ESTUDIO DE LÁMINA

PERIFÉRICA

DR ROBERTO ROLDAN A.
JEFE DE SERVICIO DE PATOLOGIA CLINICA DEL HOSPITAL
ESSALUD III
Se debe realizar en todos los
pacientes que presenten un
Hemograma anormal
 ANEMIA

 LEUCOCITOSIS

 PLAQUETOPENIA
 Estudio de Lámina Periférica
* COMPRENDE EVALUACIÓN MORFOLÓGICA
DE LOS ELEMENTOS FORMES QUE COMPONEN LA SANGRE:
*SERIE BLANCA : LEUCOCITOS
*SERIE ROJA : GLÓBULOS ROJOS
*SERIE PLAQUETARIA: PLAQUETAS
estudio de lámina periférica comprende la evaluación morfológica
de las tres líneas celulares ( elementos formes ) que componen la
sangre
 Serie Blanca : Leucocitos
 Serie Roja : Hematíes
 Serie Trombocítica : Plaquetas
 Extensiones Sanguíneas
 El frotis sanguíneo consiste en la
extensión uniforme de una gota de sangre
sobre un portaobjetos; la misma que se
lleva a cabo con otro portaobjetos
 El frotis sanguíneo se realiza de forma
manual y automatizada ( spinner )
Partes de una extensión
 Cabeza
- Es la zona inicial de la extensión
- Es la región mas gruesa
- En esta región se encuentra el mayor
número de linfocitos y GR apilados
- No es una zona de lectura
 Cuerpo
- Es la zona media del frotis
- Su espesor es el apropiado
- En ella existe una adecuada proporción de leucocitos
- Contiene la zona ideal de observación, que
corresponde a la zona que limita con la cola
 Cola
- Es la zona final de la extensión
- Suele tener un aspecto redondeado
- Es la región mas fina
- Mayor proporción de leucocitos grandes,
hematíes deformados y tonalidad uniforme

 Características de un buen frotis

- La cabeza ha de estar cerca de uno de los
extremos del porta
- La cola debe estar cerca de uno de los bordes
- Toda la extensión ha de ser fina y homogénea
- Los bordes laterales han de estar separados de los
bordes del porta por 1 mm aproximadamente
- Presencia de barbas en el extremo terminal
 Defectos de una extensión
 Presencia de escalones o estrías. originado por una falta
de uniformidad en el momento de realizar la extensión
 Un lámina con zonas huecas redondeadas por efecto de
restos de grasa y suciedad
 Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud
excesivo grosor
 Error en el tamaño de la gota
 Error en la velocidad de la extensión
 Error por causa de un ángulo inapropiado
 Se debe tener en cuenta el Hto del paciente,
dependiendo de esta, se aplicará el ángulo apropiado de
extensión
 Causas de Error en las Tinciones Habituales de Frotis
Sanguíneo
Si la tinción de una extensión sanguínea es
demasiado rosa, probablemente se deba a :
 Un pH bajo de colorante
 Un tiempo de coloración insuficiente
 Un lavado excesivamente prolongado
Si la tinción es demasiado azul probablemente
sea por :
 Un empleo de portas sucios
 Falta de filtración del colorante
 Una coloración excesivamente prolongada
 Un secado del colorante durante al tinción
 Un lavado insuficiente
 Preparación del Colorante de Wright ( Merck )
 Pesar 2 – 3 gr del colorante en polvo comercial
 1000 ml de metanol
 Glicerina ( 5 ml ) – opcional
 Colocar en un mortero el colorante y añadir la glicerina
 Añadir de a pocos el metanol al mortero e ir machacando hasta que
adquiera una coloración azul intensa y luego verter a un frasco color
caramelo o ámbar, previo filtrado con papel filtro
 Repetir la operación hasta que se acabe el metanol
 Guardar en lugar oscuro, fuera de la luz para evitar su oxidación por aprox.
una semana hasta que madure
 Luego de cumplido el tiempo filtrar nuevamente
 Listo para su uso
técnica de tinción :
 Cubrir el frotis con el colorante por 1 – 3 minutos
 Agregar agua tamponada pH 7.2 – 7.4 por 5 – 7 minutos ( homogenizar )
 Verificar la formación de una película plateada sobre el colorante
 Lavar con agua corriente y dejar secar
 Leer con objetivo de inmersión
 Para tener en cuenta
 Un aspecto clave es el grosor del extendido. Una
extensión de calidad no debe ser gruesa ni muy delgada

 Una extensión gruesa dificultará la observación de la

morfología eritrocitaria y la diferenciación entre linfocitos y
monocitos. Además de dificultar al ojo inexperto la tinción
de las células sanguíneas

 Por el contrario, si es muy fina, la mayoría de neutrófilos y

monocitos se hallarán en las áreas periféricas. Esto
alterará la relación normal de la distribución celular
leucocitaria

 Se recomienda entonces, que el grosor ideal, es aquel

que nos permita leer a través de la extensión
 Usted deberá reportar cualquier célula anormal o
indiferenciada que observe
 Deberá reportar GR nucleados si estos exceden al
6% y corregirá su recuento de leucocitos con la
siguiente formula :

Leucocitos contados / mm3 x 100

= leucocitos corregidos / mm3
100 + Nº hematíes nucléados

Ejemplo : si un paciente tiene un conteo de 15,000 leucocitos pmmc y 35 %

de GRN, su conteo corregido será de 11,111 pmmc
 Evaluación de la Serie Roja
 En este punto el observador deberá
reportar su minucioso examen de los GR,
indicando la presencia de Hipocromía,
Anisocitosis y Poiquilocitosis.
 Deberá reportar también inclusiones
eritrocitarias y hemoparásitos si los
hubiera.
 Tambien indicará la presencia de células
inmaduras de la serie roja si las hubieran
M
A
D S
U E R
R R O
A I J
C E
I A
Ó
N
 Hipocromía : cuando una célula roja individual contiene
un área pálida central que es mayor a la tercera parte de
su diámetro se denomina célula hipocrómica
 Rango medio para denominar hipocrómía en 10 campos
microscópicos ( 100 – 160 hematíes por campo )

a. normocromía : 0 - 5
b. leve hipocromía : 6 - 15
c. moderada hipocromía : 16 - 30
d. marcada hipocromía : > 30

 Nota : la hipercromía no esta reportada aquí pero se

relaciona con la presencia de esferocitos.

 Hipercromía : se denomina así a las células rojas

profundamente coloreadas en relación al resto, y esto
debido a su alto contenido en hemoglobina, mayor al
que debería contener
 Acantocitos
 AHA
 A. sideroblástica
 AHM
 Enfermedad hepática
 Enfermedad renal
 Post- esplecnotomía

Drepanocitos
 Células facliformes
 A. drepanocítica
 Enfermedad Hb S - C
 Esquistocitos
 Son GR fragmentados
 AHM
 A. megaloblastica
 Talasemia mayor
 A. hemolíticas
 Leucemia aguda
 Hiperesplenismo

Megalocitos

 Anemias megaloblasticas
 Diámetro > a 11 micras
• ANEMIA MEGALOBLASTICA
• ELIPTOCITOSIS HEREDITARIA
• MIELOFIBROSIS
• TALASEMIA MAYOR
• TRAUMA MECANICO
 Rouleaux
 Cuando los GR se
presentan en fila de
moneda
 Mieloma Multiple
 Incremento de
gamma globulina
 Macroglobulinemia de
Waldenstrom
 Dianocito
Célula en Tiro al Blanco

• ESTOMATOCITOSIS HERDITARIA
• LEUCEMIA AGUDA
• ALCOHOLISMO CON ENFERMEDAD HEPÁTICA
• ARTEFACTOS
• TALASEMIAS
Anillo de Cabot Cuerpos de Pappenheimer

Punteado Basófilo Cuerpos de Heinz

 Pappenheimer
Cuerpos de Howell Jolly

Policromatofilía

Reticulocitos
 Serie Blanca
 La fórmula leucocitaria es la denominación usual
que se da al recuento porcentual de los
diferentes leucocitos que circulan en la sangre
 En condiciones de normalidad esta constituida
por 5 poblaciones de leucocitos :
 Neutrófilos ( en su gran mayoría segmentados )
 Eosinófilos
 Basófilos
 Monocitos
 Linfocitos
 El recuento diferencial leucocitario
suministra información sobre aspectos
cualitativos y cuantitativos de los
diferentes leucocitos de la sangre y
permite la detección de células anormales
 Se basa en la observación microscópica
de 100 a 200 leucocitos dispuestos en una
extensión de sangre ( frotis )
convenientemente teñida
 La calidad de la extensión de la sangre es
de vital importancia para la realización
de una correcta lectura de la lámina.
 Variables que pueden influir en la formula
leucocitaria realizada mediante el método
visual
 Distribución irregular y no aleatoria de los leucocitos en
la extensión
 Realización de la lectura en una zona inapropiada
 Variaciones de la calidad y las características de la
tinción ( tinción ácida o básica )
 Observación de un número insuficiente de células
 Pericia del observador en la identificación celular
 neutrófilos segmentados Vs neutrófilos en banda
 monocitos Vs linfocitos activados o atípicos
 formas inmaduras de granulocitos neutrófilos
 SERIE

MIELOIDE
Mieloblastos :
 Es redondeado
 Diámetro entre 15 – 20 µ
 Su núcleo es grande,
redondeado, rojizo y tiende a
centrarse
 Su cromatina es laxa y
contiene de 2 a 3 nucleolos
visibles
 Su citoplasma es basófilo y
algunas contienes finas
granulaciones azurófilas
 Promielocito :
 Se origina por maduración y
maduración del mieloblasto
 Es redondeado
 Diámetro de 16 – 25 µ
 Núcleo grande,
redondeado, menos rojizo y
tiende a excentrarase
 Cromatina laxa y
generalmente se observa
nucleolos en ella, puede
presentar zonas de
condensación
 Citoplasma abundante,
repleto de gránulos
primarios muy azurófilos
M
I
E
L
O
C
I
T
O
S
JUVENILES O METAMIELOCITOS
METAMIELOCITOS
 CÉLULAS
EN
BANDA
O
EN
CAYADO
O
ABASTONADOS
Células Neutrófilas en Banda
Neutrófilos Vs No Segmentados

Neutrófilos Células en Banda

  Son células redondeadas, de
tamaño entre 12 y 14 um.
NEUTRÓFILOS  Su núcleo está segmentado en
POLISEGMENTADOS 2 a 5 lóbulos, unidos por unos
finos puentes cromatínicos.
 El citoplasma es rosa pálido y
contiene numerosos gránulos
neutrófilos que se tiñen de
color marrón con las
coloraciones panópticas
habituales, así como cierto
número de gránulos primarios
( 10 – 20 % ) o azurófilos
dificilmente visibles al quedar
enmascarados por los
neutrófilos.
 Su núcleo es de color violeta
oscuro y presenta cromatina
densa
 Algunas veces su núcleo
presenta un pequeño ápéndice
en “palillo de tambor”
( cromatina sexual )
Granulaciones Tóxicas Pelger - Huet
Vacuolas Citoplasmáticas Vacuolas Degenerativas
BASÓFILO
 Poseen un núcleo
bilobulado y grandes
gránulos esféricos
basofílicos y
metacromáticos
dados por heparina e
histamina. Liberan
además aminas
vasoactivas y
sustancia de reacción
lenta de la anafilaxia.
Eosinófilos  Célula redondeada
 12 – 17 µ
 Núcleo violeta,
generalmente bilobulado
simétrico unido por un
puente de cromatina o en
forma de anteojos
 Presenta gránulos,
grandes y acidófilos que
no cubren el núcleo
 Estos gránulos se tiñen
con la eosina y contienen
diversas sustancias como
la peroxidasa, fosfatasa
ácida, hidrolasas, etc
Serie Linfoide:
Linfocitos

Linfoblasto

Prolinfocitos
  Diámetro variable de 7 – 18 µ
Linfocitos  Pueden diferir en su relación
N/C
 El citoplasma es variable (
escaso o abundante )
 Su coloración es azul pálida,
pero aumenta en los linfos
reactivos ( estimulados )
 Pueden presentar una
granulación azurófila escasa
en el ciptoplasma
 Núcleo redondeado y
cromatina compacta
 La densidad de la cromatina
puede variar entre los
diferentes estadíos. Es
generalmente elevada pero
pueden presentar zonas mas
laxas
LINFOCITOS ATÍPICOS
MAS LINFOCITOS ATÍPICOS
Plasmocitos  8 – 20 µ de diámetro
 Relación N/C 2:1 o 1:1
 Núcleo redondo u oval
 Cromatina densa azul –
purpura con grandes
muescas cerca al margen
nuclear
 No presenta nucleolos
 Citoplasma moderado,
basófilo, con zona clara
perinuclear adjacente al
núcleo
 Puede contener una o
mas vacuolas
 No presenta
granulaciones
citoplasmáticas
MONOCITOS
 Son las células circulantes de
mayor tamaño. Poseen un núcleo
excéntrico en forma de U ó en
forma “arriñonada”
 El núcleo suele presentar una
ubicación central
 14 – 20 µ de diametro
 Citoplasma abundante y de color
lila pálido
 Presenta fina granulación azurófila
 Presenta cromatina laxa o
filamentosa
 En ocasiones se halla vacualizado

 Son los precursores del sistema

mononuclear fagocítico, que
incluye macrófagos (histiocitos),
osteoclastos, macrófagos
alveolares, células de Kupfer en el
hígado y la microglia en el sistema
nervioso central.
 Promonocito

Serie Monocítica

Monoblasto

Monocito
 Serie Trombocítica
 Debemos reportar la cantidad de plaquetas en
lámina ( trombocitopenias o trombosis )
 Debemos dar un informe detallado sobre la
citomorfología de las plaquetas
 Reportar si hay plaquetas normales,
degranuladas, pequeñas o macroplaquetas
 Se debe informar si existe la presencia de
agregados plaquetarios
 Es muy importante una impecable técnica en el
momento de realizar el frotis, es decisivo.
 Promegacariocito Megacariocito en Brotación

Megacariocito Granular Megacariocito Productor de Plaquetas

 Serie Trombocítica
 Las plaquetas son las
células sanguíneas mas
pequeñas del organismo
 Se producen por
fragmentación simple del
citoplasma de los
megacariocitos.
 Son células anucleadas de
forma discoide de 2 – 4
micras de diámetro y 8
micras de volumen.
Trombocitopenia :  poseen una vida media de
7 - 10 días y su rango va
Leve : 150,000 - 100,000
Moderada : 100,000 - 50,000 de 150,000 a 450,000
Severa : < 50,000 pmmc
Macroplaqueta Plaquetas Normales

≥ 450, 000 pmmc se denomina trombocitosis

≥ 1’000,000 pmmc se denomina trombocitemia

Recuento en Lámina Periférica
Damacheck :

 ( Rcto 1000 GR + F ) x 100

 Factor = ?

 Hto ≤ 35 ( + 5 )
 Hto : 35 - 39 ( + 3 )
 Hto : ≥ 40 ( + 1 )
GRACIAS