Prueba de la Catalasa

Se utiliza para comprobar la presencia del enzima catalasa que se encuentra el la mayoría
de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo. La principal
excepción es Streptococcus.

Originariamente, esta prueba era utilizada para diferenciar entre los siguientes géneros:

• Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus (+).

• Bacillus (+) de Clostridium (-).
• Lysteria monocytogenes (+) y/o Corynebacterium (+, con las excepciones de
C.pyogenes y C.haemolyticum, ambos -) de Erysipelothrix (-)

Una prueba de rutina de la catalasa a temperatura ambiente puede hacerse siguiendo dos
técnicas:

1. Método del portaobjetos (recomendado):

• Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24 horas y
colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.
• Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al 30% sobre el
microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.
• Observar la formación inmediata de burbujas (resultado positivo).
• Desechar el portaobjetos en un recipiente con desinfectante.
• Si se invierte el orden del método (extender la colonia sobre el agua oxigenada)
pueden producirse falsos positivos.

2. Método del tubo de ensayo:

• Agregar 1ml de H2O2 al 3% directamente a un cultivo puro de agar en slant

densamente inoculado.
• Observar la formación inmediata de burbujas (resultado positivo).

Precauciones: Si se utilizan para esta prueba cultivos procedentes de agar sangre, se debe
tener la precaución de no retirar algo de agar con el asa al retirar la colonia ya que los
eritrocitos del medio contienen catalasa y su presencia dará un falso resultado positivo.

3. PRUEBA DE CAMP
Objetivo: Separar Str.agalactiae de los demás estreptococos ß-hemolíticos.
Fundamento: Se basa en que los estreptococos del grupo B producen un factor llamado CAMP (factor de
monofosfato de adenina cíclica) que aumenta la zona de hemólisis producida por un estafilococo productor de
ßlisina.
Procedimiento: Se realiza estriando un cultivo de estreptococo ß-hemolítico en forma perpendicular a una
estría de un estafilococo productor de ß-lisina en agar sangre. Se incuba 18-24 horas a 37ºC.
Interpretación de los resultados: La prueba positiva se evidencia por la presencia de una zona de
potenciación de la hemólisis en forma de puntas de flecha en el lugar donde se contactan las dos estrías.