr technique in broodfish, the changing the male and female in progeny frequency.

INDEX TERMS: Tilapia, reproduction, geneti.cs, fry, lnverston sex, progeny-test.

7. ; MERIWETHER, F.H.; SEMMENS,

KJ. & CALHOUN, W. Progeny

sex-rations from intra- especific pair spawning of Tllapla au rea and Tilapla .

nilotica. In: INTERNATIONAL

-'. SYMPOSIUM- ON TILAPIAIN

AQUACULTURE, Israel, 1.983. p.

270cBO_

Cienc, e Prat, Lavras, 16(2):LS3-LS7, abrJjun. 1992

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