Artigo
Identificação de Bactérias Causadoras
de Infecção Hospitalar e Avaliação da
Tolerância a Antibióticos
Lílian C. Carneiro 1, Thyana T. Carvalhares 1, Marcos Antônio Pesquero2, Rosangela Coelho Quintana 1,
Sarah Borges Feitosa1, Jales Elias Filho 2, Marcos André Costa Oliveira2
1 - Laboratório de Microbiologia, Universidade Estadual de Goiás, GO
2 - Laboratório de Ecologia, Universidade Estadual de Goiás, GO
Resumo
Em função da abrangência sobre enteropatogenicidade e
ação de antimicrobianos, decidiu-se focar um aspecto ligado
ao tema. Este trabalho isola e identifica bactérias carreadas por
formiga em vários pontos de um ambiente hospitalar e analisa
a tolerância dessas bactérias enteropatogênicas isoladas aos
seguintes antimicrobianos: ampicilina, penicilina, ceftriaxona,
eritromicina e ceftazidima, em relação a seis gêneros bacteria-
nos isolados. Foram realizadas seis coletas de formigas a cada
dois meses no Hospital Regional de Morrinhos, GO, desde o
mês de setembro de 2005.
Utilizou-se uma isca de carboidrato e uma de proteína por
ambiente em período diurno. Somente uma espécie de formi-
ga do gênero Pheidole foi identificada ao longo das coletas.
Previamente as formigas foram imersas em caldo BHI, depois
procedeu-se ao semeio em ágar, MacConckey, cled, salmonella
shigella – SS, ágar sangue, PCA (ágar para contagem) e foram
realizadas provas bioquímicas: lactose, glicose, H2S, uréase,
L-TDª, motilidade indol, lisina, oxidase e citrato de Simmons,
sensíveis para identificação bacteriana.
Os resultados apontam uma maior prevalência de Escherichia
coli em todos os pontos estudados, salientando que durante a
pesquisa foram encontrados carreadores contaminados em todos
os ambientes hospitalares pesquisados. Também foi feito antibio-
grama e a espécie Staphylococcus sp apresentou resistências
para todos os antibióticos testados e o antibiótico eritromicina
não inibiu o crescimento de nenhum microrganismo.
Os resultados alertam para a necessidade de implantação
de um sistema de controle microbiológico no hospital.
Palavras-chave: Análise microbiológica, resistência antimi-
crobiana e saúde pública
106
Summary
Identification of bacteria that cause hospital in-
fections and evaluation of tolerance to antibiotics
Because of the enteropathogenicity and antimicrobial ac-
tions, we decided to focus an aspect related to this subject.
This work isolates and identifies bacteria carried for ant in
many points of a hospital and analyzes the tolerance of these
enteropathogens bacteria isolated to the antimicrobial: am-
picilin, penicillin, ceftriaxone, eritromicine and ceftazidime,
regarding six isolated bacterial species.
Since September 2005 were had been accomplished six ants’
collections every two months in the public Hospital of Morrinhos
city - GO. We used one carbohydrate and one protein baits per
area in diurnal period. Only Pheidole gender ant was identified
along the collections. Previously the ants were immersed in BHI
broth, and after that was then sowed: MacConckey agar, cled
agar, salmonella shigella agar – SS, blood agar, ACP (countains to
agar) and it was realized some biochemistry tests: lactose, glicose,
H2S, urease, L-TDª, motility, indol, lysine, oxidase and Simmons
citrate, sensitive tests for bacterial identification.
The results show a larger prevalence of Escherichia coli
in all studied points, pointing out that during the research
was found contaminated carrier in all searched hospitable
environments. Antimicrobial tests were realized and the
Staphylococcus sp bacteria introduced resistances for all of
the antibiotics tried and the eritromicine antibiotic didn’t inhibit
the growth of no microorganism.
The results appoint to the need of implantation of a system
for hospital microbiological control.
Keywords: Microbiological analysis, antimicrobial resis-
tance and public health
NewsLab - edição 86 - 2008
Introdução
A s infecções entéricas cons-
tituem um dos problemas
mais graves na maioria dos paí-
ses em desenvolvimento. A alta
incidência de casos, assim como
a morbimortalidade, refletem as
condições de saneamento e um
nível sociocultural e econômico
precários (14). Entre os fatores
predisponentes dessas infecções
estão o próprio doente, os mi-
crorganismos determinantes de
tais infecções e o meio ambiente
hospitalar (15).
As bactérias encontradas neste
trabalho possuem ação entérica no
organismo humano e estão rela-
cionadas a infecções hospitalares.
A Escherichia coli foi a primeira ca-
tegoria diarreiogênica identificada.
Há propensão elevada de crianças
adquirirem a infecção em hospitais
públicos. As infecções por E. coli
são muito mais freqüentes em
crianças pobres dos grandes cen-
tros urbanos.
Outra bactéria isolada foi a
Salmonella, verificando-se um
aumento do seu isolamento nos
últimos anos. Um aspecto de
extrema importância tem sido o
aumento expressivo da ocorrência
de amostras multirresistentes aos
antimicrobianos. As Aeromonas
também têm emergido como
importantes patógenos humanos
e o trato gastrointestinal parece
ser a principal fonte de infecção,
acarretando em doença diarréica
de curta duração.
Os Enterococcus constituem
um importante grupo de microor-
ganismos que se destacam como
patógenos oportunistas. Podem
surgir surtos de infecções hos-
pitalares e as espécies de maior
108
freqüência podem geralmente
ser encontradas como membros
da microbiota normal, sobretudo
do trato intestinal de seres hu-
manos.
Os Staphylococcus também são
membros da microbiota normal da
pele e mucosas, mas podem cau-
sar infecção em diferentes órgãos
e tecidos. Há espécies que são
oportunistas, associados, em ge-
ral, com infecções hospitalares.
A Klebsiella pode causar
pneumonia, embora seja mais
comum a sua implicação em
infecções hospitares (aparelho
urinário e feridas), em particular
em doente imunologicamente
deprimido (13).
Determinadas bactérias en-
teropatogênicas são isoladas
freqüentemente em infecções
ocorridas em enfermarias e pe-
diatrias de unidades hospitalares
(15). Constata-se que pacientes
hospitalizados ou indivíduos cujas
defesas foram enfraquecidas por
doenças ou terapias estão sus-
ceptíveis também a patógenos
oportunistas. Alguns microorga-
nismos envolvidos em infecções
tornam-se resistentes às drogas
antimicrobianas comumente usa-
das nos ambientes hospitalares
(2). A emergência de patógenos
resistentes a antibióticos é um
fenômeno de preocupação na área
clínica e na farmacêutica, pois sua
resistência pode comprometer o
tratamento de infecções alimen-
tares severas (9).
O descobrimento da penicilina
abriu o campo da terapia antibi-
ótica, ampliando a descoberta e
comercialização de demais anti-
bióticos (1). Um dado antibiótico
tem que satisfazer muitos critérios
de seleção para sua ótima ativida-
de, incluindo entrada, retenção,
distribuição subcelular, expressão
da atividade nos compartimentos
infectados, susceptibilidade da
bactéria nos sítios de infecção
com atenção para a sua fase de
crescimento (11).
Antibióticos são amplamente
usados para tratamento e pro-
filaxia de infecções, a ponto de
corresponderem de 30% a 50%
dos gastos hospitalares com me-
dicamentos (4). Vários estudos
analisaram o padrão de pres-
crição em hospitais de ensino e
assistenciais, constatando que
de 25% a 50% das prescrições
eram inadequadas, principalmen-
te devido à escolha incorreta do
medicamento, dose ou tempo de
tratamento (12).
Depois de várias décadas de
antibioticoterapia continuamente
bem-sucedida contra infecções
bacterianas, estamos agora en-
frentando um prospecto preocu-
pante: a evolução acelerada de
resistência para com os antibióti-
cos de importantes patógenos hu-
manos (8). Certas espécies bacte-
rianas têm conseguido adaptar-se
aos antibióticos mediante seleção
progressiva de clones resistentes.
A resistência é transmitida a seus
descendentes e a outras bactérias
da mesma espécie e de espécies
distintas (1).
Em função da abrangência so-
bre enteropatogenicidade e ação
de antimicrobianos, decidiu-se fo-
calizar um aspecto ligado ao tema.
Este trabalho isola e identifica
bactérias carreadas por formiga
em vários pontos de um ambiente
hospitalar e analisa a tolerância
dessas bactérias enteropatogêni-
cas isoladas aos seguintes antimi-
crobianos: ampicilina, penicilina,
NewsLab - edição 86 - 2008
cefatriaxona, eritromicina e cef-
tazidima, em relação aos gêneros
bacterianos isolados.
Metodologia
O trabalho foi desenvolvido
inicialmente no Hospital Regional
de Morrinhos – GO e a escolha do
local se justifica pelo maior fluxo
de pacientes. As pesquisas se ini-
ciaram em setembro de 2005 com
a coleta de formigas, realizada a
cada dois meses durante um ano
em 48 ambientes do hospital atra-
vés de iscas de carboidrato (doce
de leite) e proteína (salsicha) em
período diurno.
As formigas foram coletadas
com pinça de ponta fina este-
rilizada e acondicionadas em
sacos plásticos esterilizados e
etiquetados segundo o ambiente
hospitalar. As coletas foram re-
alizadas com luvas esterilizadas
e manipuladas no laboratório de
biologia da Universidade Estadual
de Goiás.
Previamente as formigas
foram imersas em caldo BHI,
permanecendo por 24 horas
para análise inicial da presença
de cultura positiva e prossegui-
mento da identificação. Após a
amostra do caldo BHI turvar, o
semeio era procedido em ágar
Mac Conckey, onde cresceram
colônias sugestivas para E. coli
e Klebsiella. O semeio em ágar
salmonella shigella (SS) propi-
ciou resultados sugestivos para
a espécie Salmonella. Procedeu-
se então à semeadura em ágar
sangue, onde foram identificadas
colônias sugestivas para as espé-
cies Enterococcus, Aeromonas e
Staphylococcus. ágar PCA (ágar
110
para contagem) foi utilizado
como estimativa quantitativa do
crescimento bacteriano; ágar
Cled foi usado para selecionar
fermentadores de lactose e co-
loração de gram para ajudar na
identificação; provas bioquímicas
foram realizadas para concluir
o diagnóstico: lactose, glicose,
H 2S, urease, L-TDª, motilidade
indol, lisina, oxidase e citrato de
Simmons, sensíveis para identi-
ficação das bactérias (7).
A determinação da resistên-
cia ou sensibilidade foi realizada
utilizando-se discos de antibióticos
de concentrações estabelecidas,
através da diluição da amostra
nas concentrações de 101 a 107 e
inoculação das amostras em ágar
Mueller Hinton, recomendado pelo
National Comittee for Clinical La-
boratory Standards. Os pontos de
corte dos halos de sensibilidade e
resistência foram aqueles publi-
cados pelo National Comittee for
Clinical Laboratory (10).
Resultados
Este trabalho determinou o
potencial das espécies de for-
migas Pheidole como vetores de
bactérias em ambiente hospitalar
Gráfico 1. Bactérias carreadas por formigas isoladas no hospital
no município de Morrinhos, GO,
analisando as espécies bacte-
rianas isoladas e a tolerância
dessas bactérias a determinados
antibióticos.
No Gráfico 1 observamos quais
bactérias foram mais isoladas e
identificadas nos vários ambien-
tes hospitalares ao serem trans-
portadas pelos vetores.
Notamos que a espécie Esche-
ria coli foi a mais encontrada, re-
presentado 68% (49) das espécies
isoladas.
Após identificar as espécies
de bactérias que estavam sendo
carreadas pelas formigas, fo-
ram analisados os pontos mais
acometidos, considerando todos
os ambientes do hospital e os
resultados são representados no
Gráfico 2.
Ao analisar o gráfico nota-se
que na maioria dos pontos estu-
dados foi encontrado apenas um
isolado durante toda a pesquisa.
Considerando que foram realiza-
das seis coletas (uma a cada dois
meses), verifica-se que não houve
uma freqüência de positividade em
todas as coletas realizadas.
Foi realizado também um es-
tudo de dados para determinar a
ocorrência dos agentes bacteria-
nos por ambiente hospitalar – os
NewsLab - edição 86 - 2008
Tabela 1. Perfil de resistência a antimicrobianos de bactérias isoladas no hospital dados estão demonstrados no
regional do município de Morrinhos – GO Gráfico 3.
Foram pesquisadas 48 áreas
Espécies/antibióticos Caz Amp Eri Cro Pen diferentes. Ao observar os resulta-
dos percebe-se que os ambientes
Escherichia coli S R R S r
do banheiro, laboratórios, clínicas
Salmonella R s R S S
(masculina e feminina) e isolamen-
Staphylococcus sp R R R r r to foram os quatro pontos mais
Klebsiella sp S R R R r acometidos. O banheiro teve maior
Enterococcus sp R S r R S acometimento de Staphylococcus
Aeromonas S R R S R sp e os demais ambientes da bacté-
Caz: ceftazidima; Amp: ampicilina; Eri: eiritromicina; Cro: ceftriaxona; Pen: penicilina ria E. coli (dados não mostrados).
R: resistência; S: sensibilidade; s: sensibilidade intermediária; r: resistência intermediária A Tabela 1 mostra o resultado
do antibiograma referente às bac-
térias isoladas por meio do vetor
Pheidole.
Cinco antimicrobianos foram
testados em seis espécies de bac-
térias identificadas. O antibiótico
eritromicina foi o menos eficiente
e todos os isolados apresentaram
resistência quando testados. Por
outro lado, o antibiótico ceftria-
xona apresentou maior eficiência
ao inibir o crescimento de quatro
espécies. O Staphylococcus sp foi
a única espécie isolada que não
apresentou sensibilidade a ne-
nhum dos antibióticos testados.
Gráfico 2. Frequência de área pesquisadas por número de bactérias encontradas
Frequência absoluta

12 11

10 9
8
8 7
6
6 5 5
4 4 4
4 3 3
2 2 2
2 1 1

0
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Espécies de Bactérias
Gráfico 3. Ocorrência de bactérias encontradas por ambiente hospitalar

112 NewsLab - edição 86 - 2008

Discussão
Em nosso trabalho a espécie E. coli foi a mais fre-
qüente, seguida de Staphylococcus sp, Enterococcus
e posteriormente Klebsiella e Aeromonas sp.. Blatt
e Miranda, 2005, realizaram uma análise do perfil
de microorganismos causados de infecções do trato
urinário em pacientes hospitalizados e detectaram
que a bactéria E. coli foi predominante, seguida da
espécie Klebsiella.
Pode surgir uma divergência de ocorrência devido
à diversidade de microorganismos isolados, sendo
essa uma das etapas básicas para o estabelecimento
de estratégias particularizadas de controle de infecção
hospitalar (3).
Ao analisar o Gráfico 2 notamos que em todos os
ambientes houve isolamento de microorganismos,
sendo que em 29 (60,4%) dos ambientes estudados
houve a ocorrência de apenas uma espécie; em 11
(22,9%) ocorreu a presença de dois isolados por am-
biente, em cinco (10,4%) apareceram três isolados
e, em três ambientes (6,25%), apareceram quatro
isolados. Baseados em estudos anteriores podemos
sugerir que o cuidado com a higienização é a primeira
opção para a diminuição desses resultados.
No Gráfico 3 os resultados demonstram que os
banheiros e laboratórios foram as áreas mais acome-
tidas, o que reforça a falta de higienização pessoal. A
infecção hospitalar (IH), atualmente, tem despertado
grande interesse no meio científico, não só em decor-
rência da substancial contribuição para a morbimorta-
lidade dos pacientes, mas também devido à relativa
simplicidade do procedimento mais importante para
o seu controle: a higiene manual (HM).
No estudo realizado por Harbarth et al., (2002)
foi relatada a importância de intervenções educativas
de modo concomitante à disponibilidade do álcool gel
para a satisfatória adesão ao seu uso e a combinação
da lavagem das mãos com água e sabão, conforme
a disponibilidade de pias bem posicionadas, entre o
profissional de saúde e o paciente, aliada à programas
de informação sobre a importância da IH e da HM,
para que venham a ser medidas que contribuam para
o melhor controle da infecção hospitalar (6).
A Tabela 1 apresenta que a bactéria E. coli mos-
trou maior resistência à ampicilina (60,4%). Houve
casos de sensibilidade intermediária como a Salmo-
nella com relação ao antibiótico ampicilina e casos

NewsLab - edição 86 - 2008 113

de resistência intermediária: E coli,
klebsiella e Staphylococcus sp apre-
sentaram resistência intermediária
para penicilina, Staphylococcus sp
apresentou resistência intermediá-
ria também para ceftriaxona e por
último, Enterococcus sp apresentou
resistência intermediária para eri-
tromicina.
Este estudo contribui para o co-
nhecimento de taxas de resistência
locais, sendo essa uma das etapas
básicas para o estabelecimento
de estratégias particularizadas em
relação ao uso racional de antimi-
crobianos.
Os resultados alertam para a
necessidade de implantação de um
sistema de controle microbiológico
no hospital. O impacto das doenças
infecciosas emergentes poderá ser
menor se a estrutura de Saúde
Pública for reativada, de forma a
poder lidar eficazmente com essas
doenças. Há, também, que se voltar
a pensar em termos de prevenção
da doença, no desenvolvimento e
implementação de estratégias de
prevenção. As entidades oficiais e o
público em geral não estão prepara-
dos para a prevenção, sendo habitu-
al esperar que surja uma epidemia
para que se tratem os doentes e se
ativem os mecanismos de emer-
gência necessários para controlar a
epidemia. Estas medidas são caras
e, em geral, pouco eficazes.
Agradecimentos
À direção do Hospital Regional
de Morrinhos, GO, pela autoriza-
ção da pesquisa em todas as áreas
hospitalares.
Correspondências para:
Lílian C. Carneiro
lilian.carneiro@ueg.br

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