PRUEBA FITOQUIMICA DEL EUCALIPTO ( EUCALYPTUS GLOBULUS LABILL) AUTOR: ROLVIDEER JAVIER GONZALEZ OBJETIVOS:

y Determinar metabolitos secundarios ( en especial flavonoides) en las hojas del eucalipto

INTRODUCCIN:
Es de conocimiento general que los metabolitos secundarios presentes en una planta de una determinada regin, pueden no encontrarse en plantas de la misma especie y familia de una regin diferente. En base a esta peculiaridad el presente trabajo va dirigido a la determinacin de metabolitos secundarios en el eucalipto y posterior comparacin con estudios realizados en Colombia y argentina sobre la presencia de tales principios activos. El eucalipto ( Nombre cientfico: Eucalyptus globulus labill) perteneciente a la familia de las mirtceas es una planta natural de Australia y de Tasmania, donde se pueden encontrar mas de 300 especies. Por la rapidez del crecimiento, se puede encontrar cultivado en muchas regiones del mundo para la produccin de madera, fabricacin de pulpa de papel y la obtencin de aceite esencial. Ha sido especialmente utilizado para sanear zonas pantanosas al eliminar la humedad de las mismas con la consiguiente erradicacin de sus plagas de insectos, principalmente mosquitos. Adems es muy utilizada para tratar enfermedades de las vas respiratorias, siendo eficaz para el tratamiento del catarro, la gripe, el asma y otros problemas de la respiracin.

MARCO TERICO
Existen 13 subclases de flavonoides con un total de ms de 5 000 compuestos, 10 todos presentando un esqueleto hidrocarbonado del tipo C6-C3-C6 (difenilpropano) derivado del cido shiqumico y de 3 restos de acetato (figs. 1 y 2).

Fig. 1. Estructura bsica de los flavonoides

Fig. 2. Subclases de flavonoides

Estudios recientes han determinado que los componentes comunes en plantas de eucalipto son los siguietes: y y Acidos: Clorognico, elagico(corteza), cafeico, galico, gentisico(hojas) Aceites esenciales: ricos en pineno, alfa-pineno, beta- pineno, gama-terpineno, anfeno, cineonol=eucaliptol, pineol, citriodorol, globulol, lindol, d-linalolo, d-mirtenol, geraniol, timol(hojas) Eucaliptina(hoja) Taninos Flavonoides: rutina y quercetrina(hojas)

y y y

MATERIALES
1 Equipo de reflujo 2 Probeta de 100 ml 1 Equipo de filtracin 1 Termmetro 1 Equipo de calentamiento 3 Vasos de precipitado de 100 ml 1 Embudo 4 Tubos de ensayo Equipo de decantacin.

REACTIVOS
Carbn activo Cloroformo Amoniaco Acido cloridrico Metanol Etanol Reactivo gelatina Reactivo cloruro ferrico Sulfato de sodio Reactivo de shinoda

PROCEDIMIENTOS
Recolectar las muestras(hojas), secar por una semana en sombra y lugar oscuro. Macerar 50 g de muestra en 50 ml de metanol durante 20 horas a temperatura ambiente, reflujar 4 hs y luego filtrar en caliente, lavar con metanol y llevar a 50 ml. Tomar una porcin de muestra(solucin) y tratar con R. Gelatina y R. Clorura Frrico para determinacin de tanino. Parte de la solucin muestra llevar a sequedad/rotavapor, extraer con 15 ml de acido clorhdrico al 1% a 50C. filtrar sobre carbn activado. El filtrado anterior alcalinizar con amoniaco y extraer los principios activos con cloroformo ( 2x25 ml). Decantar la solucin y la fase acuosa saturar con sulfato de sodio( 0,1g sal anhidra x ml de solucin) para luego extraer con una solucin cloroformo-etanol(3:2)( 2x25 ml) Decantar para separar al fase cloroformo-etanolica y la fase acuosa-remanente.

Una muestra de la solucin cloroformo-etanolica se trata con el reactivo de shinoda para la deteccin de flavonoides. La fase acuosa remanente se trata con shinoda, leucoantocianidinas, rosenhim para determinacin de flavonoides.

CUANTIFICACION DE RUTINA EN UNA SOLUCION DE EUCALIPTO LECTURA ESPECTROFOTOMTRICA Y CUANTIFICACIN

Leer absorbancia a 360 nm y determinar concentracin mediante interpolacin con la curva de calibracin. Determinar el porcentaje de rutina en la muestra y comparar con lo reportado para muestras autnticas. Para obtener la curva de calibracin, tomar alcuotas de la solucin estndar y llevar a 10 ml segn la tabla siguiente. Leer absorbancias de cada solucin a la longitud de onda de trabajo. Realizar una curva de Absorbancia vs. Concentracin en ppm. Alicuota(ml) 0,6 0,9 1,2 1,5 1,8 Volumen final (ml) 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 Absorbancia a 360nm Concentracin de rutina (ppm)

RESULTADOS ESPERADOS

BIBLIOGRAFAS Y REFERENCIAS
http://redalyc.uaemex.mx/pdf/856/85611977011.pdf http://www.forestales.net/archivos/forestal/especial%20cantabria/cantabria_eucalipto.html http://scienti.colciencias.gov.co:8084/publindex/docs/articulos/03043584/2291758/24.pdfhttp://www.blacpma.org/archivos/BLACPMA08050445.pdf