Introducción.
El crecimiento del cultivo de bacterias
Medios de cultivo.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de
crecimiento y otros componentes que crean las condiciones
necesarias para el desarrollo de los microorganismos. La
diversidad metabólica de los microorganismos es enorme;
por ello, la variedad de medios de cultivo es también grande,
no existiendo un medio de cultivo universal.
Constituyentes habituales de los medios de cultivo.
Agar: se utiliza como agente gelificante para dar solidez a
los medios de cultivo, el componente dominante en el agar
bacteriológico es un polisacárido, al que acompañan algunas
impurezas y que se obtiene de ciertas algas marinas.
Extractos: para su preparación, ciertos órganos o tejidos
animales o vegetales so extraídos con agua y calor, y
posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o
polvo. Estos preparados deshidratados son frecuentemente
empleados en la confección de medios de cultivo.
Peptonas: son mezclas complejas de compuestos orgánicos
nitrogenados y sales minerales que se obtienen por digestión
enzimática o química de proteínas animales o vegetales. Las
peptonas son ricas en péptidos y aminoácidos, pero pueden
ser deficientes en determinadas vitaminas y minerales.
Tipos de medio de cultivo.
Medios generales: permiten el desarrollo de una gran
variedad de microorganismos.
Medios de enriquecimiento: favorecen el crecimiento de un
determinado tipo de microorganismo, sin llegar a inhibir
totalmente el crecimiento del resto.
Medios selectivos: permiten el crecimiento de un
determinado tipo de microorganismo, inhibiendo el
desarrollo de los demás.
Medios diferenciales: son aquellos en los que se ponen de
relieve propiedades que un determinado tipo de
microorganismos posee.
Preparación de los medios de cultivo.
La producción de un medio de cultivo se reduce
simplemente a pesar la cantidad deseada del mismo y
redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores de
crecimiento) siguiendo las instrucciones del fabricante. Las
sustancias termolábiles se esterilizan por filtración y se
añaden al resto de los componentes previamente esterilizados
en autoclave.
Agar sangre: es un medio general rico en nutrientes, por lo
que permitirá el crecimiento de una amplia variedad de
bacterias. Además, es un medio diferencial, ya que permite
comprobar si la bacteria es capaz de hemolizar los eritrocitos
del medio de cultivo.
Chromocult: principalmente la interacción entre peptonas
cuidadosamente seleccionadas agregadas a piruvato, sorbitol
y una solución tampón de fosfato garantiza el rápido
crecimiento de la colonia, incluso para las coliformes
severamente dañadas.
gran positiva se da bastante bien porque las gram negativas
son inhibidas por el uso de Tergitol®7, que es un agar
selectivo para Scherichia coli y para muchas otras
coliformes, no teniendo efecto negativo sobre las coliformes.
Con este trabajo se espera tener las bases para realizar un
cultivo de bacterias partir de la muestra, tomada de un
hisopado de manos, para luego reforzar los fundamentos de
la tinción de Gram.
Metodología.
El primer paso fue humedecer el hisopo en el diluyente, para
frotarlo así húmedo sobre la mano de quien se tomó la
muestra que posteriormente se sembró en agar Chromocult y
Agar TSA, girando el hisopo para tomar la máxima cantidad
de bacterias. Este hisopo se dejo dentro del tubo con el
diluyente y se uso el otro hisopo para tomar más muestra.
Después de tener listas las muestras se procedió a sembrar,
en Agar TSA y en Agar Chromocult, para el primero se hizo
utilizando el procedimiento del asa y para el segundo usando
directamente el hisopo.
Después de tener en las cajas petri los cultivos se procedió a
preparar un frotis bacteriano para la tinción de Gram, pero
tomando directamente de un hisopo, la muestra para el frotis.
Resultados y discusión.
Al realizar la tinción de Gram, no se tuvo confirmación
visual de la presencia de bacterias, se veían esferas
transparentes, con sus paredes perfectamente definidas, no
teniendo la seguridad de que en realidad fueran bacterias,
pues la orientadora dijo que podían ser burbujas de aire, pues
ninguna mostraba coloración rosada o morada, de acuerdo a
la bibliografía proporcionada por la viñeta del fabricante,
pues se esperaba tener coliformes totales y E. coli,
esperándose para estas últimas, que fueran gram positivas
(coloración violeta).
Después del tiempo de cultivo se observaron las cajas petri y
no se observaban formación de colonias, solo a un cultivo
con TSA, se le observaba un punto beige. A las que se
sembraron en Chromocult, no se les vio ninguna colonia.

Fig. 1: cultivo en Agar TSA, solo en este se logró ver el cultivo.
Se realizaron mas cultivos, en agar Chromocult, a partir de
una cepa y después de la incubación, esta si tenía formación
de colonias. Una causa de error para el sembrado pudo ser,
que debido a la presencia de muy pocas bacterias, obtenidas
del hisopado. Una manera de obtener mas, era quizá ejecutar
el sembrado, pero tomando muestra directamente después de
frotar el hisopo en las manos de la persona.
fig. 2: este cultivo de bacterias felices, en Agar Chromocult.
Conclusiones.
 No se pudo ver coloración en la tinción de Gram,
porque la cantidad de bacterias era muy pequeña,
como para ser vistas las agrupaciones que estas
forman.
 El Agar TSA es un medio de cultivo bastante bueno,
pues, aun con poca presencia de bacterias estas
lograron sobrevivir en TSA y no en Chromocult.
Bibliografía.
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Medios de cultivo. En: Manual práctico de
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 http://www.neogen.com/Acumedia/pdf/ProdInfo/71
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