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GENETICA BACTERIANA
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GENETICA BACTERIANA
INDICE
Introducción…………………………………………………………………………………
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Cromosoma procariotico…………………………………………………………………
……..6
Mutación……………………………………………………………………………………
…...7
Recombinación Genética…………………………………………………………………
……12
Transformación………………………………………………………………………………
…13
Transducción………………………………………………………………………………
…...15
Conjugación…………………………………………………………………………………
…18
Recombinación en bacteriófagos………………………………………………………
………20
Bibliografía…………………………………………………………………………………
…24
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INTRODUCCIÓN
“Las bacterias son microorganismos con una extraordinaria capacidad de adaptación a
diferentes condiciones ambientales.
Para comprender la esencia de esta capacidad es importante conocer las bases de su genética,
es decir como esta organizada la información genética, como realizan y regulan su expresión,
que mecanismos de variación génica poseen. Entre otras, la capacidad infecciosa de las
bacterias patógenas, radica en que poseen la información génica necesaria para colonizar los
tejidos de un huésped, invadirlos y/o producir sustancias tóxicas que en definitiva causarán
la enfermedad.
Por otro lado, el conocimiento del modo de funcionamiento genético de las bacterias,
sumado al hecho de que estos microorganismos son de relativo fácil manejo en el
laboratorio, que en general tienen un rápido crecimiento, ha llevado a que podamos
utilizarlos para sintetizar productos útiles a la medicina, tanto para el diagnóstico como para
la prevención y tratamiento de varias enfermedades. Estas posibilidades se han visto
incrementadas a partir del desarrollo de la ingeniería genética y la disponibilidad de técnicas
de biología molecular”
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Hay cuatro tipo de bases nitrogenadas en los nucleótidos del ADN: timina
(T), citosina (C), guanina (G) y adenina (A).
Timina
La timina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos
nucleicos y en el código genético se representa con la letra T. La timina es una base
orgánica nitrogenada de fórmula C5 H6 N2 O2 y es un compuesto cíclico derivado
de la pirimidina (es una ‘base pirimidínica’)
Adenina
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Principios principales
○ las bacterias se multiplican por división.
○ el ADN se duplica: cada una de las células hijas recibe una copia de la molécula; es
decir se forman clones de bacterias con la misma dotación genética.
○ las bacterias cambian sus características, es decir su fenotipo, de forma que
adquieren resistencia frente a los antibióticos.
CROMOSOMA PROCARIOTICO
Aunque en las bacterias no se observan estructuras con las distintas características
morfológicas de los cromosomas eucarióticos, su genoma se encuentra organizado en
cuerpos definidos.
El cromosoma procariota es una sola molécula circular de ADN contenida en una región
definida del citoplasma, denominada nucleoide que ocupa aproximadamente un tercio del
volumen de la célula, sin estar separado del mismo por una membrana. Este cromosoma es
el elemento obligatorio del genoma, aunque es frecuente encontrar unidades de replicación
autónomas llamadas plásmidos, que si se pierden, la bacteria sigue siendo viable.
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MUTACION
En el ADN
Una mutación es un cambio heredable en la secuencia de bases de los ácidos nucleícos que
constituyen el genoma de un organismo, que ocurren en condiciones naturales con una muy
baja frecuencia y se deben fundamentalmente a errores en los procesos de replicación del
ADN.
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Son aquellas que implican un cambio en una única base, y pueden provocar que se cambie
un aminoácido por otro en el producto proteico (mutación por cambio de sentido). Otras
veces no se traducen en ningún cambio (mutación silenciosa), ya que como sabemos existe
más de un codón para cada aminoácido. También puede suceder que el codón se convierta
en una señal de terminación (mutación sin sentido) y en ese caso se traducir una proteína
incompleta no funcional.
Mutaciones génicas o moleculares
Son las mutaciones que alteran la secuencia de nucleótidos del ADN. Entre las mutaciones
puntuales podemos distinguir:
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Mutaciones cromosómicas
La sustitución de un nucleótido por otro no es
el único tipo posible de mutación. Algunas
veces se puede ganar o perder por completo un
nucleótido. Además, es posible que se produzcan modificaciones más obvias o graves, o que se
altere la propia forma y el número de los cromosomas. Una parte del cromosoma se puede separar,
invertir y después unirse de nuevo al cromosoma en el mismo lugar. A esto se le llama inversión. Si
el fragmento separado se une a un cromosoma distinto, o a un fragmento diferente del cromosoma
original, el fenómeno se denomina translocación. Algunas veces se pierde un fragmento de un
cromosoma que forma parte de una pareja de cromosomas homólogos, y este fragmento es
adquirido por el otro. Entonces, se dice que uno presenta una deleción o deficiencia (dependiendo si
el fragmento que se pierde es intersticial o terminal, respectivamente) y el otro una duplicación. Por
lo general, las deficiencias son letales en la condición homocigótica, y con frecuencia las
duplicaciones también lo son. Las inversiones y las translocaciones suelen ser más viables, aunque
pueden asociarse con mutaciones en los genes cerca de los puntos donde los cromosomas se han
roto. Es probable que la mayoría de estos reordenamientos cromosómicos sean la consecuencia de
errores en el proceso de sobre cruzamiento.
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Mutaciones espontáneas o inducidas
Espontaneas:
Son aquellas que surgen normalmente como consecuencia de errores durante el proceso de
replicación del ADN. Tales errores ocurren con una probabilidad de 10 ^ -7 en células
haploides y 10 ^ -14 en diploides.
Inducidas:
Surgen como consecuencia de la exposición a mutágenos químicos o biológicos o a
radiaciones.
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Plásmidos
Pequeñas moléculas de ADN circular
Autorreplicativas
No contienen genes esenciales
Confieren habilidades útiles en circunstancias muy especificas (ej. Resistencia a
antibióticos)
Los plásmidos pueden clasificarse según distintos criterios, por ejemplo por su tamaño en
pb, su número de copias en la bacteria o por el tipo de genes que porta (plásmidos de
virulencia, plásmidos de resistencia a antibióticos, etc.) También pueden clasificarse en
grupos de incompatibilidad. Se dice que dos plásmidos pertenecen al mismo grupo de
incompatibilidad si son incapaces de coexistir en la misma célula bacteriana. Muchos
plásmidos, en general los de mayor tamaño (que pueden portar hasta 50 o 100 genes),
suelen ser capaces de transferirse de una bacteria a otra mediante un proceso llamado
conjugación.
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Bacteriófagos
Son pequeñas moléculas de ADN o RNA, cápside proteínica en la forma libre, sin cápside
dentro de las bacterias y se multiplica dentro de estas mismas.
Fagos virulentos:
Solo se propagan por ciclo lítico
Fagos temperados:
Pueden propagarse por ciclo lítico o ciclo lisogénico
Bacteriofago
Elementos transponibles
Son segmentos de ADN, de cientos o miles de pb, nunca dependientes saltan dentro de la
célula y con mucha frecuencia eligen el sitio al azar. Tienen extremos repetidos invertidos.
contienen genes extra, que pueden codificar para muy distintas propiedades fenotípicas,
encontrándose entre las mas importantes desde el punto de vista clínico, la resistencia a
antimicrobianos como ser el caso de la resistencia de alto nivel a la gentamicina encontrada
en algunas cepas de Enterococcus sp. Son responsables también de mutaciones en el ADN.
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Los elementos transponibles están ampliamente distribuidos en la naturaleza, tanto en
virus, células procariotas y eucariotas. Existen 2 variedades de elementos transponibles:
RECOMBINACIÓN GENÉTICA
• Transformación
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• Transducción
• Conjugación.
Recombinación Homóloga:
Intercambio genético entre secuencias homologa de ADN de dos orígenes distintos. Las
secuencias homologa de ADN tienen la misma secuencia o casi la misma, por lo tanto
puede ocurrir apareamiento de bases en una longitud extensa de las dos moléculas de ADN.
TRANSFORMACION
Si bien la mayoría de las bacterias no presentan capacidad natural para captar ADN, es
posible inducir en el laboratorio la competencia, generando por distintos medios
distorsiones en la membrana celular, por ejemplo mediante pulsos eléctricos
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(electroporación) o mediante cambios osmóticos y térmicos. Estos procedimientos son muy
utilizados para introducir
experimentalmente ADN extraño, por
ejemplo un plásmido, en una bacteria y así
“transformarla” para que adquiera un
fenotipo de interés. Las bacterias también
pueden ser transformadas con ADN viral, en
cuyo caso el proceso se llama transfección.
TRANSFORMACION Y TRANSDUCCION
TRANSDUCCION
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La transducción es la transferencia de ADN de una bacteria a otra por intermedio de un
bacteriófago.
No todos los ciclos virales son iguales, pudiendo destacar dos ciclos principales, el
lisogénico y el lítico.
Transducción
Transducción generalizada
Cuando se va a replicar un fago, se produce la lisis de la bacteria para que los fagos puedan
abandonar la bacteria. Esto provoca que pueda existir el intercambio de material genético
entre bacterias sin que haya contacto celular. La formación de bacterias recombinantes a
partir de las originales, puede darse gracias a la acción de un agente filtrable que debía
transportar los marcadores entre bacterias.
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Este agente es un fago, y podemos destacar el fago P22. La degradación del cromosoma
bacteriano durante el ciclo lítico, posibilita el que algunos trozos de este cromosoma
(siempre que sean de la longitud correcta), sean empaquetados por error dentro de cápsidas
víricas, lo que provocará que cuando este fago vuelva a infectar una bacteria, introduzca el
fragmento erróneo de cromosoma. Así es como se produce la transducción. Este tipo de
fagos se denomina fagos transductantes y los cuales, aunque son minoritarios (1/100000),
cuando infectan nuevas bacterias, pueden producir la integración de los marcadores
genéticos que llevan en el cromosoma bacteriano receptor y generar bacterias
transductantes. Como en la conjugación, estas bacterias recombinantes se producen por
doble entrecruzamiento entre el segmento de DNA dador y la región homóloga del
cromosoma receptor.
Transducción especializada
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Se da gracias a la acción de algunos fagos que se insertan en regiones concretas del cromosoma
bacteriano, de forma que solamente pueden transducir genes que se encuentran alrededor de estos.
Un ejemplo es el fago _, que se integra por recombinación en una región denominada att del fago y
otra homóloga perteneciente al cromosoma bacteriano y situada entre los genes gal y bio.
CONJUGACION
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La conjugación bacteriana es un proceso de transferencia de información genética desde
una célula donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos, que
portan un conjunto de genes cuyos productos participan en el proceso, y que requiere
contactos directos entre ambas, con intervención de estructuras superficiales especializadas
y de funciones específicas (pili sexuales en los Gram negativos, y contacto íntimo en los
Gram positivos). La capacidad de conjugación depende de la presencia en la bacteria de
plásmidos conjugativos que contienen los genes necesarios para tal proceso.
Algunos de estos plásmidos se comportan como episomas, es decir, que pueden integrarse
en el cromosoma; en este caso, si se produce la conjugación, se puede transferir el propio
plásmido más un segmento adyacente del cromosoma, que a su vez podrá recombinarse
con secuencias homólogas del cromosoma del receptor, dando lugar a un cromosoma
híbrido.
Proceso
podemos usar los datos de la conjugación interrumpida para realizar un mapa con
frecuencias de recombinación, usando la conjugación, primero tenemos que asegurarnos de
que los marcadores han pasado al cromosoma receptor, teniendo en cuenta que gracias al
gradiente de transferencia natural, pasan con mayor frecuencia y facilidad, aquellos
marcadores que se encuentran más cerca del punto de entrada. Esto es debido a que el
apareamiento entre las bacterias suele interrumpirse espontáneamente, de forma que la
transferencia de los marcadores suele ocurrir en el orden en que estos están presentes en el
DNA a partir del punto de inicio de la transferencia del mismo factor F.
Los factores F´ son más fáciles de recombinar porque poseen más puntos para recombinar.
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RECOMBINACIÓN EN BACTERIÓFAGOS
Si dos fagos infectan a una misma bacteria, se dan las condiciones propicias para poder
obtener entrecruzamientos y recombinación en el genoma vírico. Este fenómeno suele
denominarse coinfección.
Obtendremos en la progenie virus que poseerán el fenotipo parental y otros individuos que
serán recombinantes. Cuando ocurre la coinfección, si los genomas no mantienen contacto,
entonces no podrá darse entrecruzamiento. Podremos hacer mapas según los datos de
recombinantes que obtengamos. Usaremos la relación de siempre, fagos
recombinantes/número total de fagos. Para determinar esta frecuencia de recombinación
debemos introducir las bacterias en un medio líquido, para aumentar la probabilidad de que
los fagos entren en la bacteria. Una vez se produce la recombinación, debemos detectarlos,
cosa que haremos cogiendo el lisado y poniéndolo en placas sólidas, para observar el
fenotipo de la progenie. Observaremos placas de lisis o calvas (que es la zona donde el
fago lisa). Cabe destacar una diferencia entre procariota y eucariota con el fago, que es que
a veces encontramos coeficientes de coincidencia mayores de 1, porque tenemos
interferencia negativa. Esto implica que el que se produzca un entrecruzamiento favorece el
establecimiento de otro en otro lugar.
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TECNOLOGIA DEL DNA RECOMBINANTE
Secuenciación:
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La secuenciación rápida de todos los nucleótidos de fragmento purificado de
ADN, hace posible determinar los límites precisos de un gen y la secuencia de
aminoácidos que codifica
Clonación de ADN:
Se puede conseguir que un fragmento de ADN se integre en un elemento génico
autoreplicante (plásmidos, virus) que habita en una bacteria de tal manera que de
una molécula de ADN puede ser reproducida generando muchos miles de
millones de copias idénticas.
Ingeniería génica:
Se pueden alterar secuencias de ADN produciendo versiones modificadas de los
genes, los cuales pueden reinsertar en células u organismos.
Endonucleasas de restricción
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Enzimas utilizadas en la tecnología de ADN recombinante
BIBLIOGRAFIA
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http://www.unap.cl/csmar/BioTecnologia/Clase5.pdf -
http://www.fagro.edu.uy/~microbiologia/docs/Gen%E9tica.pdf
http://fbio.uh.cu/genmol2/temas/cromosomas.htm
http://apuntes.rincondelvago.com/conjugacion-bacteriana.html
http://html.rincondelvago.com/acidos-nucleicos.html
http://es.wikipedia.org/wiki/ADN
http://es.wikipedia.org/wiki/Conjugación_bacteriana
http://es.wikipedia.org/wiki/Mutaci%C3%B3n
http://www.monografias.com/trabajos10/muta/muta.shtml
http://www.personales.ulpgc.es/ecastro.dbbf/Descargas/Transparencias/DNA%20re
combinante.pdf
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