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Cromatografia de Afinidade

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Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A ± Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. . tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo.

Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. . aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo. e outra. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada.

C e D. B. que logo atrairá a proteína A para si.Fase Estacionária Na fase estacionária. que se liga facilmente com glicose. a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo. a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. Por exemplo: numa mistura de proteínas A. Portanto. desejamos estudar a proteína A. . que serão filtradas do tubo. conseqüentemente separando-a das demais.

. em meio a solução. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo. guanidina. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo. é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. em outro tubo para estudo. No exemplo.Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. sendo despejada.

Resumo .

y . y Purificar e concentrar uma solução enzimática. y Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura. y Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias. como as drogas.Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão.

pdf08-1007.ufscar.huji.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.pdf y .davidson.ls.bio.Referências Bibliográficas http://www.ac.edu/courses/gen omics/method/Affinity.quimica.br/ignez/Aula0 8-extracao-3Dy http://teachline.html y http://www.

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